阿尔茨海默病患者同型半胱氨酸的表达水平及认知功能减退的危险因素

朱 烨 吴雅利 李宝香

(江西省人民医院住院部一部，江西 南昌 330006)

阿尔茨海默病(AD)近年来发病率呈逐年增高的趋势〔1〕，具体发病机制尚不明确，有研究认为可能与同型半胱氨酸(Hcy)水平异常增高导致的氧化损伤有关〔2〕。Hcy是氨基酸半胱氨酸的异种，既往研究证实Hcy水平升高会对神经系统造成损伤，与神经系统疾病有密切关系〔3〕。本文探讨AD患者血浆Hcy表达水平，试图探明Hcy在AD发生与发展中的作用，分析AD患者认知功能减退的危险因素。

1 资料和方法

1.1临床资料 选择江西省人民医院于2016年1月至2017年7月收治的60例AD患者作为AD组。纳入标准：(1)根据AD的临床诊断标准〔4〕确诊；(2)缺血指数量表(HIS)评分≤4分；(3)脑部影像学检查证实无局灶性病变；(4)临床资料完整，均为初诊病例，入组前未接受过针对AD的任何治疗。排除标准：(1)合并帕金森病等可导致认知功能障碍的疾病者；(2)入组前3个月内服用过可能影响Hcy代谢的药物(如维生素B)者；(3)合并血液系统疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病、肝肾衰竭及恶性肿瘤者；(4)误诊病例及未完成本研究中所有调查项目者。AD组男36例，女24例；年龄57～86岁，平均(70.36±4.78)岁；病程8个月至10年，平均(3.67±1.24)年；文化程度：本科及以上13例，初中至大专31例，小学及以下16例；根据AD的诊断标准，AD前无症状阶段21例，AD前临床有症状阶段24例，AD期15例。另选择同期在本院体检的健康者47人作为对照组，男28人，女19人；年龄55～84岁，平均(68.97±6.17)岁；文化程度：本科及以上10人，初中至大专24人，小学及以下13人。AD组与对照组性别、年龄、文化程度等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院伦理委员会批准同意。

1.2方法 对象均于清晨抽取空腹静脉血7 ml，分三管(3 ml、2 ml、2 ml)。3 ml管血样本在室温(37℃)环境下静置30 min，3 000 r/min离心5 min后常规分离留取血清。采用已糖激酶法测定血清空腹血糖(FPG)水平，仪器为美国伯乐Bio-Rad公司生产的D10型糖化血红蛋白分析仪及配套试剂盒检测FPG，正常参考值3.89～6.10 mmol/L；采用三酰甘油(TG)检测试剂盒(GPO-PAP法)检测血清TG水平，试剂盒购于深圳市库贝尔生物科技有限公司，正常值<1.7 mmol/L；采用总胆固醇测定试剂盒(COD-PAP法)检测总胆固醇(TC)，试剂盒购于上海丰汇医学科技有限公司，正常参考值3.0～5.2 mmol/L，严格按照试剂盒说明进行操作。2 ml管中的1管血样品采用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-2K)抗凝，3 000 r/min离心5 min后常规分离留取血清，采用循环酶法检测Hcy水平，采用日立7600全自动生化分析仪进行分析，试剂盒购于北京九强公司，严格按照试剂盒说明进行操作，正常参考值<15 μmol/L。另一管2 ml血样品采用EDTA-2K抗凝，混匀后取全血测定糖化血红蛋白(HbA1c)，试剂盒(上海晶抗生物工程有限公司)，实验操作严格按照试剂盒说明进行，正常参考值≤6.5%。

1.3观察指标 (1)各项指标检测结果：比较两组血浆Hcy水平及简易精神状态量表(MMSE)〔5〕、蒙特利尔认知评估(MoCA)量表〔6〕、日常生活能力(ADL)〔7〕评分、神经精神症状问卷中文版(CNPI)〔8〕评分；(2)分析Hcy水平与MMSE、MoCA、ADL和CNPI评分的相关性；(3)AD患者认知功能减退危险因素单因素分析：根据MMSE评分和MoCA评分进行分组，MMSE评分(大专及以上<23分、初中高中<22分、小学<20分、文盲<17分)和MoCA评分<26分的为认知功能减退组(28例)，其余为无认知功能减退(32例)，比较两组年龄、性别、教育年限、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、病情进展(AD前无症状阶段、AD前有临床症状阶段、AD期三个阶段)、FPG、TG、TC、Hcy和HbA1c水平差异；(4)认知功能减退危险因素多因素分析：以患者年龄、性别、教育年限、SBP、DBP、病情进展、FPG、TG、TC、Hcy和HbA1c为自变量，以认知功能减退与否为因变量，采用多因素Logistic回归分析法分析危险因素。

1.4统计学方法 应用SPSS21.0统计软件进行t、χ2检验；采用Spearman相关系数分析和多因素Logistic回归分析。

2 结 果

2.1Hcy水平及各量表评分结果 AD组Hcy水平、CNPI评分显著高于对照组，MoCA评分、MMSE评分、ADL评分显著低于对照组，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2AD组患者Hcy水平与各量表评分的相关性 相关性分析显示，AD组患者血浆Hcy水平与MMSE评分呈负相关关系(r=-0.798，P=0.007)，与MoCA得分呈负相关关系(r=-0.784，P=0.007)，与ADL评分呈负相关关系(r=-0.815，P=0.006)，与CNPI评分呈正相关关系(r=0.884，P=0.005)。

2.3AD组患者认知功能减退危险因素单因素分析 单因素分析结果显示，AD组患者认知功能减退与年龄、血浆Hcy水平、病情进展及SBP、 DBP有关，有认知功能减退者的年龄大于无认知功能减退者，病情进展为AD期所占比例、血浆Hcy水平高于无认知功能减退者，SBP、DBP水平小于无认知功能减退者，差异有统计学意义(P<0.05)；与患者的性别、教育年限、FPG、TG、TC和HbA1c无关(P>0.05)。见表2。

2.4AD组患者认知功能减退危险因素多因素Logistic回归分析 多因素分析结果显示，高龄、病情进展为AD期、高水平Hcy是AD患者认知功能减退的独立危险因素(P<0.05)，性别、教育年限、SBP、DBP、FPG、TG、TC和HbA1c不是AD患者认知功能减退的独立危险因素(P>0.05)。见表3。

表1 两组Hcy水平及各量表评分结果比较

表2 AD组认知功能减退的危险因素单因素分析

1)：依次为AD前无症状阶段、AD前临床有症状阶段、AD期

表3 AD组认知功能减退危险因素多因素Logistic回归分析

3 讨 论

AD是一种中枢神经系统退行性病变，具体发病机制尚不十分明确。近年来关于AD的研究，多集中于常用脑脊液tau蛋白、β淀粉样蛋白等生物标志物检测，但脑脊液获取较困难，不便于临床推广。Hcy是一种结构为HSCH2(NH2)CO2H的含硫氨基酸，参与体内多种能量代谢及甲基化反应，是蛋氨酸循环脱甲基后的衍生物，通过甲基化途径、转硫化途径和在高浓度蛋氨酸情况下直接释放到细胞液中三条途径参与细胞内代谢〔9〕。既往研究〔10〕证实血浆Hcy水平升高与冠心病、深静脉血栓形成及脑卒中等多种血管性疾病有密切的关系，是这些疾病发生与发展的独立危险因素。Hcy的致病机制为：机体血液中的Hcy容易被氧化形成Hcy化合物、超氧化离子自由基和过氧化氢，进而造成血管平滑肌细胞增殖和损伤血管内皮细胞，因此推断Hcy与AD的发生与发展有密切关系〔11〕。

本研究显示，AD组患者血浆Hcy呈高水平表达的状态。Hcy由细胞内的蛋氨酸脱甲基形成，当其进入体循环后大部分以血浆白蛋白的氧化形式存在，少量以还原型Hcy的形式存在于血液中，在正常生理状态下，Hcy的合成与代谢是一个动态平衡的状态，此情况下血液中的Hcy水平较低〔12〕。如果Hcy的动态平衡被破坏，其代谢关键酶基因突变或活性受损，导致血液Hcy水平升高(即发生Hcy血症)。本文结果说明AD患者精神障碍、认知功能障碍程度越严重。Hcy与MMSE、MoCA、ADL和CNPI等量表评分存在显著的相关性关系，而以上各量表是评估AD患者病情及预后的重要工具，说明血浆Hcy水平与AD患者的认知功能有明显的相关性。检测血浆Hcy水平可作为AD患者早期诊断、病情及预后评估的重要指标。

在AD的临床治疗中，应早期针对性进行降低血浆Hcy水平的治疗，同时应注意控制患者的血压。Hcy在AD患者认知功能减退中的作用机制可能为：首先，Hcy水平增高可引起脑血管病变，增加了脑卒中的危险性，更易引发AD〔13〕；其次，Hcy水平增高使内皮素功能异常，降低了一氧化氮活性，氧应激增加，使得脑老化加剧，加速了认知功能减退〔14〕；第三，血液中Hcy水平增高能诱导海马神经元凋亡，强化了β淀粉样蛋白变性，增强了谷氨酸的神经细胞毒性作用加速了患者认知功能减退〔15〕。

4 参考文献

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