酸枣仁复方胶囊总皂苷提取工艺优化的研究

罗其昌 阙俊杰 李文治 林恋竹*

[1 无限极（中国）有限公司，广东 广州 510665；2 华南理工大学轻工与食品学院，广东 广州 510640]

酸枣仁复方胶囊以酸枣仁、远志等药材为主要原料，按比例制成复方，具有安神、改善睡眠作用。其中药材酸枣仁具有补肝、宁心、敛汗、生津的功效，主要含有皂苷、黄酮、脂肪油、蛋白质和挥发油等成分，皂苷类化合物是酸枣仁的主要药效成分[1]。远志的功能为安神益智、祛痰、消肿，临床应用范围较广，疗效确切，主要成分为皂苷类、生物碱、糖类、脂肪油，远志皂苷是远志最主要的活性成分[2]。但未有针对酸枣仁复方胶囊复方进行皂苷优化提取工艺研究。因此，本文将在前人研究的基础上，采用响应面法优化提取复方中皂苷。

1 实验材料与试剂

酸枣仁（产自河北，批号：160201）、远志（产自河北，批号：160201）药材：由无限极公司提供，50℃烘干，粉碎，过40目筛；人参皂苷Re（批号：110754-201524），购于Sigma公司；其它化学试剂购于广州化学试剂厂，均为分析纯。

2 仪器与设备

SHZ-D（Ⅲ） 真空泵（巩义市予华仪器有限公司）；DFY-500万能粉碎机（温岭市林大机械有限公司）；AL204电子天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；CR22N高速冷冻离心机（日立公司）；CU600电热恒温水箱（上海福玛实验有限公司）；101-3电热鼓风恒温干燥箱（上海浦东兴荣科学仪器有限公司）；SHZ-82水浴恒温振荡器（金坛市恒丰仪器厂）；752 N紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。

3 实验方法

3.1 复方总皂苷提取 按比例分别称取酸枣仁、远志等，按料液比1∶10（m/v）加入不同浓度乙醇溶液，在不同温度下提取不同时间，2000 g离心10 min，抽滤，取上清液，定容至100 mL，待测。

3.2 紫外分光光度法测定总皂苷含量 采用香草醛-高氯酸法[3]测定，以人参皂苷Re为标准品绘制曲线。

3.3 数学模型的建立 采用响应面分析设计实验方案，建立数学模型，得出最优工艺参数。

4 实验结果与讨论

4.1 响应面分析实验方案及结果 根据Central Composite实验设计原理，选取乙醇浓度、提取温度和提取时间3个因素，采用响应面分析法优化提取工艺，具体实验方案及结果见表1。由响应面软件Design Expert 7.0.0得到的分析结果见表2和表3。

表1 响应面分析实验方案及结果

总得率=23.975+10.1125×A+6.7125×B+2.075×C+1.375×AB+0.2×AC-0.8×BC+0.175×A2+2.575×B2+1.3×C2（1）

总 皂 苷 提 取 率 =2.035+0.295×A+0.02125×B+0.08625×C+0.0125×AB-0.0325×AC-0.19×BC-0.815A2+0.0375B2+0.4375C2（2）

通过方差分析（见表2、表3） 可知，方程（1）（2）达到显著水平。同时，检验结果表明，方程（1）（2） 对实验拟合度好，可用方程（1） 对不同提取条件下复方总固形物得率进行预测，此外，可用方程（2）对不同提取条件下复方中总皂苷提取率进行预测。模型预测值和实际值比较接近。同时，根据F值，可以得出诸因素对复方总固形物得率影响的大小顺序为：乙醇浓度＞提取时间＞提取温度。此外，根据F值，可以得出诸因素对复方中总皂苷提取率影响的大小顺序为：乙醇浓度＞提取温度＞提取时间。综上所述，乙醇浓度对复方总固形物得率及皂苷提取率的影响最显著。

表2 回归方程(1)的方差分析表

表3 回归方程(2)的方差分析表

由表2、表3可知，A，B，C，AB，B2，C2对复方总固形物得率有显著影响，而其他因素的影响较小；A，BC，A2，C2对复方中总皂苷提取率有显著影响，而其他因素的影响较小。

表4 模型（1）分析表

表5 模型（2）分析表

4.2 乙醇浓度、提取温度与提取时间之间交互作用 乙醇浓度与提取时间之间的交互作用对复方总固形物得率的影响如图1所示。固定提取时间，复方总固形物得率随乙醇浓度的增加而增加，随着提取时间的延长，复方总固形物得率不断增加。固定乙醇浓度，复方总固形物得率随提取时间的延长而不断增加，随着乙醇浓度的增加，复方总固形物得率不断增加。因此，采用长时间高浓度乙醇提取法，可获得高固形物得率。

图1 乙醇浓度与提取时间对复方总固形物得率的影响

提取时间与提取温度之间的交互作用对复方中总皂苷提取率的影响如图2所示。当提取温度较低时，复方中总皂苷提取率随提取时间的延长而不断增加，但当提取温度逐渐升高，复方中总皂苷提取率随提取时间的延长而有所下降。固定提取时间，复方中总皂苷提取率随温度升高而降低，但当提取温度超过65℃，总皂苷提取率随温度升高而增加。

图2 提取时间与提取温度对复方中总皂苷提取率的影响

因此，采用短时间高温提取法，可获得较高皂苷提取率，此外，也可采用低温长时间提取法，也可获得较高皂苷提取率。

结合回归模型的数学分析得到复方总固形物、总皂苷提取的最优工艺参数，即：乙醇浓度68%，提取时间3小时，提取温度60℃，其总得率为39.92%，总皂苷提取率为2.55%。采用上述最优提取条件进行复方总固形物、总皂苷提取的提取实验，重复实验3次，实际测得总得率为41.0%，总皂苷提取率为2.60%。因此，采用响应面分析法优化得到的提取条件参数准确可靠，具有实用价值。

5 结论

以酸枣仁、远志等复方为原料提取总皂苷，以乙醇浓度、提取时间、温度为考察因素，以总得率、总皂苷提取率为指标，采用响应面分析法，确定了复方总固形物、总皂苷提取的最优工艺参数，即：乙醇浓度68%，提取时间3小时，提取温度60℃，其总得率为39.92%，总皂苷提取率为2.55%。

乙醇浓度对复方总固形物得率及皂苷提取率的影响最显著。采用长时间高浓度乙醇提取法，可获得高固形物得率。采用短时间高温提取法，可获得较高皂苷提取率，此外，也可采用低温长时间提取法，也可获得较高皂苷提取率。

参考文献

（本文编辑：张文娟 本文校对：张颖梅 收稿日期：2018-03-13）

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