NaCl及其联合CaCl2处理下发芽大豆GABA含量变化

◎ 熊 婷，周炜玮，周苗苗，校兰平，尹永祺

（扬州大学食品科学与工程学院，江苏 扬州 225127）

大豆[Glycine max（Linn.）Merr.]是我国重要的油料作物[1]。大豆萌芽过程中会发生大量复杂的生理生化变化[2-4]，尤其是γ-氨基丁酸（GABA）得以积累。因此大豆是生产富含GABA产品的重要植物原料。GABA是哺乳动物最重要的抑制性神经传达物质之一，已被卫生部批准为新资源食品[5]。

植物籽粒在萌芽过程中NaCl的胁迫有利于GABA富集，但是由于植物盐敏感性，NaCl会对其产生一定的迫害作用，从而影响GABA的富集，为解除NaCl的迫害作用同时达到GABA高含量富集的目的，本研究通过CaCl2处理缓解NaCl对大豆的胁迫作用，通过单因素分析，研究NaCl浓度、CaCl2浓度以及发芽时间对大豆发芽富集GABA的影响。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

大豆籽粒：购于2017年，产自东北吉林省，保存于4 ℃的条件下，备用。

乙腈（色谱纯，美国Sigma公司），二甲氨基苯磺酰氯（色谱纯，东京化成工业株式会社），其他试剂均购自国药集团化学试剂有限公司。

1.2 仪器与设备

1200 Series高效液相色谱仪（美国Aglient公司），发芽机（永康市贝欣五金电器厂），PJX-250D光照发芽箱（金坛市水北科普实验仪器厂）。

1.3 试验方法

1.3.1 大豆发芽处理

称取20 g大豆，去离子水冲洗后置于1%（v/v）NaClO水溶液中浸泡消毒15 min，去离子水冲洗至pH中性后于30 ℃下浸泡4 h；置于发芽机避光发芽，培养液进行以下处理：①NaCl浓度的影响。发芽温度30 ℃，发芽时间 4 d，6 mmol/L CaCl2，NaCl浓度为40～80 mmol/L。②CaCl2浓度的影响。于30 ℃发芽4 d，50 mmol/L NaCl，CaCl2浓度为2～10 mmol/L。③发芽时间的影响。发芽温度30 ℃，发芽时间为2～6 d，50 mmol/L NaCl和6 mmol/L CaCl2。每隔24 h更换培养液。

1.3.2 GABA含量测定

GABA含量参照Bai[6]的方法测定。

2 结果与分析

2.1 不同NaCl浓度处理下发芽大豆形态和GABA含量变化

由图1、图2可知，与正常发芽的大豆比较，NaCl胁迫下大豆生长受到抑制，在NaCl浓度为40～80 mmol/L范围内，其浓度越高，大豆发芽受抑制程度越严重。

图1 NaCl处理下大豆形态图

图2 NaCl处理下GABA含量变化图

大豆发芽4 d后，其GABA含量随NaCl浓度上升呈上升趋势，各浓度处理间芽长具显著差异（P＜0.05）。经80 mmol/L NaCl发 芽4 d， 其GABA含 量 为0.1891 mg/g，显著高于其他处理。

2.2 不同CaCl2浓度处理下发芽大豆形态和GABA含量变化

由图3、图4可知，经CaCl2处理后，大豆的生长虽然仍受到抑制但随CaCl2浓度的上升逐渐恢复对照组的形态特征。

图3 不同浓度CaCl2处理下发芽大豆形态图

图4 不同浓度CaCl2处理下GABA含量变化图

CaCl2浓度为2～6 mmol/L时，GABA含量随CaCl2浓度上升而显著增加（P＜0.05），其后无显著变化。发芽4 d，经6 mmol/L CaCl2处理大豆中GABA含量最高，是对照组的4.75倍。

2.3 发芽时间对发芽大豆GABA含量的影响

图5显示，随发芽天数增加，发芽大豆中GABA含量显著增加（P＜0.05），发芽5 d后其GABA含量下降，GABA含量最高为0.3098 mg/g。

图5 发芽时间对发芽大豆GABA含量的影响图

3 结论

培养天数5 d、NaCl 80 mmol/L、CaCl26 mmol/L为发芽大豆富集GABA的最佳培养条件。