不同乳酸菌添加剂和切割长度对牧草青贮品质的影响

文生萍，窦永芳，黄 晶

（青海畜牧兽医职业技术学院，青海湟源 812100）

青贮牧草不仅可以维持牧草的营养价值，还可以弥补冬春季节饲草料的不足，因此，青贮对牛羊等反刍动物具有重要意义。牧草表面天然附着有少量乳酸菌，可以帮助牧草自然发酵（侯美玲，2017）。然而，不同牧草表面附着的天然乳酸菌数量和种类差异较大，需要在制作青贮的过程中人为补充外源乳酸菌添加剂，帮助青贮饲料迅速进入乳酸发酵过程，以得到优良的青贮饲料（韦方鸿等，2017）。乳酸菌添加剂的主要作用在于调节青贮系统内的微生物区系，加速乳酸菌等有益菌的繁殖，抑制需氧菌等有害菌的繁殖，调控青贮发酵过程，维持饲料营养价值（苗芳，2017）。许多研究表明，对于不同饲料类型，添加不同类型的乳酸菌添加剂对其青贮品质具有不同效果（孙茜等，2018；贾婷婷等，2018a；贾婷婷等，2018b；韦方鸿等，2017）。而对于不同乳酸菌添加剂对于羊草青贮的影响研究较少。研究表明，不同切割长度对饲料青贮质量具有显著影响（张华琦等，2016；侯建建等，2016；叶方，2013）。而关于不同切割长度对羊草青贮品质的影响研究较少。因此，本试验以羊草为研究对象，研究不同类型的乳酸菌添加剂和切割长度对羊草青贮品质的影响，以期为生产中羊草青贮提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料 选择当地种植的羊草作为青贮原料。试验用乳酸菌添加剂为植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌，均购自于XX公司。

1.2 试验设计 本试验采用2×2两因子试验设计，其中乳酸菌添加剂分别为植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌，切割长度分别为1.5 cm和3 cm，共分为4个处理组，每组3个重复。

1.3 青贮方法 将羊草用青贮铡切机切割成不同长度，加入不同的乳酸菌添加剂，混合均匀后装入聚乙烯青贮袋，用青贮打包机压实和抽真空后封口，于室温放置60 d后开封，采集样品并进行后续分析。

1.4 测定指标和方法

1.4.1 青贮牧草的感官品质评价 青贮袋开封后，分别从青贮袋的上、中、下三层取出同等数量的样品（各300 g），按照《青贮饲料质量评定标准》，根据色泽、气味和质地等感官指标进行现场评定。

1.4.2 青贮牧草的酸度测定 从经过感官品质评定的青贮牧草中，采用四分法准确称取20 g样品放入300 mL烧杯中，加入180 mL蒸馏水，用玻璃棒搅拌均匀，置于4℃冰箱中浸提24 h，先后用4层纱布和定性滤纸进行过滤，收集滤液。用pH测定仪测定滤液的pH（李平等，2012）。

1.4.3 青贮牧草的有机酸测定 将收集的滤液经3500 g/min，离心15 min得到上清液。使用高效液相色谱法分析乳酸、乙酸、丙酸和丁酸含量（KC-811column，Shodex；Shimadzu，日本）。具体参数设置参考（许庆方，2005）的方法。

1.4.4 青贮牧草的氨态氮测定 采用苯酚－次氯酸钠比色法进行测定（Broderick and Kang，1980）。

1.4.5 青贮牧草的营养成分测定 采用烘干法，在鼓风干燥箱中在65℃条件下烘干48 h测定干物质含量（DM）；采用凯氏定氮法，利用FOSS全自动凯氏定氮仪测定粗蛋白质含量（CP）；采用蒽酮-硫酸法测定可溶性碳水化合物（WSC）（Mcdonald and Henderson，2010）； 采 用 Van Soest（Van等，1991）的方法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的含量。

1.5 数据统计分析 采用SAS 9.2 统计软件的两因素方差分析过程进行分析，用Duncan’s法进行多重比较，以P＜0.05为差异显著。

2 试验结果

2.1 不同乳酸菌添加剂和切割长度对青贮牧草感官指标及pH的影响 由表1可以看出，在袋装青贮结束后，各处理组间牧草青贮颜色基本一致，均呈黄绿色。1.5 cm切割长度组牧草青贮的质地比3 cm组的稍好，且酸香味比较强烈。各组合处理组间牧草青贮没有发霉气味。各处理组的牧草的茎叶结构大都保存完好，但1.5 cm切割长度组的茎叶结构比3 cm组的要更加清晰和完整。

2.2 不同乳酸菌添加剂和切割长度对青贮牧草发酵品质的影响 由表2可以看出，不同乳酸菌添加剂和不同切割长度对青贮牧草的发酵品质具有显著影响，且交互作用显著。其中，植物乳杆菌添加组青贮牧草的乳酸含量、乙酸含量显著高于鼠李糖乳杆菌添加组（P＜0.05），而丙酸和丁酸含量与鼠李糖乳杆菌添加组差异不显著（P＞0.05）。1.5 cm切割长度添加组青贮牧草的挥发性脂肪酸含量显著高于3 cm组（P＜0.05）。植物乳杆菌添加组青贮牧草的pH显著低于鼠李糖添加组（P＜0.05），1.5 cm长度组青贮牧草的pH显著低于3 cm长度组（P＜0.05）。切割长度对青贮牧草的氨态氮含量具有显著影响，其中1.5 cm切割长度组的氨态氮含量显著低于3 cm切割长度组（P＜0.05）。植物乳杆菌添加组氨态氮含量显著低于鼠李糖乳杆菌添加组（P＜0.05）。

表1 不同乳酸菌添加剂和牧草切割长度对牧草青贮感官指标的影响

表2 不同乳酸菌添加剂和牧草切割长度对青贮羊草发酵品质的影响

2.3 不同乳酸菌添加剂和切割长度对青贮牧草营养成分含量的影响 由表3可以看出，乳酸菌添加剂和切割长度对青贮羊草的干物质、可溶性糖和粗蛋白质含量均无显著影响（P＞0.05），而对中性洗涤纤维和酸性洗涤含量具有显著影响（P＜0.05）。随着切割长度的增加，青贮羊草的可溶性糖含量呈增加趋势，其中植物乳杆菌添加组青贮羊草的可溶性糖含量低于鼠李糖乳杆菌添加组。植物乳杆菌添加组青贮羊草的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维显著低于鼠李糖乳杆菌添加组，分别低2.63%和3.21%（P＜0.05）。1.5 cm切割长度组的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量显著低于3.0 cm切割长度组，分别低2.68%和3.52%（P＜ 0.05）。

表3 不同乳酸菌添加剂和牧草切割长度对青贮牧草营养成分含量的影响（DM基础） %

3 讨论

本试验中各处理组合中青贮羊草的感官品质均达到优良标准以上，且pH值在3.8～4.2，说明各组的青贮羊草质量较好。研究表明，优良青贮饲料的pH在3.8～4.2，当pH下降到4.2以下时，乳酸菌等有益菌发挥主要作用，低pH有利于抑制其他有害菌的繁殖（邵新庆等，2014）。本试验中，1.5 cm切割长度组的pH显著低于3.0 cm切割长度组，这表明适当切短的羊草有利于青贮过程中的物料压实状态，更好的排除空气，加快乳酸菌繁殖，迅速降低pH（张华琦等，2016；叶方，2013）。本试验结果表明，植物乳杆菌添加剂组青贮羊草的pH显著低于鼠李糖乳杆菌添加剂组，与赖玉娇等（2014）和李雁冰等（2015）的研究结果一致。这可能是由于植物乳杆菌有效抑制有害微生物的繁殖，加快乳酸菌增殖，产生大量乳酸有关（樊振等，2014；邵新庆等，2014）。研究表明，饲料中氨态氮占总氮的比例反映了青贮饲料中蛋白质和氨基酸分解的程度，较高的氨态氮表明，饲料中氨基酸和蛋白质分解增加，青贮饲料的质量降低。本研究结果表明，1.5 cm切割长度组青贮羊草的氨态氮含量显著低于3.0 cm切割长度组，表明适当降低切割长度有利于提高青贮羊草的质量。本试验结果与侯建建等（2016）和张华琦等（2016）的研究结果一致。研究表明，青贮饲料中的乳酸含量是评价青贮过程和青贮质量的重要指标，乳酸含量高表明青贮发酵完全，乳酸菌数量占优势，而丁酸含量代表有害菌繁殖的程度和数量（李雁冰等，2015；赖玉娇等，2014）。本试验结果表明，适当切短羊草显著提高了乳酸含量，降低了丁酸含量，与王安奎等（2005）、李昌茂等（2008）、叶方等（2009）的研究结果一致。这可能与较短的羊草有利于青贮袋的压实，减少氧气含量，抑制需氧菌的繁殖，加速乳酸菌等厌氧菌的增殖，迅速形成较低的酸性环境有关。饲料中适当的可溶性糖含量是影响青贮的重要因素，乳酸菌的增殖离不开可溶性糖。本试验中，植物乳杆菌组青贮羊草的可溶性糖含量低于鼠李糖乳杆菌组，表明植物乳杆菌组乳酸发酵高于鼠李糖乳杆菌组。同时，本试验结果发现，植物乳杆菌添加剂和1.5 cm切割长度可以显著降低中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的含量，提高青贮羊草的质量。

4 结论

本试验结果表明，羊草青贮过程中添加乳酸菌可以提高青贮羊草的质量，其中以添加植物乳杆菌的改善效果较好。另外，羊草青贮建议切割成1.5 cm的长度进行青贮能达到较好的青贮效果。