通过总挥发油和细辛脂素含量比较野生辽细辛与栽培辽细辛的质量※

陆 杨 赵 容 李佳颖 李 鑫 赵海亮

（辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600）

辽细辛为《药典》规定的正品细辛的来源，为马兜铃科植物辽细辛（Asarum heterotropoides）的干燥根及根茎[1]。其性温，味辛，归心、肺、肾经，具有解表散寒，祛风止痛，通窍，温肺化饮的功效，主要用于风寒感冒，头痛，牙痛，鼻塞流涕，鼻鼽，鼻渊，风湿痹痛，痰饮咳喘。其主要成分是细辛总挥发油和细辛脂素，现代研究也表明细辛挥发油具有解热、镇痛、抗炎、抗真菌的作用[2]，细辛脂素更具有抗病毒和抗结核杆菌的作用[3]，还有文献报道细辛脂素对免疫有抑制作用，能够产生保护受体器官的作用[4]，两者都是《药典》规定的重要的质量检查标准。辽细辛为辽宁道地药材，但现在市场上的细辛的野生品与栽培品难以分辨，且尚未明确两者之间有效成分含量方面的差别，难以对其品质进行较为科学的评价，临床用药存在混乱的现象。故本实验通过对挥发油和细辛脂素这两种检验药材质量的指标性成分对野生与栽培的药材质量进行比较，具有科学性，且能为临床药材的选用提供一些依据。

1 仪器、材料及实验药材

电热套、1000 mL的圆底烧瓶、挥发油提取器、球形冷凝管、铁架台及铁夹、纯净水、栽培辽细辛（来自辽宁省新宾县细辛栽培基地）粉末、野生辽细辛（来自辽宁省西丰县）粉末，Aglient 1100高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）、F100型粉碎机（上海高致精密仪器有限公司）、超声波清洗器、电子天平BP211D（0.01 mg） （上海精密科学仪器有限公司）、细辛脂素对照品20 mg（上海源叶生物科技有限公司）、色谱甲醇、纯净水、乙腈。

2 实验方法

2.2 色谱条件 C18色谱柱（250 nm×4.6 nm，5μm）；流动相为乙腈—水（45∶55），流速1 mL/min保留时间34.322 min，柱温35℃，检测波长287 nm[6]。

2.3 对照品溶液制备 精密称定细辛脂素对照品3.49 mg置于5 mL容量瓶中，用甲醇溶解定容，摇匀。溶解完全后用0.45μm微孔滤膜过滤到EP管中，得0.698 mg/mL对照品储备液备用。

2.4 样品溶液制备 精密称定栽培细辛粉末、0.5007 g分别置于锥形瓶中，加入甲醇20 mL，称定质量，密封。超声（100 W，40 khz）提取45 min，取出并冷却至室温，称量并补足损失质量，过滤，收集续滤液，用0.45μm微孔滤膜过后作为栽培细辛的供试品溶液，即为样品一[7]。同样精密称取野生细辛粉末0.5026 g，并以上述步骤制成野生细辛的供试品溶液，为样品二。

2.5 线性关系考察 取“2.3”项制备的细辛脂素储备液1 mL定容至5 mL容量瓶中（0.14 mg/mL） 不同浓度分别进样详细记录数据，然后以进样质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程Y=2246.5x-165.18（R^2=0.9991），结果表明细辛脂素在0.21～1.4μg/μL与峰面积呈良好的线性关系。

3 实验现象

3.1 挥发油 细辛粉末呈现浅棕色，但栽培细辛的粉末较野生细辛的粉末相比颜色较浅。圆底烧瓶中的液体沸腾后，液面上会出现大量泡沫，会有淡黄色挥发油进入挥发油提取器，大部分挥发油的密度比水小，会浮在水面上，偶尔会有小部分挥发油的密度比水大，会在水层以下，极少见挥发油悬浮在水层中。保持微沸状态，期间挥发油数量不断增加，同时有少部分细小油滴随水回到圆底烧瓶。约2~3 h后，挥发油提取器内的挥发油体积基本不再增加，但仍有小部分细小的油滴随水回到圆底烧瓶中，但增加实验时间挥发油的含量仍未有所增加。实验结束后，读取挥发油体积，并将其保存在密封的EP管中，减少其挥发。栽培细辛的挥发油和野生细辛的挥发油都有强烈特殊气味，密度大部分小于水，也有少部分挥发油的密度大于水，且两者颜色并不存在明显差异，均为较浅的黄色。

3.2 细辛旨素 细辛脂素的对照品溶液呈现无色透明溶液，细辛脂素粉末开始并未完全溶解于甲醇中，待放置一夜后完全溶解。栽培细辛和野生细辛经过提取过滤后可以得到淡黄色的溶液，无明显气味，且两者颜色并无明显差别。色谱分析时，标准品可在34.322时见到明显尖锐的峰。样品一（栽培细辛样品）与样品二（野生细辛样品）则均会出现诸多不规则的杂质峰，但均在34.322附近出现明显尖锐的峰，基本可以同标准品的保留时间相吻合，可以判定，此峰为样品峰。见图1~3。

4 实验结果

4.1 挥发油比较 对实验所得数据进分析处理可得，栽培辽细辛挥发油含量约0.0202 mL/g，野生辽细辛的挥发油含量约0.1008 mL/g。

4.2 细辛脂素含量比较 经计算可得栽培辽细辛细辛脂素的含量约为2.3407%，野生辽细辛细辛脂素的含量约为2.3280%。

图1 对照品色谱图

图2 样品一（栽培样品）色谱图

图3 样品二（野生样品）色谱图

5 讨论

国家《药典》规定挥发油含量应不低于2%（mL/g），即不低于0.02 mL/g，由此可见，野生细辛挥发油含量符合《药典》规定，但栽培细辛挥发油的含量未达到《药典》标准。《药典》规定含细辛脂素不得少于0.050%。与此可见，栽培细辛和野生细辛的细辛脂素含量均达到了《药典》的标准。综合挥发油和细辛脂素两个指标来看，虽然栽培细辛和野生细辛的细辛脂素含量均达到药典标准且栽培细辛的细辛脂素含量略高于野生细辛的含量，但其挥发油含量未达到《药典》标准，故不应流入市场，用于临床治疗。但野生细辛资源有限且质量不均衡，难以满足市场用药需求，而栽培细辛含量又难以达到标准，故建议应深入探讨细辛挥发油和细辛脂素等有效成分在细辛中的生物合成机理，而后进一步改进细辛的栽培技术，保证细辛有效成分含量的同时保证细辛的产量以满足市场的用药需求，同时保护野生细辛资源。

本实验仅对细辛的有效成分进行了粗略的研究，未对细辛中的马兜铃酸的含量进行深入研究，也未对样品的重金属、农药残留及灰分等指标进行研究，也未对不同产地和不同栽培基地及不同品质的细辛进行系统研究。故建议临床用药时应对辽细辛多方面的数据进行综合考量，以确实保证药品疗效和用药者的身体健康。

参考文献