奥氮平含量的HPLC法测定

2018-08-07刘红霞张国哲

科教导刊 2018年12期

刘红霞　张国哲

摘要目的：利用高效液相色谱法测定奥氮平片中奥氮平含量。方法：采用C8色谱柱，流动相为十二烷基硫酸钠12g-乙腈，流速为1.5ml/min，检测波长260nm建立色谱方法测定奥氮平含量。结果：奥氮平浓度在60 g/ml～140 g/ml范围内，其峰面积（Y）与浓度（X）呈良好的线性关系，线性方程为Y=59133X+25872，R=1.000；其稳定性、重复性、精密度试验均RSD<2.0。结论：该方法操作简便、结果准确、灵敏度高、重复性好，可用于测定奥氮平含量。

关键词奥氮平含量高效液相色谱

中图分类号：R927 文献标识码：A DOI：10.16400/j.cnki.kjdkx.2018.04.069

Determination of Olanzapine Content by HPLC

LIU Hongxia， ZHANG Guozhe

（Jiangsu Vocational College of Medicine， Yancheng， Jiangsu 224005）

Abstract Objective： to determine the content of olanzapine in olanzapine by HPLC. Methods： using C8 chromatographic column， the flow phase was 12g-acetonitrile with sodium dodecyl sulfate， and the flow rate was 1.5ml/min， and the detection wavelength of 260nm was established to determine the content of olanzapine. Results： the concentration of olanzapine was in the range of 60 mu g/ml ～140 mu g/ml， and its peak area（Y） was in good linear relation with concentration（X）.The linear equation was Y=59133X+25872，R=1.000.Its stability， repeatability and precision test are all RSD<2.0.Conclusion：the method is simple， accurate， sensitive and reproducibility， and can be used to determine the content of olanzapine.

Keywords olanzapine； content； high performance liquid chromatography

奥氮平（结构如图1）的化学名为2-甲基-4-（4-甲基-1-哌嗪基-）-10H-噻吩并[2，3-6][1，5]苯并二氮杂，有一定的抗精神病作用，可改善精神分裂症和其它有严重阳性症状（如：妄想、幻觉、思维障碍、敌意和猜疑）的精神病，同时也对阴性症状（如：情感淡漠、情感和社会退缩、言语贫乏）的急性期和维持治疗有部分效果。试验表明其治疗作用显著且副作用低，尤其是锥体外系反应和迟发性运动障碍发生率很低，广泛用于多种精神疾病的治疗。

关于奥氮平药理作用的报道常见于文献，但关于其含量的测定并不多，中国药典也未收录该药物，因此缺乏相应的药品标准。本实验参加美国药典对于奥氮平片含量的测定方法，拟采用HPLC法进行含量测定。

1 材料

1.1 仪器

LC-2010AT岛津高效液相色谱仪，LC Solution色谱数据工作站；KQ-3000型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；BS21S型十万分之一电子天平（德国Sartorius）。

1.2 药品与试剂

奥氮平（110302，江苏万特制药）；奥氮平对照品（100948-200801，中国药品生物制品检定所），杂质A（20110201，台州市华鼎化工）；乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为超纯水。

2 方法和结果

2.1 色谱条件

以辛基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液-乙腈（50：50）为流动相；流速为每分钟1.5ml；检测波长为260nm。

2.2 溶液的制备

（1）磷酸盐缓冲液：称取磷酸二氢钠6.9g，加水1000ml使溶解，用磷酸试液调pH至2.5，再加十二烷基硫酸钠12g。

（2）对照品溶液：取奥氮平对照品25 mg，精密称定，置于25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，量取各溶液1ml分别置于10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。

（3）供试品溶液：取奥氮平样品25mg，配制方法痛对照品溶液

说明：笔者在奥氮平有关物质方法学验证过程中，验证了奥氮平起始物、奥氮平杂质A（结构如图2）与奥氮平杂质B三种物质，其中奥氮平起始物和奥氮平杂质B均未测出，为了防止奥氮平杂质A对奥氮平含量测定时对其含量产生影响，故奥氮平含量方法学验证实验中加入奥氮平杂质A，考察其影响。

2.3 系统适用性试验

取奥氮平对照品25 mg，精密称定，置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀释至刻度，摇匀；杂质A贮备液：取杂质A25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，量取该溶液1ml至10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀；量取奥氮平贮备液与杂质A贮备液各1ml，置同一10ml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀；同法配制6份。精密量取系统适用性溶液各20l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图（见图3）。

结果：6份相同浓度的系统适用性溶液主峰峰面积RSD值为0.1%小于2.0%，主峰保留时间RSD值为0.79%小于1.0%；奥氮平与杂质A的分离度大于2.0，理论塔板数按奥氮平计算高于3000，奥氮平峰的拖尾因子在0.8～1.5范围内，系统适用性好。

2.4 精密度试验

精密量取供试品溶液20l，注入液相色谱仪，重复进样6次，记录色谱图，计算主峰面积RSD值，6次进样奥氮平峰面积的RSD值为0.26，小于2.0%，精密度良好，结果见表1。

2.5 溶液稳定性试验

将供试品溶液在室温条件下放置，分别于0h、2h、4h、6h、8h、10h精密量取供试品溶液20 l注入液相色谱仪，记录色谱图，计算主峰面积的RSD值。结果： 10h内，主峰面积的RSD值为0.12%，小于2.0%；说明在室温下，本品含量测定供试品溶液室温放置10h内稳定。

2.6 重复性试验

同法配置供试品溶液六份，对照品溶液两份，精密量取各溶液20 l注入液相色谱仪，记录色谱图，计算奥氮平含量。结果：按外标法以峰面积计算得到的六份奥氮平样品含量的RSD值为0.051%，小于2.0%，重复性良好。

2.7線性关系考察

取奥氮平样品约20mg，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取该贮备液3ml、4 ml、5 ml、6 ml、7 ml分别置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为60g/ml、80g/ml、100g/ml、120g/ml、140g/ml系列浓度的溶液。精密量取供试品溶液各20l注入液相色谱仪，每个浓度点平行进两针，记录色谱图；以样品浓度为横坐标（X），主峰峰面积的平均值为纵坐标（Y），进行线性回归分析，奥氮平浓度在60 g/ml～140 g/ml范围内，浓度（X）与奥氮平峰面积（Y）呈良好的线性关系R=1.0000。结果见表2。

2.8 样品含量测定

取3批样品各适量，分别按照2.2项下方法制备供试品溶液，再按照2.1项下色谱条件进样测定，外标法计算样品含量，结果见表3。

3 讨论

本实验结合着文献及药典的报道，形成了一种简单的奥氮平的HPLC含量测定法，笔者最初考虑的奥氮平杂质A在本方法中不影响奥氮平含量的测定，此奥氮平方法学验证结果表明该方法重复性好、灵敏度高、专属性强，适合奥氮平的含量测定。

课题名称：酒精性肝病的诊断标记物挖掘及中药葛根葛花的防治作用研究（项目：江苏省卫计委2017指导性课题，项目编号：Z2017017）

参考文献

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