血清PCSK9水平在2型糖尿病视网膜病变中的变化及意义

赵 瑜 张奕霞 丁健峰

（石河子大学医学院第一附属医院，新疆 石河子 832008）

糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）是糖尿病最为常见和严重的微血管并发症之一。国内外研究表明，血脂异常与DR发生发展有一定关系[1-2]，前蛋白转化酶枯草杆菌素9（Proprotein convertase subtilisin kexin type 9，PCSK9）通过结合于低密度脂蛋白受体（low density lipoprotein receptor，LDLR）的表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）样结构域，诱导LDLR进入溶酶体内降解，细胞表面LDLR数量的减少将导致血浆低密度脂蛋白胆固醇（lowdensitylipoproteincholesterol，LDL-C）的水平升高[3-4]。本文通过研究血清PCSK9水平在糖尿病视网膜病变中的变化，探讨PCSK9是否参与糖尿病视网膜病变的发生发展，为更好的控制DR患者异常血脂水平、延缓DR进展寻找一个新的治疗方向。

1 资料与方法

1.1 一般资料：将2015年12月至2016年8月在我院住院的120例T2DM患者纳入研究， T2DM诊断标准参考中国2型糖尿病防治指南（2010版），所有患者经常规眼科检查及眼底荧光血管造影（FFA）检查确定DR分期，DR诊断标准按1984年全国眼底病协作组制定的标准，糖尿病正常眼底（NDR）组、非增殖型糖尿病视网膜病变（NPDR）组、增殖型糖尿病视网膜病变（PDR）组各40例，NDR组年龄（64.32±10.06）岁；NPDR组年龄（65.05±8.89）岁，PDR组年龄（65.13±9.93）岁，DR各组间患者性别、年龄无统计学意义（P＞0.05）。同时选取健康体检者40例为正常对照（NC）组。男女各20名组成正常对照组。每名均进行正规体检和实验室检查，排除糖尿病、高血压、高血脂或肝肾疾病、超重或肥胖、精神病、代谢病等全身疾病。

1.2 方法：受试对象均过夜禁食12 h以上后于清晨抽取空腹静脉血，2 mL用于生化检测，2 mL用于HbA1c检测，2 mL用于离心（3000 r/min）15 min，分离血清并分装保存于-80 ℃冰箱。测定受试者身高、体质量，采用全自动生化分析仪测定常规生化指标。ELASA检测血清PCSK9水平，PCSK9单克隆抗体由西唐公司提供，根据标准曲线计算PCSK9水平。

1.3 统计学分析：采用SPSS20.0进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验，计数资料间比较采用χ2检验。P≤0.05表示差异有统计学意义。PCSK9与其他指标的相关分析采用非参数Spear-man等级相关法。

2 结 果

2.1 组间指标比较：四组患者性别、年龄分布及HDL-C水平差异无统计学意义（P＞0.05），但DR患者TG、TCH等指标均显著高于NC组（P＜0.05）。进一步两两比较显示，NPDR组和PDR组患者HbA1c、FPG和PCSK9水平均显著高于NDR组（P＜0.05）。见表1。

2.2 血清PCSK9水平与其他变量的相关性分析：PCSK9水平与TG、TCH、LDL-C、FPG、HbA1c的相关系数为0.173、0.259 、0.222、0.426、0.414，成正相关关系，与HDL的相关系数为-0.213，成负相关关系。

3 讨 论

PCSK9又称为神经细胞凋亡调节转化酶-1（neural apoptosis-regulated con-vertase 1，NARC-1）[5]，是一种主要由肝脏合成的分泌型丝氨酸蛋白酶，属于前蛋白转化酶家族，其与胆固醇代谢直接相关，主要在人肝脏细胞、小肠和肾表达。现已有国外研究表明，通过抑制PCSK9可阻断对LDL受体的降解，降低血液循环中的LDL-C[6]。本研究发现PCSK9水平在NDR组、NPDR组、PDR组均高于NC组，差异有统计学意义，组间比较显示NPDR组和PDR组PCSK9水平均高于NDR组。而TG、TCH、LDL-C在NDR组、NPDR组、PDR组间差异无统计学意义，但DR各期TG、TCH、LDL-C水平均高于NC组；HDL指标在本研究中未发现明显的统计学差异，可能与样本量及研究对象标准不一致有关。上述结果提示PCSK9可能参与了DR的发生发展，但其参与的机制有待于进一步研究。综上所述，PCSK9可能参与了DR的发生发展过程，通过调节该指标水平可能有助于延缓或避免DR的发生，从而为临床治疗方案的制定提供了新的思路和方向。

表1 各组一般资料及实验室指标的比较（±s）

表1 各组一般资料及实验室指标的比较（±s）

注：FPG：空腹血糖；HbA1c：糖化血红蛋白；TG：三酰甘油；TC：总胆固醇；LDL-C：低密度脂蛋白；aP＜0.05 vs NC组；bP＜0.05 vs NDR组

组别 LDL-C(mmol/L) TCH(mmol/L) HbA1c(%) TG(mmol/L) FPG(mmol/L) PCSK9(ng/mL)NC组 2.40±0.51 3.69±0.62 5.39±0.82 1.14±0.38 4.85±0.49 262.70±83.53 NDR组 2.78±0.74a 4.46±0.88a 7.59±1.66a 1.59±0.88a 7.25±1.82a 418.32±77.50a NPDR组 2.87±0.76a 4.50±0.88a 9.82±2.11a,b 1.84±0.92a 8.69±2.74a,b 483.80±81.72a,b PDR组 2.93±0.99a 4.83±1.19a 10.03±1.86a,b 1.88±0.83a 8.82±3.71a,b 486.72±80.42a,b

[1] Sun CY,Lee CC,Hsieh MF,et a1.Clinical association of circulating VEGF-B levels with hyperlipidemia and target organ damage in type 2 diabetic patients[J].J Biol Regul Homeost Agents,2014,28(2):225-236.

[2] 徐芳,赵淼焱,刘菊.糖尿病视网膜病变患者脉络膜厚度和血流动力学参数的变化及其影响因素[J].国际眼科杂志,2016,16(6):1052-1055

[3] Mayne J,Ooi TC,Raymond A,et al.Differential effects of PCSK9 Loss of function variants on serum lipid and PCSK9 levels in Caucasian and African Canadian populations[J].Lipids Health Dis,2013,12(1):70.

[4] Tran-Dinh A,Levoye A,Lambert G,et al.Low levels of low-density lipoprotein-C associated with proprotein convertase subtilisin kexin 9 inhibition do not increase the risk of hemorrhagic transformation[J].Stroke,2014,45(10):3086-3088.

[5] Rousselet E,Marcinkiewicz J,Kriz J,e tal.PCSK9 reduces the protein levels of the LDL receptor in mouse brain during development and after ischemic stroke[J].J Lipid Res,2011,52(7):1383-1391.

[6] Constantinides A,Kappelle PJ,Lambert G,et al.Plasma lipoproteinassociated phospholipase A2 is inversely correlated with proprotein convertase subtilisin-kexin type 9[J].Arch Med Res,2012,43(1):11-14.