真菌对AVE-762B全自动尿沉渣分析仪白细胞检测的影响

刘静 盘锦市中心医院妇产院区检验科 （辽宁 盘锦 124000）

内容提要： 目的：分析探讨真菌对AVE-762B全自动尿沉渣分析仪白细胞检测的影响。方法：将浓度一致的真菌、红细胞与尿液依照不同的比例进行混合，制成不同浓度与成分的混合尿，运用AVE-762B全自动尿沉渣分析仪对混合尿进行检测，观察并统计白细胞、红细胞及真菌相应检测结果，并比较在加入真菌前后对检测结果的影响。结果：纯真菌尿对于白细胞计数存在干扰，高浓度的含有真菌的混合尿对于白细胞计数存在干扰，比之于对照组的白细胞计数差异显著（P＜0.05）；低浓度的含真菌的混合尿对于白细胞计数没有干扰，比之于对照组的白细胞计数差异不具有统计学意义（P＞0.05）。结论：尿液中的有形成分及其浓度的不同将会对AVE-762B全自动尿沉渣分析仪检测白细胞产生不同的影响，因而临床上对于可疑的尿沉渣结果应当通过手工镜检进行复查，保证检测结果的准确性。

全自动尿沉渣分析仪是近年来进行尿常规分析常用的检测方法，其具有操作简便、重复性好、可靠性高等优点，因而被广泛应用于疾病的临床鉴别和诊断[1]。然而在实际检测工作中，真菌的出现将会影响全自动尿沉渣分析仪对于尿中白细胞的检测结果。鉴于此，此次研究通过配制不同类型、浓度的混合液，运用AVE-762B全自动尿沉渣分析仪检测尿中白细胞，分析探讨真菌对AVE-762B全自动尿沉渣分析仪白细胞检测的影响，现将整个研究报告如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年10月～2017年12月期间于本院住院部及门诊部所采集的随机尿常规检测的新鲜尿液作为检测标本。

1.2 方法

（1）AVE-762B全自动尿沉渣分析仪以及与仪器相配套的试剂；日本Olympus公司所研制的CH-20型双目显微镜；改良的牛鲍计数板。

（2）制备底液以及各种母液[2]：选取pH为5.5～7.0、尿液的密度为1.010～1.025，且经尿十项检测均显示为阴性的尿液标本，设定转速为4000r/min对尿液标本进行离心，保留上层清液为底液A。选取3份相同血型，且血常规指标正常的尿液标本各1mL进行混合，并用生理盐水进行3次离心洗涤，然后设定转速3000r/min，离心3min，去除上层清液并将其作为红细胞母液BR。选取脑膜炎患者的脑脊液2份，以生理盐水予以离心处理，设定转速为l500r/min，去除上清液，设为白细胞母液BW。以标准菌株为ATCC90028经培养以后，选取其至少10个菌落，以生理盐水进行离心洗涤，设定转速为3000r/min，并设为真菌母液BY。

（3）实验分组以及观察指标：将所配制的3种母液用底液A进行重悬，以牛鲍计数板实施50次充池计数，对其中的各种成分进行调整，保证3种纯母液内各自成分的浓度均达到4000个/µL，并将其记为BR、BW与BY。设定研究组与对照组，而研究组包括白细胞-红细胞（WBC-RBC）混合尿组以及白细胞-红细胞-真菌（WBC-RBC-YCL）混合尿组。然后将不同剂量的底液A与不同剂量的BR、BW及BY进行混合，保证上述每组中的白细胞、红细胞及标准理论值分别达到50/µL、100/µL、200/µL、500/µL、1000/µL以及2000/µL，而总量是5mL。以AVE-762B全自动尿沉渣分析仪对每一组混合标本进行检测，要求每一组标本均平行测定5次，并测定每组标本中的白细胞、红细胞及真菌计数，保证所有检测均在2h内完成。1.3统计学分析

运用SPSS19.0统计学软件对此次研究所观察的数据资料予以统计分析，其中计量资料以均数±方差来表示，并对其进行t表示，若结果有P＜0.05，则表示组间比较差异明显，具有统计学意义。

2.结果

运用全自动尿沉渣分析仪对不含真菌的WBC-RBC混合尿中各种细胞的计数较为准确可靠，且仪器没有报警提示，而出现BACT可能是由于WBC母液本身含有所致。纯真菌尿对于白细胞计数存在干扰，高浓度的含有真菌的混合尿对于白细胞计数存在干扰，比之于对照组的白细胞计数差异显著（P＜0.05）；低浓度的含真菌的混合尿对于白细胞计数没有干扰，比之于对照组的白细胞计数差异不具有统计学意义（P＞0.05），见表1。

3.讨论

全自动尿沉渣分析仪，其具有操作简便、重复性好、可靠性高等优点，因而被广泛应用于疾病的临床鉴别和诊断。然而在实际检测工作中，真菌的出现将会影响全自动尿沉渣分析仪对于尿中白细胞的检测结果。

此次研究结果表明，真菌对尿液白细胞计数产生的干扰主要表现为以下两个方面：（1）当尿液中仅存在真菌时，仪器会将真菌误认为是“白细胞”或“红细胞”，纯真菌尿将会出现这种现象，有时候可能会将真菌记录为“0个/µL”，从而导致真菌假阴性或白细胞假阳性现象出现[3]；（2）如果尿液标本中白细胞、红细胞及真菌同时存在，在白细胞与红细胞计数≤200个/µL，也就是白细胞的浓度较低时，检测时对于白细胞识别与计数将准确无误，并且不会随着真菌的浓度升高而导致白细胞计数其假性上升，此时仪器对于红细胞的识别与计数容易出现错误。如果白细胞与真菌浓度在500个/µL及以上，也就是白细胞浓度比较高时，真菌将会对白细胞计数产生干扰，导致其假性上升，但尿中各有形成分的组成及浓度对于白细胞计数所产生的干扰将不同[4]。在WBCRBC-YCL混合尿进行测定时，理论值为≥500个/µL的浓度组中，真菌将会对尿中白细胞计数产生较明显的干扰性，引起白细胞计数的假性上升。

综上所述，尿液中的有形成分及其浓度的不同将会对全自动尿沉渣分析仪检测白细胞产生不同的影响，因而临床上对于可疑的尿沉渣结果应当通过手工镜检进行复查，保证检测结果的准确性。

表1. WBC-RBC混合尿中各种成分比较(±s)

表1. WBC-RBC混合尿中各种成分比较(±s)

理论值 WBC RBC BACT YLC AVE-762B 手工计数 AVE-762B 手工计数50 42.75±0.67 45.82±1.65 47.15±1.06 49.21±1.93 17.35±3.33 0 100 92.26±1.78 95.81±1.47 98.07±1.75 100.62±2.98 31.53±4.56 0 200 185.61±2.42 189.82±2.67 197.13±3.16 199.02±3.15 45.65±6.67 0 500 480.43±3.75 487.02±4.45 497.65±4.82 503.42±5.91 106.85±10.26 0 1000 951.07±6.46 977.6±5.45 994.23±5.35 1001.62±7.55 204.46±16.88 0 1333 1241.25±7.88 1253.33±8.55 1294.53±5.66 1313.97±8.83 243.26±20.55 0 2000 1874.18±9.22 1897.61±9.22 1966.80±6.62 1992.60±10.15 266.51±25.43 0