2011—2017年安徽省市县级兽医系统实验室检测能力比对结果分析

周迎春，何长生，王 军，王 倩，刘 华，沈 艳，王 维，占松鹤

（安徽省动物疫病预防与控制中心，安徽合肥 230091）

实验室间能力比对作为一项评价实验室工作能力的方法，一直在全球范围内被广泛应用，我国卫生系统、质检系统也将此方法作为评价、管理、提高实验室检测水平的重要手段[1-2]。实验室间的比对可以确定检测能力，识别实验室间差异和实验室存在的问题，有益于提高技术人员的专业水平，进而提高实验室的综合检测能力[3-4]。开展兽医实验室检测能力比对，是评价兽医实验室检测水平的重要手段，也是加强兽医实验室质量控制的有效方法[4-5]。

按照农业农村部要求，安徽省自2011—2017年连续组织开展了市、县级兽医实验室检测能力比对工作，通过试验比对分析和查找不足，进一步完善实验室质量管理体系，提升安徽省市县级兽医实验室的检测能力和技术水平。现将安徽省主要做法和存在问题总结如下，以便交流提高。

1 比对范围

安徽省2011—2017年连续组织市、县级兽医实验室（省级考核合格）开展检测能力比对工作。

2 比对方法

2.1 比对项目设置

每年设置3～5个比对项目，根据市、县级兽医实验室的检测能力不同，每个实验室参加3个项目的检测能力比对（表1）。

表1 2011—2017年检测能力比对总体结果统计表

2.2 比对试剂、样品的准备与发放

比对试剂和样品均由安徽省动物疫病预防与控制中心按照“四个统一”原则准备和发放，即统一制备发放比对样品，统一订购检测试剂，统一检测方法，统一时间领取样品和试剂。每个比对项目设置5～6个样品。定量或半定量样品设置了不同的滴度，定性样品设置了阴性、阳性和弱阳性样品，其中的1～2个样品还设置了重复样品。

2.3 比对检测方法

所有比对项目的检测方法均采用国家标准或参考实验室推荐方法（表2）。

表2 检测能力比对项目采用的标准（方法）

2.4 评判标准

2.4.1 禽流感病毒抗体检测评判标准 检测值与参考值的偏差不超过1个滴度，判为结果准确。

2.4.2 猪瘟病毒抗体检测评判标准 检测值与参考值的偏差不超过1个滴度，判为结果准确。

2.4.3 口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测 强阳性和弱阳性样品的检测结果应为“阳性”，阴性样品的检测结果应为“阴性”。

2.4.4 布鲁氏菌抗体检测评判标准 强阳性和弱阳性样品的检测结果应为“阳性”，阴性样品的检测结果应为“阴性”。

2.4.5 猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸检测评判标准 强阳性和弱阳性样品的检测结果应为“阳性”，阴性样品的检测结果应为“阴性”。

2.4.6 A/O型口蹄疫病毒抗体检测评判标准 检测值与参考值的偏差不超过一个滴度，判为准确。

2.4.7 H7亚型禽流感病毒核酸检测评判标准 强阳性和弱阳性样品的检测结果应为“阳性”，阴性样品的检测结果应为“阴性”。

2.5 比对结果的报送

参加比对的兽医实验室在收到样品之日起4日内完成检测，并将检测结果传真或扫描件发至安徽省动物疫病预防与控制中心检测科。出具正式的检测报告，送至安徽省动物疫病预防与控制中心检测科。

3 结果分析

3.1 2011—2017年总体比对情况

2011—2017年安徽省共开展了30个项目的比对，样品检测结果总体正确率为92.32%，每年的样品检测结果正确率从87.46%到97.22%不等；实验室检测总体准确率为81.12%，每年实验室检测准确率从65.81%到91.67%不等；参加比对的实验室数量逐年增加，2017年达到74个，占全省兽医实验室的79.57%（表1、图1）。

图1 2011—2017年全省兽医实验室比对情况

3.2 不同检测方法的比对结果

比对项目分为血清学检测和病原学检测。其中血清学检测比对了4种检测方法，分别是HI、IHA、ELISA、试管凝集。病原学检测比对了RTPCR方法或荧光RT-PCR方法。这5种检测方法是检测常见动物疫病常用的检测方法，也是国家动物疫病监测计划里要求使用的检测方法。从表3可知，ELISA方法检测准确率最高，试管凝集次之，IHA最低。

表3 2011—2017年不同检测方法的检测结果统计

4 讨论

4.1 比对工作总体呈上升趋势

由图1可知，2011—2017年比对结果准确率总体趋势稳步上升，样品检测准确率从87.46%提高到93.92%，实验室检测准确率从65.81%提高到82.43%。2011—2017年参加检测比对的实验室数量从39个增至74个，占全省兽医实验室的79.57%。由此可看出，兽医实验室建设的重要性日益引起各级兽医主管部门的重视，实验室的检测能力和水平逐年上升。

4.2 HI检测准确率年度不均衡

HI是常规试验项目，虽然准确率总体呈上升趋势，但2015—2017年实验室检测准确率分别为95.31%、 72.46%、78.38%，比对结果变幅较大。究其原因，比对试剂、样品、方法没有改变，唯有参与比对实验室的检测人员发生了变化。部分实验室为充实技术力量而招聘了新人，因这些人员未经过系统培训，检测能力和水平较差，导致2016年的HI项目的比对结果准确率有较大下降；经培训之后，新进人员的检测能力和水平得以提升，因此2017的准确率有所提高。

4.3 病原学和血清学检测能力不均衡

RT-PCR的灵敏性、准确性、特异性较高，能在较短时间内检出病原体，目前安徽省主要是省级、市级以及国家级疫情测报站具备这种检测能力。从比对结果看，安徽省市级和国家级疫情测报站的病原学检测能力仍是薄弱环节，平均检测准确率仅为60.61%，2017年的准确率仅为31.82%。分析其原因，主要是受基层编制待遇等的影响，专职、固定的实验室检测人员较少，技术培训不能及时开展，常规HI、ELISA试验开展较多，病原学检测项目几乎不开展，因此此项检测能力和水平较弱。目前主要依靠省级实验室承担此项检测任务。

5 建议

安徽省兽医实验室检测能力比对工作已连续开展7年。从比对结果看，市县级兽医实验室的总体检测能力和技术水平在逐年提高，这不仅反映出比对工作所取得的成效，也说明安徽省农委在加强兽医实验室质量体系建设方面的措施是有效的。但部分实验室的检测能力和水平还有待提高，尤其市级实验室的病原学检测能力。为进一步发挥兽医实验室在动物疫病防控方面的重要作用，建议做好以下工作。

一是加强实验室人员培训工作，特别是新进人员培训，培训应包括检测技术、实验结果的判定与分析、生物安全和实验室管理等，严格持证上岗，以保证检测结果的准确性[6]。检测技术方面尤其要加强比对薄弱项目的培训，如RT-PCR。

二是加强实验室环境和硬件投入。检测结果与人员、设备、环境、样品、方法、试剂等密切相关，实验室检测能力比对是在相同方法、相同试剂、相同样品的前提下进行比对，比对的是不同环境和设备条件下检测人员的操作能力。只有把实验室环境和设备控制在满足试验的条件下，人员经过培训，才能达到满意的效果[6]。

三是加强实验室人员管理。基层兽医主管部门要充分认识到兽医实验室在动物疫病防控中的重要技术支撑作用，要通过政策倾斜、职称评定等鼓励措施，培养一批稳定、专业的实验室检测人员，充分发挥兽医实验室的技术职能。

[1] 刘来福，张鹤晓，张利峰，等. 家禽禽流感病毒AGID抗体定性检测及H5、H9亚型HI抗体定量检测你呢里验证结果分析[J].现代测量与实验室管理，2004（2）：29-32.

[2] 董昕欣，刘伟，邴国霞，等. 2015年全国省级兽医系统实验室检测能力比对结果分析[J].中国兽医杂志，2015，51（11）：103-105.

[3] 陈昕，黄振华，朱莹.微生物实验室室间比对的结果分析[J].中国卫生检验杂志，2008，18（3）：554-555.

[4] 吴赟竑，孙冰冰，吴雪军，等. 2016年浙江省兽医系统实验室检测能力比对结果分析[J].浙江畜牧兽医，2017（1）：1-4.

[5] 王文，张继红，兰玲，等. 2010年新疆兽医系统实验室检测能力比对试验的探讨与建议[J].中国动物检疫，2011，28（9）：19-21.

[6] 孙圣福，陈伟，陈静，等. 2011—2014年山东省兽医系统实验室检测能力比对结果分析[J].中国动物检疫，2016，33（3）：52-54.