金属基质蛋白酶2与食管癌临床特征关系的Meta分析

张卫国 王晶 雷彩鹏 范俊利

在世界范围内，食管癌是肿瘤的第六大死因[1]。食管癌早期症状不明显，出现临床症状时往往已是中晚期。近年来诊断、分期和多学科综合治疗的发展，使得食管癌患者生存率有所改善，但5年总生存率仍为15%～25%[2]。食管癌治疗失败的原因主要归结为淋巴结转移及肿瘤侵袭。相关研究发现，肿瘤的局部侵袭能力大小与金属基质蛋白酶（MMP）高度相关[3]。其中金属基质蛋白酶2（MMP-2）的主要作用是降解Ⅳ型胶原蛋白[4]，在食管癌的发生、发展、浸润及远处转移中具有一定的作用，受到学者的关注。随着研究的深入，国内外学者就MMP-2与食管癌临床特征的关系进行研究，但结果不一。一些研究表明MMP-2在食管癌中高表达，与淋巴结转移、肿瘤浸润深度、肿瘤大小、TNM分期密切相关，与肿瘤分化程度无关[5-6]。一些研究认为MMP-2与肿瘤大小无关[7-8]。有研究表明MMP-2与食管癌的肿瘤大小、分化程度、TNM分期、淋巴结转移均无关[9]。因此，本研究收集国内外发表的相关文献，对MMP-2与食管癌临床特征的关系进行Meta分析，为食管癌的治疗提供依据。

1 资料和方法

1.1 文献检索 利用计算机检索PubMed、EMbase、知网、维普、万方数据库，最终纳入28篇关于MMP-2与食管癌临床特征关系的病例对照研究。中文检索词包括食管癌、MMP-2；英文检索词包括esophageal carcinoma、esophageal cancer、matrix metalloproteinase 2、MMP-2。采用主题词与自由词相结合的方式，手动检索时限为建库至2017年3月的参考文献，语言限定：中文、英文。纳入标准：（1）评价MMP-2与食管癌临床特征关系的病例对照研究；（2）研究结果反映MMP-2在食管癌中的表达及其与临床特征的关系，可直接或间接提供OR值及95%CI；（3）MMP-2的检测采取免疫组化方法。排除标准：（1）质量差、基本数据不全的文献；（2）重复发表的文献（对于重复报道的文献，只纳入最新发表或高质量的文献）；（3）仅有摘要，无法获得全文数据的文献。

1.2 方法

1.2.1 文献质量评价 应用纽卡斯尔-渥太华文献质量评价量表进行文献质量评价[10]。纳入质量评分≥6分的文献。

1.2.2 文献资料提取 由2位研究者分析并获取纳入文献的原始数据，再比较双方所获取的数据。若双方意见不一，重新找出原文讨论，必要时请第三方仲裁。

1.3 统计学处理 应用RevMan 5.3统计软件。对纳入文献进行异质性检验，若无异质性（I2＜50%或P＞0.05），则采用固定效应模型分析；若有异质性（I2＞50%或P＜0.05），则采用随机效应模型分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 文献特征及质量评价 28篇关于MMP-2与食管癌临床特征关系的病例对照研究[5-8，11-34]，包括1 870例食管癌组织、1 044例正常对照组织。文献特征及质量评价结果，见表1。

2.2 Meta分析结果

2.2.1 食管癌组织与正常对照组织MMP-2表达比较有27篇文献涉及食管癌组织与正常对照组织MMP-2表达，结果显示MMP-2在食管癌组织中的表达明显高于正常对照组织，差异有统计学意义（OR=10.90，95%CI：7.23～16.44，P＜0.05），见图 1。

2.2.2 MMP-2与临床特征的关系 涉及MMP-2与淋巴结转移、临床TNM分期、肿瘤浸润深度、分化程度、肿瘤直径的文献分别有28、13、14、12、7篇。结果显示有淋巴结转移的食管癌患者MMP-2表达明显高于无淋巴结转移者，差异有统计学意义（OR=4.38，95%CI：3.42～5.60，P＜0.05），见图 2；与 MMP-2 表达阴性患者比较，MMP-2表达阳性的食管癌患者临床TNM分期较晚，差异有统计学意义 （OR=2.59，95%CI：1.46～4.58，P＜0.05），见图3；在肿瘤浸润深度方面，MMP-2表达阳性者肿瘤易侵及外膜（OR=5.00，95%CI：3.66～6.83，P＜0.05），见图4；在肿瘤直径方面，MMP-2表达阳性的食管癌患者较MMP-2表达阴性患者大（OR=1.70，95%CI：1.16～2.49，P＜0.05），见图 5。关于 MMP-2 与肿瘤分化程度的关系，结果显示组间差异无统计学意义（OR=1.51，95%CI：0.77～2.97，P ＞0.05），见图 6；剔除曹婧、王晓旭的研究后，各研究结果间无统计学异质性（I2=25%，P=0.22），故采用固定效应模型分析，结果显示组间差异有统计学意义（OR=1.64，95%CI：1.15～2.33，P＜0.05），但该结果不可靠。

2.2.3 MMP-2与3年生存期的关系 有2篇文献涉及MMP-2与食管癌患者3年生存期的关系，结果显示MMP-2表达阳性的食管癌患者3年生存期短于MMP-2表达阴性患者，差异有统计学意义（HR=1.46，95%CI：1.16～1.84，P＜0.05），见图 7。

3 讨论

食管癌病死率较高，与早期诊治困难、局部转移及浸润的关系密切。因此，探讨食管癌的发病机制、寻找确诊早期食管癌的指标以及食管癌靶向治疗的新靶点是食管癌研究的热点。细胞外基质、基底膜是恶性肿瘤侵袭、转移的重要屏障，主要由Ⅳ型胶原纤维构成[4]。MMP是一类锌离子依赖的蛋白水解酶，在细胞外基质降解过程中不可缺少。正常状态下的机体组织MMP表达极少，但当人体处于多种生理或病理过程中则表达增多，如炎症、胚胎发生、血管形成、肿瘤发生与发展等[35]。MMP-2是MMP家族的重要一员，MMP-2酶原经水解后激活，降解细胞间基质成分及Ⅳ型胶原[4]。在肿瘤侵袭及转移过程中，肿瘤细胞与基底膜纤连蛋白、层粘连蛋白结合，分泌MMP-2或诱导细胞外基质中细胞分泌MMP-2，以降解基底膜及细胞外基质的有效成分，突破基底屏障，使肿瘤细胞向周围组织、淋巴管和小血管浸润，促进肿瘤的侵袭及转移。此外，MMP-2与血管内皮生长因子相互协同降解血管基底膜，促进新血管的形成，为肿瘤的生长提供营养[35-36]。因此，MMP-2被认为在多种恶性肿瘤的发展过程中发挥作用，是肿瘤细胞向周围侵袭的生化基础[35]。研究表明MMP-2表达是食管癌发生浸润及转移的相关因素，但其与食管癌组织病理特征的关系尚不统一。Ao等[6]研究表明MMP-2在食管癌组织中高表达，与淋巴结转移、肿瘤浸润深度、肿瘤直径、临床TNM分期密切相关，与性别、年龄、肿瘤分化程度无关。Guo等[31]研究表明MMP-2在食管癌组织中高表达，与淋巴结转移、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度相关，与性别、年龄、肿瘤直径无关。吴清泉等[12]研究表明不同食管鳞癌分化程度、浸润深度、临床TNM分期以及有无淋巴结转移的患者中，MMP-2表达阳性率差异均有统计学意义。缪文强等[9]研究认为MMP-2与食管癌分化程度、肿瘤直径、临床TNM分期、有无淋巴结转移等有关。本文Meta分析结果表明：（1）与正常对照组织相比，食管癌组织中MMP-2过表达，是食管癌发生的危险因素；（2）MMP-2与淋巴结转移、临床TNM分期、肿瘤浸润深度、肿瘤直径、3年生存期均相关，而与分化程度的关系尚不确定；（3）其中1篇文献的研究人群是印度患者，发现剔除该文献后的统计结果与未剔除的结果一致。

表1 文献特征及质量评价结果

图1 食管癌组织与正常对照组织MMP-2表达比较

图2 MMP-2与淋巴结转移的关系

图3 MMP-2与临床TNM分期的关系

图4 MMP-2与肿瘤浸润深度的关系

图5 MMP-2表达与肿瘤直径的关系

图6 MMP-2与分化程度的关系

图7 MMP-2与3年生存期的关系

综上所述，本项Meta分析表明食管癌组织中MMP-2表达明显高于正常食管组织，且与淋巴结转移、肿瘤浸润深度、临床TNM分期、肿瘤直径、3年生存期等有关，而与分化程度的关系尚不确定。提示MMP-2在食管癌的发生、发展过程中可能起着重要作用。本研究存在一定的局限性：（1）目前国内关于MMP-2表达的检测方法不一，研究结论可能存在一定的选择偏倚；（2）纳入文献的病例均为亚洲人群，可能会影响整个系统分析的抽样代表性，造成抽样偏倚和分布偏倚；（3）纳入文献为英文或中文，未纳入其他语种的文献，会产生发表偏倚和语言偏倚；（4）关于MMP-2与3年生存期关系的文献有2篇，总样本量较少，可能对结果的可靠性产生影响。