西藏部分地区藏猪戊型肝炎病毒血清流行病学调查

贡 嘎，王一飞，益西措姆，索朗斯珠

（西藏农牧学院动物科学学院，西藏林芝 860000）

戊型肝炎由戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus， HEV）引起。HEV为单股正链RNA病毒，属戊型肝炎病毒科（Hepeviridae）戊型肝炎病毒属（Hepevirus），基因组全长约7.2 kb，存在3个开放阅读框（Open reading frame，ORF），其中ORF1是非结构基因编码区，ORF2编码结构蛋白和衣壳蛋白，ORF3编码特异性的免疫反应抗原。HEV主要有4个基因型（HEV 1～4），其中1型和2型只感染人，主要由水源污染传播，3型和4型为人兽共患[1-2]。HEV对孕妇和胎儿危害尤为严重，极易造成孕妇早产、流产和产死胎，妊娠晚期感染HEV后，胎儿死亡率高达25%[3-6]。

我国流行的HEV主要为基因1、3和4型。基因1型主要分布在新疆和北京地区；3型主要分布在上海及江苏等地；4型是优势基因型，地理分布广泛，主要分布于东北、华中、西北和华东等地区，其中4a、4d和4h是优势亚型[7]。猪是HEV的主要传播宿主。人食用HEV感染的生猪肉和生猪肝可导致感染[8-11]。文献[12]报道，我国猪HEV血清抗体阳性率在59.5%～84.3%之间。但目前有关西藏地区这方面的研究报道较少。

藏猪养殖是西藏地区主要的支柱产业，目前仍以传统的放牧饲养为主。当地居民喜食半生（或生）肉、生肝，且当地卫生条件较差，因此藏猪HEV检测具有重要的公共卫生意义。2016年11月—2017年3月，从西藏不同地区随机采集未接种戊型肝炎疫苗的藏猪血清，采用ELISA方法检测HEV抗体（HEV Ab），从而了解西藏不同地区的感染现状，为该病防控提供数据支持。

1 材料与方法

1.1 材料

2016年11月—2017年3月，在拉萨、林芝、日喀则、山南、昌都等5个市，随机采集藏猪血清各61份，共计305份，–20 ℃保存，待检。

1.2 试剂

猪戊型肝炎病毒抗体酶联免疫分析试剂盒：购自上海泛柯实业有限公司，批号F15142-A。

1.3 主要仪器

恒温恒湿培养箱：上海三发科学仪器有限公司，型号GNP-9050；多功能酶标分析仪：深圳雷杜生命科学股份有限公司，型号RT-2100C。

1.4 检测方法与结果判定

1.4.1 检测方法 按照猪戊型肝炎病毒抗体酶联免疫分析试剂盒说明书进行操作。

1.4.2 结果判定 试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00，阴性对照平均值≤0.10。临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15。阴性判定：样品OD 值＜临界值（CUT OFF）者为HEV Ab阴性。阳性判定：样品OD 值≥临界值（CUT OFF）者为 HEV Ab阳性。空白孔调零，当阳性对照孔平均OD值≥0.80，阴性对照孔平均OD值（NC）＋0.21。若样品OD值≥临界值，判定为HEV Ab阳性；若样品OD值＜临界值，则判定为阴性。

1.5 数据统计分析

通过卡方检验（SPSS 21.0），对不同性别和不同采样地之间的HEV抗体阳性率进行显著性差异分析。

2 结果与分析

2.1 不同地区

5个市305份藏猪血清的HEV Ab总阳性率为26.6%（81/305），其中拉萨和林芝的阳性率最高，均为32.8%（20/61），其次是昌都、日喀则和山南，阳性率分别为29.5%（18/61）、26.2%（16/61）和11.5%（7/61）。利用SPSS 21.0方法，对不同地区阳性率进行显著性差异分析，发现山南市阳性率与拉萨、昌都、林芝、日喀则市相比差异显著（P＜0.05，表1）。

表1 西藏不同地区藏猪HEV Ab阳性率差异对比分析

2.2 不同性别

分析不同性别藏猪的抗体检测结果，发现母猪血清中的HEV Ab阳性率为29.7%（46/155），公猪为23.3%（35/150）。利用SPSS 21.0方法进行显著性差异分析，发现无显著差异（P＞0.05）。

3 讨论

戊型肝炎是一种自限性的急性病毒性肝炎[13]。世界卫生组织（WHO）估计，全球每年约有5万余人死于HEV感染[14]，因此该病是一个重要的公共卫生问题。由于西藏特殊的地理环境，在一些地区至今还延续着食用生或半生猪肉和猪肝的习俗，并且部分地方仍直接饮用不经任何消毒处理的露天生水，而“粪-口”途径是导致HEV传播感染的最主要方式。本调查利用ELISA方法，对西藏5个地区采集的305份藏猪血清进行了HEV Ab检测，发现每个地区均有阳性样品被检出，总阳性率为26.6%（81/305），初步表明西藏5个地区存在不同程度的藏猪HEV感染。

时新春等[15]2013年在西藏林芝县、米林县检测HEV血清抗体，发现总阳性率为48.46%，其中公猪为52.63%，母猪为47.89%。唐建华等[16]2015年检测的藏猪HEV Ab阳性率为41.32%。本次调查显示，拉萨、林芝两地抗体阳性率最高，均为32.8%，山南最低，为11.5%，显示西藏各地都有不同程度的HEV流行，应引起相关部门的足够重视。从性别上看，母猪抗体阳性率为29.7%，公猪为23.3%，无显著差异。这与时新春等[17]的差异分析结果一致，但与唐建华等[18]的结果相反。这可能与样品数量有关。

据文献[17-19]报道，国外HEV Ab阳性率研究中，意大利、英国、丹麦等国家的阳性率较高，分别为87.0%、85.5%、73.2%，丹麦较低（31.0%）；国内平原地区HEV Ab阳性率也有较大差别，最高为湖南省（84.3%），其次为广西（77.5%）、福建省（66.7%）、北京市（62.1%）、云南昆明市（59.5%），均高于本次检测结果。这可能与每个地区的生猪饲养环境和管理有一定的关联。

4 结论

综上所述，我国西藏地区藏猪中存在HEV感染。虽然HEV血清阳性率与国内外其它地区相比并不高，但鉴于当地卫生条件较差，以及喜食半生或生猪肉和猪肝的习俗，西藏相关部门应高度重视，采取适当的防治措施，如做好戊型肝炎相关专业知识宣传，倡导健康饮食，加强高发区牲畜检测和卫生消毒等，以控制HEV流行。

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