C-erbB-2、p53、Ki-67与子宫内膜癌的相关性分析

陈文姗，韦 励，陈艳雅，吴雪薇

(广东省东莞市人民医院，广东 东莞 523000)

子宫内膜癌是现阶段临床上较为常见的妇科恶性肿瘤，其发病率长期占据妇科恶性肿瘤的前三位。流行病学研究显示，子宫内膜癌的发病率可达20.3/10万人，而且在围绝经期女性人群中，其发病率具有进一步上升的趋势[1-2]。

多种生物学因素均可以促进子宫内膜癌的发生，加剧癌细胞低分化或者异常增殖的风险。人表皮生长因子-2(correlation between human epidermal growth factor-2，C-erbB-2)、抑癌基因p53(p53)、细胞核相关抗原Ki-67等，能够影响子宫内膜腺体上皮细胞的核裂变、癌细胞凋亡的抑制，增加早期病变内膜腺体细胞对于子宫肌层的浸润等病理过程，促进子宫内膜癌的病情进展，特别是p53癌相关基因的表达异常，能够在促进信号相关通路信号的激活，增加癌细胞的转录等，影响肿瘤病灶的扩散[3]。为了进一步揭示C-erbB-2、p53、Ki-67与子宫内膜癌的相关性分析，本研究选取2013年3月至2017年3月广东省东莞市人民医院保存的子宫内膜癌组织标本80例，探讨了相关指标的异常表达，并揭示了其与患者临床病理特征的关系，报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2013年3月至2017年3月东莞市人民医院病理科保存的子宫内膜癌组织标本80例，其中患者年龄32～67岁，中位年龄51.20岁。纳入标准：①术前未进行化疗、放疗等抗癌治疗；②临床病理资料完整。排除标准：合并其他恶性肿瘤者。同时选取正常子宫内膜标本80例，其中年龄31～70岁，中位年龄52.10岁；不典型增生子宫内膜标本80例，年龄33～68岁，中位年龄51.50岁。标本的获取和实验方案已通过伦理学审核。

1.2实验方法

采用石蜡切片脱水，采用离子水进行反复洗涤，加入牛奶液体封闭抗体，封闭时间为5min，加入C-erbB-2、p53和Ki-67抗体(鼠来源，Abcum公司)， 37℃孵育2h，采用磷酸盐缓冲液洗涤3次，滴加荧光染色标记的二抗抗体(购自Abcum公司)，37℃孵育30min，加入磷酸盐缓冲液进行洗涤，采用南京凯基生物制剂公司生产的显色剂进行显色，封片，镜下观察。

1.3结果判断

p53定位于细胞核呈棕黄色颗粒，C-erbB-2定位于胞浆和细胞膜呈棕黄色，Ki-67定位于细胞核呈棕黄色。在高倍镜下任选10个视野，计数阳性细胞比例，将≤5%、<50%、50%～75%、≥75%归为“-”“+”“++”“+++”，将“-”和“+”定为阴性表达，将“++”和“+++”定为阳性表达。

1.4统计学方法

统计分析采用SPSS 19.0软件，计数资料比较使用χ2检验，相关性采用Spearman秩相关分析。以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2结果

2.1各组织C-erbB-2、p53和Ki-67阳性表达情况

各组织C-erbB-2、p53和Ki-67阳性表达比较差异均有统计学意义(均P<0.05)，见表1。其中子宫内膜癌组织C-erbB-2、p53和Ki-67阳性表达率明显高于正常组织和不典型增生组织(C-erbB-2：χ2值分别为51.23、17.07；p53：χ2值分别为44.06、16.78；Ki-67：χ2值分别为34.49、13.33，均P<0.05)；不典型增生组织C-erbB-2、p53和Ki-67阳性表达率明显高于正常组织(χ2值分别为12.17、16.78、5.70，均P<0.05)。

表1各组织C-erbB-2、p53和Ki-67阳性

表达情况[n(%)]

Table 1 Positive expressions of C-erbB-2, p53 and

Ki-67 in each tissue[n(%)]

注：a与正常组织比较P<0.05；b与不典型增生组织比较P<0.05。

2.2 C-erbB-2、p53和Ki-67表达与子宫内膜癌临床病理特征关系

C-erbB-2表达与患者组织分级、肌层浸润、临床病理分期和分化程度有关(均P<0.05)；p53表达与患者临床病理分期有关(P<0.05)；Ki-67表达与患者组织分级有关(P<0.05)，见表2。

表2 C-erbB-2、p53和Ki-67表达与子宫内膜癌临床病理特征关系[n(%)]

注：*与其他分级比较P<0.05。

2.3相关性分析

C-erbB-2表达与p53和Ki-67呈正相关(rs值分别为0.27、0.35，均P<0.05)，p53与Ki-67呈正相关(rs=0.55，P<0.05)，见表3。

表3相关性分析结果(r)

Table 3 Results of correlation analysis(r)

指标C-erbB-2p53Ki-67C-erbB-2-0.27*0.35*p530.27*-0.55*Ki-670.35*0.55*-

注：*表示P<0.05。

3讨论

3.1子宫内膜癌的流行病学背景研究

现阶段子宫内膜癌临床上总体治疗有效率不足25%，包括手术或者联合放化疗等综合性治疗措施的临床病情缓解率较低[4-5]。同时对于子宫内膜癌的早期发病过程缺乏有效的筛查指标，虽然CEA或者CA125等上皮肿瘤糖蛋白成分能够在一定程度上提高子宫内膜癌的诊断水平，但其筛查的灵敏度或者特异度等局限性仍然较为明显。而通过对子宫内膜癌发病过程中基因或者蛋白水平的表达差异性研究，能够为疾病的诊疗提供新的思路。

3.2细胞生物学因子在促进子宫内膜癌发生发展过程中的作用

子宫内膜癌的发病机制较为复杂，遗传因素、性激素水平的紊乱或者基因突变等，均可能增加癌细胞早期病变的风险。基因水平的异常近年来被认为是影响恶性肿瘤发生的核心因素，基因突变或者基因表达调控的异常，增加了癌细胞过度扩增的风险，导致癌细胞的正常分化或者促凋亡过程明显失常[6]。C-erbB-2是生长因子家族成员，其能够加剧子宫内膜腺体早期对子宫内膜肌层的浸润，加剧癌细胞的转移风险，同时C-erbB-2能够影响新生血管的形成，增加肿瘤病灶组织的血流灌注等，从而促进癌病灶组织的增殖[7-8]；p53作用肿瘤相关基因，其表达的异常影响了恶性肿瘤的细胞调控、凋亡抑制及癌细胞的生物学特征的改变过程[9]；Ki-67作为癌细胞核DNA增殖相关抗原，其能够提高癌细胞DNA的增殖速度，导致癌细胞的增殖失去调控[10-11]。回顾国内外已有的相关研究，已经证实的是C-erbB-2、p53、Ki-67等能够在子宫内膜癌等疾病发生过程中发挥显著作用[12-13]，但对于相关指标的表达与子宫内膜癌的临床病理特征的关系研究不足。

3.3 C-erbB-2、p53和Ki-67的异常表达及其与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系

本次研究发现，在子宫内膜癌病灶组织中C-erbB-2、p53和Ki-67等指标的表达均明显高于正常组织，差异具有统计学意义，提示不同的生物学指标可能均参与了子宫内膜癌的病情进展，不同指标的异常表达可能在下列几个方面影响肿瘤的发生：①C-erbB-2的高表达，提高了癌细胞的变形能力，导致癌细胞的侵袭风险明显增强。②p53和Ki-67的高表达，影响了癌细胞的程序性凋亡的速度，导致癌细胞G1/S期细胞比例明显增高，凋亡减少，癌细胞的扩增速度明显增加。林凤等[13]研究者探讨了35例样本量的子宫内膜腺癌患者的血清学分子谱改变过程，发现C-erbB-2或者KI-67的表达阳性率可平均上升35%以上，且患者的病程越长、器官累及程度越高，相关指标的高表达情况越为明显，在不典型增生的子宫内膜癌病灶组织中，C-erbB-2、p53和Ki-67等的表达阳性率可进一步上升，高于正常对照人群，差异具有统计学意义，相关指标对于癌细胞不典型增生的影响，主要考虑与其对于患者癌细胞分化诱导因子a的表达调控障碍有关。在组织分级较差、肌层浸润程度较深、临床病理分期较晚的患者中，C-erbB-2表达阳性率可进一步上升，这主要考虑与C-erbB-2对癌细胞多种生物学特征的影响有关，而p53表达与患者临床病理分期的相关性，主要考虑与p53蛋白对肿瘤相关信号通路NOTCH的激活促进了癌病灶症状的转移及临床组织器官的累及有关。子宫内膜癌患者的组织学分级越差，Ki-67的表达阳性率越高，提示了Ki-67可能影响癌细胞的细胞极性排列、组织分化差异性。最后，本次研究发现C-erbB-2、p53和Ki-67的表达具有内在的相关性，不同的指标可能在影响癌细胞的分化、凋亡、转移及迁移或者癌细胞DNA的增殖等方面具有一定的协同作用。

3.4总结

本次研究的创新性在于探讨了C-erbB-2、p53和Ki-67等指标与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系，并揭示其内在的相关关系。综上所述，子宫内膜癌组织C-erbB-2、p53和Ki-67表达明显升高，与患者临床病理特征有一定关系，值得进一步研究。

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