不同干燥方法对甜藤茎中成分含量的影响

苑静，王绍云

(凯里学院，贵州 凯里 556011)

甜藤为茜草科鸡矢藤属多年生蔓性草质藤本植物[Paederiascandens(Lour.)Meer.]，又称鸡矢藤、牛皮冻、臭藤、五香藤、母狗藤等，其广泛分布于东亚、南亚、东南亚地区，在我国主要分布于长江流域及其南部地区[1]。甜藤揉烂时稍有鸡屎味，但做成食品后，却是清香四溢，鲜美可口。贵州野生甜藤资源丰富，贵州黔东南侗族人民用它作为食品的增甜剂和膨松剂，制成传统的特色美食甜藤粑和侗果，将野生甜藤茎捣烂，放入水中浸泡过滤，用其滤液为原料加工制作而成。甜藤粑和侗果一般在清明时节制作，口感香甜柔软，开胃润肠，食而不腻，久置不硬，保质时间较长[2]。

近年来，对甜藤植物的研究主要集中在其化学成分和临床应用等方面，研究发现甜藤中富含总氨基酸、总糖类化合物及多种生物活性物质，具有预防心血管疾病、调节免疫、抗衰老等功效，其独特的保健价值也逐渐得到人们的认可[3]。经查阅文献发现，研究不同的制备方法对甜藤茎中含量的影响比较少，本文采用紫外可见分光光度法检测阴干、晒干、烘干的甜藤茎中有益成分含量，研究不同的干燥方法对甜藤茎中有益成分含量的影响，为甜藤的加工保存提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

将贵州省黔东南州凯里市下司镇采摘的甜藤茎，挑选出无虫蛀、无斑点的部位清洗，将分别用阴干、晒干、烘干方法干燥后的甜藤茎用粉碎机分别制成粉末，待用。

1.2 仪器

WK-1000A小型高速粉碎机 青州市精诚医药装备制造有限公司；AR-2140型电子分析天平 奥豪斯国际贸易公司；SHZ-D Ⅲ型循环水式真空泵、KQ-B型干燥器 巩义市英峪予华仪器有限责任公司；TD5M型低速离心机 长沙湘智离心机仪器有限公司；UV-2550型紫外-可见分光光谱仪 日本岛津公司。

1.3 试剂

60% C2H5OH水溶液、5% NaNO2溶液、10% Al(NO3)3溶液、4% NaOH溶液、磷酸盐缓冲溶液、2%茚三酮溶液、100 μg/mL芦丁标准溶液(取芦丁标准品0.0025 g 置于25 mL的容量瓶中，用60% C2H5OH溶解，定容至刻度)、50 μg/mL谷氨酸标准溶液(精密称取0.0050 g谷氨酸标准品，用10 mL 0.02 mol/L的NaOH溶解，定容至100 mL)、8% HCl溶液、0.1 mg/mL维生素C标准溶液(取谷氨酸标准品0.0050 g 于50 mL烧杯中，加8% HCl溶液搅拌至溶解，转移至50 mL容量瓶中，用8% HCl溶液定容)。

1.4 方法

1.4.1 黄酮的提取及含量测定

准确称取阴干、晒干、烘干(60 ℃)的甜藤粉样品于3个锥形瓶中，按物料比1∶30加入提取剂(60% C2H5OH)，浸泡50 min，水浴温度45 ℃，超声提取40 min，离心沉淀(4000 r/s，10 min)后，真空抽滤，分别取滤液于50 mL容量瓶中，用60% C2H5OH定容至刻度制得甜藤茎提取液备用，测黄酮含量[4]。

取芦丁标准溶液2 mL于10 mL的容量瓶中，加入0.30 mL 5% NaNO2溶液，摇匀，静置6 min后加入0.30 mL 10% Al(NO3)3溶液，摇匀，静置；6 min后再加入4.00 mL 4% NaOH溶液，混合均匀，用60% C2H5OH溶液定容，摇匀，静置12 min后，以蒸馏水为参比，在紫外可见分光光度计上扫描，在506 nm处有最大吸收峰[5,6]。

取芦丁标准溶液0，2.00，2.50，3.00，3.50，4.00 mL分别置于10 mL的容量瓶中，按照测最大吸收峰的方法配制溶液，在波长506 nm处测定其吸光度值。以芦丁标准溶液的浓度为横坐标、吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

移取甜藤茎黄酮提取液各2 mL分别置于编号为阴-1、阴-2、阴-3、晒-1、晒-2、晒-3、烘-1、烘-2、烘-3，容积为10 mL的9个容量瓶中，按照测最大吸收峰的方法配制溶液，在波长506 nm处测定样品吸光度值，计算黄酮含量。

黄酮含量=C×V2×V总×10-6V1×m样×100%。

式中：C为所测得的样品浓度(μg/mL)；V1为所取样品滤液体积(mL)；V2为稀释后样品的体积(mL)；V总为样品液的总体积(mL)；m样为所称取的样品质量(g)。

1.4.2 维生素C的提取及含量测定

精密称取烘干、阴干、晒干的甜藤粉末1.041，1.0005，2.0018 g分别置于250 mL锥形瓶中(按料液比1∶20)用水浸泡0.5 h，于65 ℃水浴中超声40 min，离心沉淀10 min，真空抽滤收集滤液分别转移到25 mL容量瓶中，加入1 mL 8% HCl，再用蒸馏水定容至刻度，制得甜藤茎提取液，摇匀备用，测维生素C含量。

移取维生素C标准溶液1.50 mL，8% HCl溶液1.00 mL，稀释定容至25.00 mL棕色容量瓶中。用蒸馏水作参比溶液，在200～400 nm波长范围内用紫外可见分光光谱仪扫描，确定最大吸收波长为243 nm。

准确移取维生素C标准溶液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 mL于5个25.00 mL棕色容量瓶中，用蒸馏水定容，得5个浓度的维生素C标准溶液。以蒸馏水作参比，在243 nm处测定吸光度值，得维生素C标准曲线[7,8]。

移取甜藤茎维生素C提取液0.20 mL于3个25.00 mL棕色容量瓶中，加入1 mL 8% HCl，用蒸馏水定容至刻度，用紫外可见分光光度计平行测定3次，通过维生素C标准曲线查得样品维生素C浓度，计算其含量(同1.4.1黄酮含量计算方法)。

1.4.3 氨基酸的提取及含量测定

准确称取事先干燥粉碎好的甜藤样品各1.0000 g，并编号为“阴干、晒干、烘干”。按物料比1∶20加入提取剂(水)，浸泡35 min，超声提取40 min，水浴温度45 ℃，离心沉淀(4000 r/s，10 min)后真空抽滤，取滤液于编号为“阴干、晒干、烘干”的50 mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度制得甜藤茎提取液，备用，测氨基酸含量。

精密移取谷氨酸标准溶液和氨基酸样品液各5 mL于25 mL的容量瓶中，分别加1.0 mL 2%的茚三酮溶液、3.0 mL磷酸盐缓冲溶液，置于沸水浴中加热15 min，取出流水冷却，用蒸馏水定容到刻度线，以试剂空白作参比，用紫外可见分光光度计在波长范围为400～600 nm下进行扫描，在566 nm处有最大吸收峰。

分别精密移取50 μg/mL的谷氨酸标准溶液0，2，4，6，8，10 mL于6个25 mL的容量瓶中，按照测最大吸收峰的方法配制溶液，测吸光度。以谷氨酸标准溶液的浓度为横坐标、吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

分别精密移取甜藤茎提取液各0.2 mL置于9个编号为阴-1、阴-2、阴-3、晒-1、晒-2、晒-3、烘-1、烘-2、烘-3，容积为25 mL的容量瓶中，按照测最大吸收峰的方法配制溶液，测吸光度，计算其含量(同1.4.1黄酮含量计算方法)。

2 结果与分析

2.1 黄酮、氨基酸和维生素C标准曲线

黄酮含量在浓度为20.0～50.0 μg/mL时具有良好的线性关系(见图1)，所得线性方程为：y=0.01116x+0.01233，R2=0.99985；维生素C在2.000～12.000 μg/mL的浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系(见图2)，所得线性回归方程为：y=0.0503x+0.0208，相关系数R2=0.9997；氨基酸在5.000～20.000 μg/mL的浓度范围内吸光度和浓度具有良好的线性关系(见图3)，所得线性方程为：y=0.03032x-0.01173，R2=0.99960。

图1 黄酮标准曲线Fig.1 Standard curve of flavonoid

图2 维生素C标准曲线Fig.2 Standard curve of vitamin C

图3 氨基酸标准曲线Fig.3 Standard curve of amino acid

2.2 黄酮、氨基酸和维生素C含量

表1 甜藤茎提取液中黄酮含量Table 1 The content of flavonoids in Paederia scandens(Lour.)Meer. stem

由表1可知，对于3种干燥方法制备的甜藤茎提取液中，用阴干方法制备的原料，黄酮平均含量(0.914%)最高，其次是烘干和晒干的原料，二者相差不大。3种干燥方法中阴干处理原料的温度相对最低，烘干和晒干温度相对较高，说明温度对原料中黄酮含量的影响较大，最有利的保存方法是阴干。

表2 甜藤茎提取液中维生素C含量Table 2 The content of vitamin C in Paederia scandens(Lour.)Meer. stem

由表2可知，对于3种干燥方法制备的甜藤茎提取液中，用阴干方法制备的原料，维生素C平均含量(1.432%)最高，其次是烘干(1.341%)，晒干的原料维生素C含量(0.5314%)损失最大，高低含量相差2.69倍，晒干不利于维生素C的保存，说明3种处理原料的方法中阴干有利于有益成分的保存。

表3 甜藤茎提取液中氨基酸含量Table 3 The content of amino acid in Paederia scandens(Lour.)Meer. stem

由表3可知，对于3种干燥方法制备的甜藤茎提取液中，用阴干方法制备的原料，氨基酸平均含量(10.131%)最高，其次是晒干(9.574%)，烘干原料中氨基酸含量(9.161%)损失最大，高低含量相差近1%，烘干不利于氨基酸的保存，说明3种处理原料的方法中有利于有益成分的保存顺序为阴干、晒干、烘干，最好的原料处理方法是阴干。

从以上3种成分含量的测试数据中发现，用阴干方法制备的原料有利于黄酮、维生素C和氨基酸有益成分的保存。

2.3 甜藤茎提取液中黄酮、氨基酸和维生素C含量的精密度试验

移取甜藤茎提取液各2 mL分别置于编号为阴-1、阴-2、阴-3、阴-4、阴-5、晒-1、晒-2、晒-3、晒-4、晒-5、烘-1、烘-2、烘-3、烘-4、烘-5，容积为10 mL的15个容量瓶中，按照1.4中方法配制溶液，测定其吸光度，做精密度试验，数据见表4～表6。

表4 甜藤茎提取液中黄酮含量精密度试验Table 4 The precision test of flavonoids in Paederia scandens(Lour.)Meer. stem

由表4可知，相对标准偏差RSD数据均小于2.00%，测试方法的精密度较高。

表5 甜藤茎提取液中维生素C含量精密度试验Table 5 The precision test of vitamin C in Paederia scandens(Lour.)Meer. stem

由表5可知，相对标准偏差RSD数据均小于2.00%，测试方法的精密度较高。

表6 甜藤茎提取液中氨基酸含量精密度试验Table 6 The precision test of amino acid in Paederia scandens(Lour.)Meer. stem

由表6可知，相对标准偏差RSD数据均小于2.00%，测试方法的精密度较高。

2.4 甜藤茎提取液中黄酮、氨基酸和维生素C含量的加标回收试验

2.4.1 黄酮含量的加标回收试验

移取甜藤茎提取液各2 mL分别置于编号为阴-1、阴-2、阴-3、阴-4、阴-5、晒-1、晒-2、晒-3、晒-4、晒-5、烘-1、烘-2、烘-3、烘-4、烘-5，容积为10 mL的15个容量瓶中，分别加入0.1 mL芦丁标准溶液，按照1.4中方法配制溶液测定其吸光度，做黄酮含量的加标回收试验，见表7。

表7 甜藤茎提取液中黄酮含量的加标回收试验Table 7 The content adding standard recovery test of flavonoids in Paederia scandens(Lour.)Meer. stem

由表7可知，阴干、晒干、烘干甜藤提取液中黄酮回收率分别为98.552%，100.012%，99.738%(n=5)，RSD分别为1.48%，1.30%，0.84%(n=5)，准确度满足测定要求。

2.4.2 维生素C含量的加标回收试验

在供试品溶液中加入维生素C标准品，按照1.4中方法配制溶液，测定其吸光度，做维生素C含量的加标回收试验，见表8。

表8 甜藤茎提取液中维生素C含量的加标回收试验Table 8 The content adding standard recovery test of vitamin C in Paederia scandens(Lour.)Meer. stem

由表8可知，阴干、晒干、烘干甜藤提取液中维生素C回收率分别为100.59%，100.72%，100.77%(n=5)，RSD分别为0.81%，0.60%，1.01%(n=5)，准确度满足测定要求。

2.4.3 氨基酸含量的加标回收试验

在供试品溶液中加入氨基酸标准品量为5 μg，按照1.4中方法配制溶液，测定其吸光度，做氨基酸含量的加标回收试验，见表9。

表9 甜藤茎提取液中氨基酸含量的加标回收试验Table 9 The content adding standard recovery test of amino acid in Paederia scandens(Lour.)Meer. stem

续 表

由表9可知，阴干、晒干、烘干甜藤提取液中氨基酸回收率分别为100.724%，100.030%，99.794%(n=5)，RSD分别为0.99%，1.16%，1.10%(n=5)，准确度满足测定要求。

3 结论

研究结果显示：干燥方法不同，甜藤提取液中各成分含量不同。阴干、烘干和晒干甜藤茎中的黄酮含量分别是0.914%，0.752%，0.716%；氨基酸含量分别是10.131%，9.161%，9.574%；维生素C含量分别是1.432%，1.341%，0.5314%。从以上3种成分含量的测试数据中发现，用阴干方法制备的原料有利于黄酮、维生素C和氨基酸有益成分的保存。

根据精密度和加标试验验证，采用紫外可见分光光度法研究阴干、晒干和烘干3种不同的干燥方法对甜藤茎中3种成分含量的影响，结果准确可靠，为甜藤的加工保存提供了一定的理论依据。

参考文献：

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[6]李清林，陶锋.浙江省不同产地金钱草总黄酮含量的测定[J].中国中医药科技，2017，24(1):49-50.

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