人参四逆颗粒对腹主动脉狭窄所致心力衰竭大鼠的治疗作用

2018-07-18刘新宇徐雅娟张春柳赵宏宇解生旭

中国老年学杂志 2018年13期

邸琳刘新宇徐雅娟张春柳赵宏宇王玉解生旭

(吉林省中医药科学院药效毒理评价中心，吉林长春 130012)

人参四逆汤(人参、附子、干姜、甘草)出自医圣张仲景《伤寒论》霍乱病篇，是为霍乱亡阳脱液之证，是历代医家推崇的回阳救逆的著名方剂。具有回阳救逆，益气生津之功效。适用于因吐利、大汗，出血，伤津所致之恶寒、脉微欲绝诸症。人参四逆颗粒是将传统经方人参四逆汤，按组分组方的研究原则和方法，研制成治疗慢性心力衰竭(心衰)的创新新药——人参四逆颗粒，本文探讨人参四逆颗粒对腹主动脉狭窄所致心衰大鼠的治疗作用。

1 材料与方法

1.1动物、饲料及药物 SD大鼠雄性，180～220 g，北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证编号为SCXK-(京)2006-0009。清洁级大小鼠维持料，购自北京科澳协力饲料有限公司，许可证编号：SCXK(京)2009-0012。人参四逆颗粒，棕黄色颗粒，3.66 g(生药)/g粉，由吉林省中医中药研究院化学所提供。生产批号：20100601。芪苈强心胶囊，批号100701，石家庄以岭药业股份有限公司生产。马来酸依那普利片，批号：10061706，扬子江药业集团生产。

1.2试剂盒和试剂超氧化物歧化酶(SOD，20110705)、丙二醛(MDA，20110706)、肌酸激酶(CK)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。心钠素(ANF)、醛固酮(ALD)、血管紧张素(Ang)Ⅱ酶免试剂盒为美国RD生物科学公司产品，上海源叶生物科技有限公司分装，批号20110802B。

1.3仪器 ST-360酶标仪上海科华实验系统有限公司产品，752紫外可见分光光度计，上海第三分析仪器厂产品。LBY-N6K全自动血流变快速测定仪，北京普利生仪器有限公司产品。

1.4造模〔1,2〕和分组给药方法选用SD雄性大鼠200只，留取20只大鼠做空白对照，其余大鼠按照腹主动脉狭窄法诱导心衰，手术前禁食不禁水16 h，按35 mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，将大鼠仰卧在固定台上，常规消毒，在左上腹部打开腹腔，暴露腹主动脉，在双侧肾动脉上方0.5 cm处将8号针头与腹主动脉共同结扎，然后拔出针头复制腹主动脉狭窄诱导心衰模型。空白对照组同样方法麻醉大鼠，打开腹腔分离腹主动脉，但不结扎。4 w后，将心衰模型大鼠随机分为模型组、阳性中药组、阳性西药组、人参四逆颗粒高剂量组、中剂量组、低剂量组。对照组、模型组给予10 ml/kg蒸馏水，阳性中药组给予芪苈强心胶囊0.65 g/kg,阳性西药组给予1 mg/kg马来酸依那普利片，人参四逆颗粒组分别给予17.2，8.6，4.3 g/kg人参四逆颗粒粉，每天给药1次，连续30 d。

1.5检查方法和检测指标按35 mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠，颈部腹侧偏右纵向切开皮肤，在胸锁乳突肌内侧分离右颈总动脉，用眼科剪子剪一小口插入已注入肝素生理盐水的左室导管，将充满肝素生理盐水的压力换能器连接Bl-420+生物功能实验系统，左手用镊子夹住颈总动脉，右手将导管插入左室腔，固定好导管，平稳一段后，记录15 min大鼠心率、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均血压(MBP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末期压(LVEDP)、左室最大上升和下降速率(+dp/dtmax、-dp/dtmax)测定值，然后打开腹腔，腹主动脉取血，测定全血黏度、血浆黏度，酶联免疫法测定醛固酮、ANF、AngⅡ，MDA、SOD等指标。摘取大鼠心脏做组织病理学检查。

1.6统计学方法采用SPSS15.0软件行方差分析。

2 结果

2.1各组血流动力学比较模型组心率明显低于空白对照组(P<0.05)，SBP明显高于空白对照组。人参四逆颗粒高、中、低剂量组和阳性中药组及阳性西药组心衰大鼠心率均无明显变化(P>0.05)。各给药组MBP、DBP，SBP与模型组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。模型组LVSP降低，阳性中药组、阳性西药组、人参四逆颗粒高、中剂量组与模型组比较，LVSP明显增加(P<0.05)。各给药组LVEDP无明显变化(P>0.05)。模型组-dp/dtmax较空白对照组明显降低(P<0.05)，人参四逆颗粒高、中剂量组、阳性西药组±dp/dtmax较模型组明显提高(P<0.05，P<0.01)。见表1。

表1 各组血流动力学比较

与模型组相比：1)P<0.05，2)P<0.01，3)P<0.001，下表同

2.2各组神经内分泌细胞因子比较模型组AngⅡ和ALD、ANF含量较空白对照组明显增加(P<0.05，P<0.001)。人参四逆颗粒中、低剂量组、阳性西药组AngⅡ含量较模型组均明显降低(P<0.05，P<0.01)。各给药组ALD和ANF含量较模型组均明显降低(P<0.05，P<0.01，P<0.001)。见表2。

表2 各组神经内分泌细胞因子比较

2.3各组自由基比较模型组血清中MDA水平较空白对照组显著升高(P<0.01)，SOD活性明显降低(P<0.05)。人参四逆颗粒高、中剂量组大鼠MDA含量较模型组明显降低(P<0.05)。阳性中药组、阳性西药组、人参四逆颗粒中、低剂量组SOD活性较模型组明显提高(P<0.05，P<0.01)。见表3。

2.4各组血液黏度比较模型组血液黏度和血浆黏度较空白对照组显著增加(P<0.01，P<0.001)，阳性中药组对全血黏度无明显影响(P>0.05)，但能明显降低血浆黏度(P<0.05)。阳性西药组、人参四逆颗粒高、中剂量组全血黏度和血浆黏度较模型组明显降低(P<0.05，P<0.01)，以人参四逆颗粒高剂量组效果最为显著。人参四逆颗粒低剂量组显著降低全血黏度低切 (P<0.05)。见表4。

表3 各组自由基比较

表4 各组血液黏度比较

2.5各组心脏指标比较模型组较空白对照组心肌明显增厚，心肌胶原变性面积明显增加(P<0.01)。各个给药组均能降低心肌厚度(P<0.05，P<0.01)，阳性中药组和人参四逆颗粒中剂量组降低心肌胶原变性面积(P<0.05)。见表5。

表5 各组心脏厚度和心肌变性胶原面积比较

3 讨论

慢性心力衰竭当属中医心悸、喘证、水肿、痰饮范畴。它的最根本中医病机为内虚，早期主要为心气心阳亏虚，可兼肺气亏虚，随病情发展及病机变化，心气心阳亏虚致运血无力，瘀血内停；中期脾阳受损，脾虚失运，复加肺气亏虚，水道失其通调，水湿内停；后期肾阳虚衰，膀胱气化不利，水饮泛滥。因此，慢性心力衰竭的病机可用“虚”“瘀”“水”三者概括〔3〕。

心功能减退，心排血量减少，心脏前后负荷增加，血流动力异常改变，不是慢性心衰的诱发原因，而是最后结果，慢性心力衰竭本质是心脏重塑，而神经内分泌的长期兴奋和激活是导致心脏重塑的根本原因。心衰时神经内分泌常过度激活，从而加剧心室重构和促进心衰恶化。ANF、Ang、ALD等神经内分泌因子的激活与慢性心力衰竭严重程度呈正相关〔4〕。本文提示，人参四逆颗粒治疗可以明显增加心肌收缩力，增加心输出量，降低心脏前后负荷，降低ANF、AngⅡ、ALD含量等而达到治疗慢性心力衰竭的作用。