青稞酒中塑化剂测定方法研究及方法确认

2018-06-21马淑珍蔡林森常立娟王平平王慧丽秦文杰

酿酒科技 2018年6期

马淑珍，蔡林森，常立娟，王平平，王慧丽，秦文杰，王茹，李霞

（青海省产品质量监督检验所，青海西宁810001）

邻苯二甲酸酯类，又称增塑剂，俗称塑化剂，是一类可以增强其可塑性、提高产品强度的有机物。目前广泛应用于高分子材料的助剂[1-3]，邻苯二甲酸酯类也广泛应用在塑料制品中，可以通过空气、水、存储容器及包装材料等直接或间接的转移到食品中，从而污染食品[4-6]。国内外试验研究表明，塑化剂可以导致机体细胞存活率降低、肝脏功能下降，具有突变性和致癌性[7]。

青稞酒生产过程产生的塑化剂主要来源于乳胶管、塑料输酒管、酒桶以及塑料包装材料等塑料制品。由于邻苯二甲酸酯类物质能溶于乙醇，经过一段时间，青稞酒中的邻苯二甲酸酯类的含量会升高[8]。人们饮用后会在体内积累，对人体的健康造成持续性的危害[9]。塑料制品中常用的塑化剂是邻苯二甲酸二丁酯(DBP)，因此，建立一种前处理方法简单、操作方便、测量准确、精密度好的检测青稞酒中DBP的方法是非常重要的。

1 材料、仪器和试验方法

1.1 试剂

邻苯二甲酸二丁酯（DBP），浓度为100 μg/mL；正己烷（色谱纯）；青稞酒（青海青稞酒生产企业）。

1.2 仪器

7890A-7000C三重四极杆气相质谱联用仪（安捷伦科技有限公司）；超纯水机（GWA-UN4-20普析通用）；平行蒸发仪（BUCHI Synlore）。

1.3 试验方法

1.3.1 色谱和质谱条件

色谱柱：DB-5毛细管气相色谱柱（30m×0.25mm×0.25 μm）；进样口温度为260℃；程序升温：初始温度80℃，保持2 min，以20℃/min升温到230℃，保持5 min，再以5℃/min升温到270℃，保持10 min；载气为高纯氦气，流速为1 mL/min；进样量为1 μL，以不分流的方式进样。电离方式为电子轰击电离源（EI），电离能量70 eV，传输线温度为270℃，离子源温度为230℃，监测方式为选择性离子扫描（SIM），溶剂延迟6 min。

1.3.2 标准工作溶液的配制

取1 mL 100 μg/mL的DBP标准溶液用正己烷定容于10 mL容量瓶中，配得10 μg/mL的中间标准溶液。用正己烷稀释中间标准溶液，分别配制成0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL 的标准工作溶液。

1.3.3 样品前处理

方法一：正己烷直接提取。称取1.0 g青稞酒样品于25 mL具塞磨口离心管中，加入2～4 mL蒸馏水，漩涡混合均匀，再准确加入10 mL的正己烷，涡旋1 min，超声20 min，以1000 r/min离心10 min，取上清液，供GC-MS分析。

方法二：用平行蒸发除去乙醇后用正己烷提取。称取1.0 g青稞酒样品于平行蒸发仪试管中，在减压的条件下蒸发至近干以除去乙醇和其他易挥发性物质，再加5 mL正己烷溶解，超声10 min，转移到25 mL具塞磨口离心管，用正己烷定容至10 mL，涡旋1 min，超声20 min，以1000 r/min离心10 min，取上清液，供GC-MS分析。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线范围选择及检出限

根据样品的前处理方法和定量限的要求，本试验选择了 0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL 为线性范围，每个浓度点随机重复进样3次，取其平均值，绘制标准曲线。同时考察了浓度和标准偏差的关系，其比值为一常数，选取了直线回归方程。得到的线性方程为2.92×107-5.30×105，相关系数R2=0.996。以空白样品加标试验测定DBP信噪比为3:1的浓度为该方法的最低检出限，检出限为0.02 mg/kg。

2.2 标准曲线的校准验证

根据化学实验室的质量控制要求，需要对标准曲线的准确性进行验证。本试验通过采取不同批次、不同生产厂家、不同浓度的DBP标准溶液，分别配制成 0.05 μg/mL、0.2 μg/mL、0.5 μg/mL 的浓度，在相同的试验条件下测定3次，取其平均值，其偏差分别为2.0%、5.0%、2.0%，均小于10%，符合实验室质量控制的要求。其结果见表1。

表1 标准曲线的验证结果

2.3 样品中乙醇除去对试验结果的影响

考虑到青稞酒中含有大量的乙醇，而邻苯二甲酸二丁酯能溶于乙醇，导致提取率偏低；同时考虑青稞酒中含有大量的水分，可能对离子源的灯丝造成损害。本试验对比直接提取和除去乙醇后再提取对DBP结果的影响，其结果见表2。

从表2可知，添加不同水平浓度的DBP，用平行蒸发除去乙醇后DBP的回收率均高于直接提取的，可能是青稞酒中含有的乙醇和多种杂醇类、酯类和酸类物质对检测有干扰，所以本试验选择平行蒸发仪除去醇类和挥发的物质后再提取。

表2 直接提取和除去乙醇对DBP测定结果的影响

表3 加标回收率及精密度试验结果（n=6）

2.4 方法的准确度和精密度

在空白样品中分别加入0.1 μg/mL、0.2 μg/mL、1.0 μg/mL 3个水平浓度的标准溶液，按相同的试验条件处理，用平行蒸发仪除去乙醇后用正己烷提取，在相同的仪器条件下重复测定6次，计算回收率及精密度，其结果见表3。质控样品重复测定6次，计算平均值，其Z值比分为0.42，满足实验室质量控制要求。