宁夏一起牛口蹄疫疫情的紧急流行病学调查

王玉梅，王幼明，王晓亮，马 龙，尹 才，张成莲，李莉娟，张学军，周海宁，李 杰，沙湧波

（1. 宁夏回族自治区动物疾病预防控制中心，宁夏银川 750011；2. 中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）

口蹄疫（Foot and mouth disease，FMD）是一种危害哺乳动物的高度接触性传染病，由口蹄疫病毒（FMDV）引起，对偶蹄动物具有严重的潜在经济危害。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告动物疫病，我国认定其为一类动物传染病[1]。典型FMD病例的特征是在蹄部、口腔黏膜部位，以及雌性动物乳房上出现水泡[2]。

2018年1月17日，宁夏农牧厅兽医局接到来自银川市兴庆区养殖户罗某某报告，称其饲养的6头牛出现不同程度的精神沉郁，以及流涎、口腔水泡、蹄壳松动等症状，怀疑为FMD。为了解病例的具体情况，确诊疫情，确定疫情可能扩散的范围，分析可能的风险因素，以便及时提出有效的控制措施，宁夏动物疾病预防控制中心组建工作组，赴现场开展了调查工作。

1 方法

1.1 病例定义

1.1.1 疑似病例 自2017年12月21日至本次暴发调查结束，在宁夏银川市兴庆区月牙湖乡小塘村出现以下症状之一的牛羊：（1）精神沉郁，呆立流涎或跛行；（2）唇部、舌面、齿龈、鼻镜、蹄踵、蹄叉、乳房等部位出现水泡；（3）水泡破溃，结痂，或者蹄壳松动脱落；（4）突然死亡。

1.1.2 确诊病例 实验室病原学检测为阳性的疑似病例。

1.2 调查方式

1.2.1 问卷调查与访谈 通过问卷调查和访谈，了解当地牛羊的养殖情况，发病养殖户的地理分布、周边环境、养殖模式、生产和免疫状况，以及疫病发生经过，现场观察发病牛的临床症状，并对小塘村所有养殖户养殖的牛羊进行病例搜索排查（图1）。

图1 现场调查

1.2.2 实验室检测 对病原样品，采用苏州天隆科技有限公司生产的核酸提取试剂盒（批号E0117120181）和北京世纪元亨有限公司生产的口蹄疫病毒通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒（批号FMD20170614P）进行荧光RT-PCR病原学检测；对血清样品，用中国农业科学院兰州兽医研究所生产的口蹄疫液相阻断ELISA试剂盒（批号O型20171011101-7，A型20170906103-4，亚Ⅰ型20171013102-1）分别进行O、A、亚Ⅰ型抗体ELISA检测。

1.2.2.1 病原学检测 现场采集疑似发病牛血样9份、水疱皮3份、O-P液5份进行FMD病原学检测（图2）。

图2 现场采样

1.2.2.2 血清学检测 对疫区和受威胁区进行FMD免疫抗体紧急检测。群体大小为牛1 598头、羊3 072只。根据简单随机抽样原则，按95%的置信水平，50%的预估流行率，5%的可接受误差，计算抽样检测数量。采集牛血样品386份，涉及75个养殖场（户）；采集羊血样品340份，涉及69个养殖场（户）。

1.3 数据来源与分析

通过现场问卷调查与实验室检测，对疫病进行时间、空间和群间分布描述，探讨可能存在的风险因素。应用Excel与Epi infoTM7，对收集的数据进行统计学分析。

2 结果

2.1 疫点概况

疫点位于银川市兴庆区月牙湖乡小塘村。月牙湖乡是银川市较大的一个生态移民安置区，现辖12个行政村。小塘村毗邻大塘北村、大塘南村和塘南村（图3）。截止到2017年10月，4个村共存栏牛1 598头、羊3 072只。小塘村是一个回民移民村，现有5个队，养殖牛272头、羊572只。

图3 银川市兴庆区月牙湖乡行政村布局

首个报告病例的养殖户罗某某属于小塘村3队，2008年开始养羊，2014年开始养牛，目前共养羊9只、牛6头。饲养方式为连续饲养。畜舍简易，卫生状况较差，无相应防疫和生物安全设施（图4）。

图4 养殖户罗某某的牛羊养殖舍

2.2 发病情况

排查发现，共有4个养殖户的肉牛出现不同程度的流涎，口吐白沫，口腔、蹄部出现水疱等临床症状（表1）。

据调查，首发病例（即指示病例）可能出现在2017年12月28日。调查起始时间从首发病例向前推7 d（FMD潜伏期一般为7 d）即2017年12月21日；2018年1月17日接到报告后介入调查，1月18日诊断为疑似FMD疫情；随后立即封锁疫区，启动应急预案，并实施相应的控制措施；2018年2月1日解除封锁。此次疫情的流行曲线见图5。

表1 兴庆区小塘村疫情排查养殖户调查情况

此次发病的4个养殖户位置相对集中，且围绕一清真寺分布，而清真寺斜对面有一个牛羊屠宰点（图6）。4个养殖户中发病的均为黄牛，养殖的羊均无异常；发病牛中除1头是7月龄幼牛外，其它均为成年牛。

图5 疫情流行曲线

图6 4个养殖户的空间分布

2.3 疫情追踪与追溯

在调查养殖户罗某某与马某某时，获悉附近养殖户杨某某于2017年12月下旬，将1头发病牛屠宰卖出，但在调查时未能确认。现场观察其养殖的3头牛也无任何临床症状。马某某因其饲养的病牛为此次调查的指示病例，成为此次疫情追踪溯源的调查重点，但在调查中未发现任何有效信息。

养殖户杨某某和马某某周边50 m内，有一处牛羊屠宰点。该屠宰点每日至少屠宰1头牛、4～5只羊。屠宰的牛羊主要是月牙湖乡本地饲养的，少数来自其他地区。2017年12月以来，每天均有外地牛羊在此处被屠宰。现场看到，屠宰点在屠宰后并未及时清理消毒（图7）；贩运车上沾染了动物粪便，也未经常清洗消毒。

图7 小塘村三队屠宰点现场

此外，调查中还了解到，2018年1月8日有两名牛贩运人在小塘村各养殖户进出，但未能明确两名牛贩运人的具体信息。

2.4 实验室检测

2.4.1 病原学检测 3份水疱皮与5份O-P液均采自罗某某养殖户。经荧光RT-PCR检测，5份为O型FMD阳性。9份牛血清的液相阻断酶联免疫吸附试验检测结果见表2。根据病例临床表现和宁夏动物疾病预防控制中心实验室病原学检测结果，判定本次疫情为疑似FMD疫情。2018年1月18日将相关病料送往国家口蹄疫参考实验室进行检测确认；1月26日确诊为Mya-98系O型FMD。

2.4.2 血清学检测 对疫区及周边地区进行了O型、A型免疫抗体水平检测。检测结果见表3。

2.5 可能来源及潜在风险因素分析

患病动物和潜伏期内携带病毒动物是FMD的主要传染源。FMDV主要通过直接接触、间接接触和空气传播[3]。根据现场紧急流行病学调查，对可能引起该起疫情的来源及潜在风险因素进行了简单风险等级定性划分，认为“私屠滥宰患病或潜伏期内牛羊，屠宰点调运车辆携带病原”导致病原传入的风险高（表4）。

表2 宁夏动物疾病预防控制中心实验室ELISA检测结果

表3 疫区周围FMD免疫抗体检测结果

2.6 疫情处置

疫情确诊后，兴庆区政府立即启动了应急预案，及时发布了封锁令；根据《口蹄疫防治技术规范》要求，严格划定疫点、疫区、受威胁区，同步进行流行病学调查、扑杀、消毒、紧急免疫、监测等工作。在疫区小塘村周边共设立了4个哨卡，扑杀与无害化处理牛14头、羊21只。该起疫情得到了有效控制。

3 分析与讨论

3.1 检测结果的准确性

经宁夏动物疾病预防控制中心实验室进行液相阻断ELISA检测，发现罗某某户的1份牛血清A型、亚Ⅰ型抗体检测结果均为阳性，同批检测的其它样品均为阴性；经病原学检测，无A型、亚Ⅰ型阳性，因而排除混合感染情况。考虑到中国农业科学院兰州兽医研究所液相阻断ELISA检测试剂盒的敏感性与特异性均为90%，推断这份A型、亚Ⅰ型抗体阳性可能是假阳性。

表4 疫情可能来源及定性风险评估

3.2 药物治疗对疫情发展的影响

调查中发现，发病的4个养殖户中有3户进行了药物治疗。用药情况大体相同，但治疗效果不一致。主要原因可能是养殖户的心态与目的不同。罗某某的牛未经免疫且主动报告疫情，调查中可能有夸大或虚报的情况，而其他两户均报告进行了常规免疫，且为被动调查，有回避相关情况的可能。

3.3 调查的局限性

一是疫情报告滞后，不能明确指示病例，这对疫情的追踪溯源带来了困难；二是调查中获取的诸多信息都是养殖户的回忆性信息，其准确性不能确定；三是部分信息没有得到进一步证实，这为疫情发生原因的假设带来了困难；四是调查中判断屠宰点是一个高风险场所，但由于屠宰点相关样品流动性大，来源复杂，同时调查时已失去了最佳时间点，这为验证假设带来了挑战。

4 防控建议

4.1 规范牛羊定点屠宰监管

规范屠宰加工点经营许可，将动物防疫条件和无害化处理等作为日常监管的重要内容，加强法律法规宣传和责任义务告知，监督业主保持环境卫生，指导其改善动物防疫和安全生产条件。

4.2 严格活畜调运监管

加强动物产地检疫和流通监管，防止疫情跨地区传播。

4.3 加强FMD免疫与监测

切实做好FMD强制免疫与补免工作，避免漏免。同时加强免疫抗体监测，根据监测数据实时调整防控策略。

4.4 加强FMD防控的宣传教育

对辖区内群众加强FMD防控相关知识的宣传与指导，提高养殖户疫病防治意识与疫情报告意识，尽早的将疫情控制在可控范围内。

5 结论

调查确认，此次暴发是一起牛Mya-98系O型FMD疫情；疫情波及范围小并得到有效控制。本次疫情发生与牛羊的私屠滥宰、人员和车辆的流动控制和消毒不严有关。牛O型、A型，羊O型、羊A型FMD免疫合格率分别达到89.9%、88.6%、91.5%、93.2%，说明免疫工作确实，因而为阻止疫情扩散建立了有效的免疫屏障。建议进一步规范牛羊定点屠宰监管，严格活畜调运监管，提高免疫与监测力度，加强相关防控知识的宣传教育。

[1] 赵柏林，杜建，辛盛鹏. 印度口蹄疫疫情的风险分析与评价[J]. 畜牧与兽医，2017（9）：140-143.

[2] 李克斌. 口蹄疫流行近况与防控注意事项[J]. 兽医导刊，2017（17）：14-16.

[3] 任阳阳. 口蹄疫的诊断和防治措施[J]. 甘肃畜牧兽医，2017（12）：44.