膀胱癌组织前梯度蛋白2表达变化及其临床意义

李峰，冯宇鹏，连学雄，吴文正，肖成林，赵仕佳

(广州医科大学附属第二医院，广州 511447)

膀胱癌早期症状缺乏特异性，多数患者在确诊时已接近中晚期，从而延误了治疗最佳时间[1,2]。手术切除是目前膀胱癌首选的治疗手段，但50%～80%患者术后会发生转移[3]。随着生物医学技术的快速发展，分子肿瘤标志物用于临床早期辅助诊断恶性肿瘤成为研究热点。前梯度蛋白2(AGR2)是非洲爪蟾蛋白XAG2的人型同系物，广泛分布于人体组织。研究显示，AGR2在卵巢癌、结直肠癌等恶性肿瘤组织中高表达，并参与上述恶性肿瘤的发生、发展过程[4,5]。目前，AGR2与膀胱癌相关性的研究较少。本研究分析膀胱癌组织AGR2表达变化及其与患者临床病理参数及预后的关系，探讨AGR2在膀胱癌发生、发展中的作用。

1 临床资料

1.1 基本资料 选择2014年1月～2015年6月广州医科大学附属第二医院收治的膀胱癌患者76例，男50例、女26例，年龄53～79(62.7±5.5)岁；单发肿瘤36例，多发肿瘤40例；肿瘤直径1～5(2.2±0.7)cm；根据国际抗癌协会(UICC)TNM分期标准[6]：Ⅱ期41例，Ⅲ～Ⅳ期35例；组织分化程度：低分化33例，中高分化43例；有淋巴结转移27例，无淋巴结转移49例。纳入标准：①原发性肿瘤，且术后病理组织活检证实为膀胱癌；②术前未行放、化疗及免疫治疗；③有完整的临床病理资料。排除标准：①妊娠期以及哺乳期的妇女；②心脏功能不全；③肝、肾障碍；④合并其他急慢性炎症性疾病及自身免疫性疾病；⑤合并其他恶性肿瘤；⑥合并其他可能影响本研究结果的疾病。本研究获广州医科大学附属第二医院医学伦理委员会批准，患者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 膀胱癌组织AGR2表达及其与患者临床病理参数和预后的关系 本研究统计学处理采用SPSS22.0统计软件。计数资料比较采用χ2检验和Fisher确切概率法，中位生存时间比较采用Log-Rank检验。P<0.05为差异有统计学意义。

1.2.1 膀胱癌组织AGR2表达 取手术切除的膀胱癌组织及其癌旁正常组织(均经病理检查证实)，采用免疫组化SABC法检测AGR2表达。以AGR2阳性乳腺癌组织标本为阳性对照，磷酸缓冲液代替一抗为阴性对照。细胞质中出现黄色或者棕黄色颗粒为AGR2阳性细胞。从阳性细胞数量及着色强度两个方面综合评定结果[7]。阳性细胞数量：无阳性细胞计0分，有阳性细胞但比例<10%计1分，阳性细胞数量10%～<50%计2分，阳性细胞数量50%～80%计3分，阳性细胞数量>80%计4分；染色强度：无染色计0分，浅黄色计1分，黄色计2分，棕黄色计3分。 两项计分评分相乘结果0～3分为AGR2表达阴性，≥4分为AGR2表达阳性。结果显示，膀胱癌组织AGR2阳性表达者34例，阴性表达者42例。膀胱癌组织及其癌旁正常组织AGR2阳性表达率分别为44.74%(34/76)、13.15%(10/76)，二者比较P<0.05。

1.2.2 膀胱癌组织AGR2表达与患者临床病理参数的关系 肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ和Ⅳ期、组织分化程低度、有淋巴结转移者的膀胱癌组织AGR2阳性表达率分别高于肿瘤直径<2 cm、TNM分期Ⅱ期、组织分化程度中高分化、无淋巴结转移者(P均<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤数量的膀胱癌患者肿瘤组织AGR2阳性表达率比较差异无统计学意义(P均>0.05)。见表1。

1.2.3 膀胱癌组织AGR2表达与患者术后复发的关系 膀胱癌患者AGR2表达者术后1、2、3年分别有5、15、19例复发，术后1、2、3年复发率分别为14.71%、44.12%、55.88%；AGR2阴性表达者术后1、2、3年分别有3、7、11例复发，术后1、2、3年复发率分别为7.14%、19.05%、26.19%。AGR2阳性者术后2、3年复发率高于AGR2阴性表达者，P均<0.05；AGR2阳性表达和阴性表达者术后1年复发率比较，P>0.05。

1.2.4 膀胱癌组织AGR2表达与患者术后中位生存时间的关系 AGR2阳性与阴性表达者中位生存时间分别为30.00个月(95%CI为27.78～32.22个月)、34.00个月(95%CI为32.06～35.94个月)，二者比较P<0.05。

表1 膀胱癌组织AGR2表达与患者临床病理参数的关系

2 讨论

AGR2是位于人第7号染色体上片段长度为763 bp的基因编码蛋白质二硫键异构酶家族成员，与外胚层发育、早期阶段前后位的分化等密切相关[8]。研究证实，AGR2可抑制p53磷酸化及其活性，使其失去调控细胞周期的能力，最终导致细胞癌变[9]；AGR2在肺癌、乳腺癌、前列腺癌等肿瘤组织中表达上调[10～12]；特异性敲除肺癌细胞中AGR2基因可减少肺癌细胞转移[13]；研究表明，乳腺癌组织中AGR2水平明显升高，并与乳腺癌临床病理特征有关，是预测患者预后的重要指标[4]；鼻咽癌病灶组织细胞中AGR2表达上调，抑制AGR2表达可减弱癌细胞的侵袭能力以及迁移能力[14]。本研究结果显示，膀胱癌组织AGR2阳性表达率明显高于正常膀胱组织，提示AGR2可能参与膀胱癌的发病过程。研究显示，CD10在膀胱癌患者中表达上调参与了病情的发生、发展，CD10与AGR2密切相关，AGR2异常表达可能通过影响CD10表达而使细胞异常增殖，细胞无法正常凋亡而发生恶性改变[15]。Zhang等[16]研究显示，胃癌TNM分期越晚、肿瘤越大、侵袭深度越深，则AGR2阳性表达率越高。刘丽娜等[7]报道，直肠癌组织中AGR2阳性表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移等密切相关。上述研究结果提示，AGR2与恶性肿瘤发生、发展过程密切相关，是评价病情进展的重要指标。本研究结果显示，肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ和Ⅳ期、组织分化程度低、有淋巴结转移的膀胱癌组织中AGR2阳性表达率相对较高，提示AGR2与膀胱癌临床病理特征有关，进一步提示AGR2可能参与了膀胱癌的发生、发展过程。本研究结果显示，AGR2阳性膀胱癌患者术后2、3年复发率高于AGR2阴性患者，而AGR2阳性、阴性膀胱癌患者术后1年复发率无明显统计学差异；生存分析显示，AGR2阳性患者中位生存时间短于AGR2阴性者。提示AGR2与膀胱癌患者预后密切相关，AGR2阳性表达率越高，患者预后越差、复发率越高、生存时间越短。早期检测膀胱癌组织中AGR2表达有助于判断患者预后。

综上所述，AGR2高表达可促进膀胱癌的发生、发展。检测膀胱癌组织AGR2表达有助于判断患者病情及预后。

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