坪山区从业人员携带沙门菌的血清型分布及药敏试验分析*>*
2018-06-29张鲍虎杨书才
张鲍虎,张 莉,杨书才,周 杰,张 扬
(广东省深圳市坪山区人民医院检验科 518118)
沙门菌可引起人类伤寒、副伤寒、食物中毒和胃肠炎等多种疾病,其种类繁多,至今血清学分型已高达 2 500 多个[1]。由于抗菌药物的滥用,沙门菌逐渐呈现多重耐药现象,近年来发现的1株超级细菌DT104就是多重耐药沙门菌[2]。抗菌药物滥用致使沙门菌耐药菌株越来越多,对带菌者进行药敏试验监测,可指导带菌者规范用药治疗。为控制携带沙门菌的从业人员引起感染性疾病暴发传播,本研究拟通过流行病学调查深圳市坪山区食品及公共场所从业人员(简称从业人员)携带沙门菌情况,并对检出的沙门菌进行鉴定及药敏试验分析,为指导携带者规范药物治疗、常规抗菌药物监测和防止食源性疾病发生提供帮助,现报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 收集2015年7-11月在坪山区人民医院体检的食品及公共卫生从业人员肛拭子4 620份,采用培养法分离出沙门菌61株。
1.2仪器与试剂 VITEK 2 Compact 细菌鉴定仪(法国梅里埃);A2 生物安全柜(济南巴贝斯);恒温培养箱(上海浦东荣丰);沙门(SS)增菌液、血平板、木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)平板、克氏双糖铁生化管、动力-吲哚-尿素酶(MIU)生化管(广州迪景);沙门菌显色平板(郑州博赛);革兰阴性细菌(GN)鉴定卡、肠杆菌(ATB G-5)药敏条(法国梅里埃);沙门菌多价诊断血清(宁波天润)。标准菌株伤寒沙门菌(ATCC 50096)购自深圳优康生物技术有限公司;药敏质控菌株大肠埃希菌(ATCC 25922)来源于广东省疾病预防控制中心。
1.3方法
1.3.1采样方法 采样人员采用无菌棉拭子插入受检者肛门内 3~5 cm,略微转动2周后取出放入SS增菌液等待送检。
1.3.2培养方法 将采样后的SS增菌液管放入35 ℃培养箱增菌24 h,3区划线接种到XLD平板,放入35 ℃培养箱培养24 h,在XLD平板挑取可疑菌落接种到血平板、MIU管及克氏双糖铁培养管做初步生化鉴定及分离培养,经初步鉴定后将疑似沙门菌的标本进行革兰染色、显色平板培养。
1.3.3菌株鉴定 将显色平板生长为紫红色革兰阴性杆菌菌落采用GN鉴定卡经VITEK 2 Compact细菌鉴定仪进行确认;血清型按照宁波天润生物药业有限公司沙门菌诊断试剂盒说明书进行分型。
1.3.4药敏试验 采用ATB G-5肠杆菌药敏条,参照试剂说明书完成操作后,放35 ℃温箱培养24 h后判读结果。
2 结 果
2.1血清学分布 61株沙门菌血清型呈多样性分布,B群最多,共31株(50.82%),其中斯坦利沙门菌8株(13.11%),鼠伤寒沙门菌6株(9.84%),德比沙门菌7株(11.48%),阿哥纳沙门菌4株(6.56%),乙型副伤寒沙门菌1株(1.64%),沙门菌(未能鉴定型别)5株(8.20%); 其次是C1群12株(19.67%),其中汤卜逊沙门菌4株(6.56%),婴儿沙门菌2株(3.28%),波茨坦沙门菌1株(1.64%),沙门菌(未能鉴定型别)5株(8.20%);C2群7株(11.48%),其中纽波特沙门菌4株(6.56%),病牛沙门菌1株(1.64%),曼哈顿沙门菌1株(1.64%),沙门菌(未能鉴定型别)1株(1.64%);E1群7株(11.48%),其中伦敦沙门菌3株(4.92%),纽兰沙门菌1株(1.64%),沙门菌(未能鉴定型别)3株(4.92%);E4群4株(6.56%),其中夫登堡沙门菌4株(6.56%)。 61株沙门菌分属5个群,14个血清型,有14株(22.95%)未能鉴定型别,排名前3位的分别是斯坦利沙门菌(13.11%)、德比沙门菌(11.48%)、鼠伤寒沙门菌(9.84%)。
2.2药敏试验结果 见表1。61株沙门菌对14种抗菌药物呈不同程度耐药,对复方磺胺甲噁唑、哌拉西林、替卡西林、替卡西林/克拉维酸、阿莫西林耐药率较高,分别为27.9%、24.6%、24.6%、24.6%、23.0%,其余抗菌药物的耐药率较低,其中头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、美罗培南及亚胺培南表现为全部敏感。
表1 坪山区食品卫生从业人员沙门菌带菌者药敏试验结果[n(%),n=61]
3 讨 论
沙门菌广泛存在于人、动物和环境中,是人群中重要的肠道传染病原,可引起人类伤寒、食物中毒、胃肠炎及败血症[3]。全球每年约有1.6×107例沙门菌感染病例,其中有60万例死亡[4]。我国由沙门菌引起的食物中毒也已居首位[5-6]。对有关从业人员进行沙门菌检查,及时检出并治疗是预防沙门菌暴发传播的重要手段[7-9]。目前,坪山区从业人员数量庞大,本研究数据显示,坪山区4 620例从业人员中携带沙门菌人员为61例, 61株沙门菌血清型中B群血清型分布最多,共有31株(50.82%),这与马妮等[10]研究结果相符合。61株沙门菌分属5个群,14个血清型,排名前3的分别是斯坦利沙门菌、德比沙门菌及鼠伤寒沙门菌,由于试剂的局限性,有14株未能鉴定型别,也有可能是新型菌株,对于基因型分析研究可能会有价值。
61株沙门菌药敏试验分析结果显示,耐药率较高的前5名分别是复方磺胺甲噁唑、哌拉西林、替卡西林、替卡西林/克拉维酸及阿莫西林,而头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、美罗培南及亚胺培南表现为全部敏感,提示临床治疗应首选头孢类药物,这与何广概等[11]研究相似。根据坪山区从业人员沙门菌带菌者药敏试验结果可以看出,抗菌谱较窄的青霉素类药物耐药性较强,推测可能是因为此类药物价格低廉,容易购买,人群使用比较普遍,导致抗菌药物的滥用,从而引起细菌耐药性改变。近年来有研究报道显示,耐环丙沙星的沙门菌感染病例逐渐增多,然而目前临床上常根据经验采用第3代头孢类及喹诺酮类药物进行治疗[12-13]。本研究结果显示,有2例菌株耐环丙沙星,4例菌株中介。因此,细菌药敏试验检测结果能够正确指导临床用药,为避免抗菌药物滥用和预防耐药菌株发生提供理论依据。
沙门菌感染人群通常可以自愈,但是感染沙门菌后,有2%~5%的患者粪便排菌时间较长,可能会威胁他人的健康[14]。本研究发现1例乙型副伤寒沙门菌,属于乙类传染病。2013年本院接收了由携带甲型副伤寒沙门菌的流动食品商贩传播导致的十余例住院患者,在坪山区产生严重的不良影响。因此,对有关从业人员进行健康体检是卫生管理的一个重要环节,加强该环节的监测,及时发现沙门菌携带者并给予治疗,能有效避免携带沙门菌的从业人员传播感染性疾病。特别是市场上长期存在的一些流动食品商贩、夜宵摊点,此类非正规食品营业工作人员没有参加体检,有关部门应高度重视,让从业人员认识沙门菌的危害,并积极参加体检以取得从业资格证,从而预防沙门菌传播引起的感染性疾病。
[1]王岚,贾华云,张红,等.湖南省食源性沙门菌血清型分布及耐药性研究[J].实用预防医学,2011,18(6):994-997.
[2]李显志.食源性细菌耐药性:抗生素使用与风险分析[J].中国抗生素杂志,2009,34(1):114-121.
[3]谭南,汪伟山,林爱心,等.6 417例感染性腹泻患者沙门氏菌感染情况分析[J].国际检验医学杂志,2014,35(15):2049-2050.
[5]秦丽云,郭玉梅,吕国平,等.2011至2012年石家庄地区沙门菌食物中毒分离株分子流行病学特征[J].微生物学杂志,2014,34(1):84-87.
[6]陈玉贞,绍坤,关冰,等.2003-2010年山东省食源性沙门菌血清分型及药敏分析[J].中国食品卫生杂志,2012,24(1):9-13.
[7]田桢干,阎俊,陆晔,等.LAMP技术快速检测沙门氏菌方法的建立及其应用[J].中国国境卫生检疫杂志,2011,34(5):296-299.
[8]李欣,董雪,刘娜,等.从业人员预防性健康体检沙门志贺氏菌检验PCR方法快速筛查的应用[J].辽宁大学学报(自然科学版),2014,41(2):172-175.
[9]付汉维,熊建辉,吴凯,等.深圳市饮食及服务从业人员肠道沙门氏菌带菌调查[J].公共卫生与预防医学,2012,23(6):113-114.
[10]马妮,孙葳,郑洪,等.辽宁省食源性沙门菌血清分布及耐药分析[J].中国卫生检验杂志,2013,23(15):3144-3146.
[11]何广概,黄潮新,曹传敏,等.105株沙门菌的血清型分布及药敏试验结果分析[J].广东医学院学报,2016,34(2):192-194.
[12]MEDALLA F,SJÖLUND-KARLSSON M,SHIN S,et al.Ciprofloxacin-resistant Salmonella enterica Serotype Typhi,United States,1999-2008[J].Emerg Infect Dis,2011,17(6):1095-1098.
[13]CRUMP J A,KRETSINGER K,GAY K,et al.Clinical response and outcome of infection with Salmonella enterica serotype Typhi with decreased susceptibility to fluoroquinolones:a United States fo odnet multicenter retrospective cohort study[J].Antimicrob Agents Chemother,2008,52(4):1278-1284.
[14]陈建辉,黄梦颖,杨劲松,等.1993-2015年福州市服务行业人员沙门菌携带情况监测分析[J].中国卫生检验杂志,2016,26(14):2081-2084.