龙湾区部分市售食品中黄曲霉毒素污染状况的调查

□ 王晓红 金慧慧 姜 娴 温州市龙湾区疾病预防控制中心

黄曲霉毒素（AF）是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物[1]，有强烈的毒性和致癌性，是重要的食品污染物之一，其中以花生、玉米和大米污染最为严重[2]，对人和动物均具有极强的毒性和致癌性，是诱发肝癌的重要物质之一。为了解龙湾区市售大米、玉米、花生及其制品中黄曲霉毒素污染状况，探讨其对人和动物存在的潜在危害，2014—2016年对本辖区市售大米、玉米、花生及其制品中常见的4种黄曲霉毒素污染状况进行监测调查。

1 材料和方法

1.1 样品来源

2014—2016年在龙湾区内各农贸市场或超市等采集谷物及其制品（大米、玉米粉、面粉）、豆类及其制品（黄豆、黑豆、红豆）、坚果及其籽类（花生、芝麻、瓜子）、油脂及其制品（玉米油、大豆油、花生油）、调味酱（花生酱、豆瓣酱、辣椒酱）等448份样品。

1.2 试剂

1.2.1 试剂

免疫亲和柱（Afla StarTMR，Romer Labs公司）；甲醇为色谱纯（莫克公司）；水为超纯水；碘为分析纯。

1.2.2 标准品

黄 曲 霉 毒 素 B1、B2、G1、G2混标（46300-U SUPELCO，含量为98%～99%，黄曲霉毒素B1和G1分别为 0.932 μg/mL 和 0.876 μg/mL，黄曲霉毒素B2和G2分别为0.309 mg/L和0.265 mg/L，规格为每支1 mL）。

1.2.3 仪器

Waters I Class型高效液相色谱仪（荧光检测器2475）；AL204电子天平（d=0.1 mg）；德国IKA公司的T25型均质器。

1.3 方法

1.3.1 样品的处理和测定

采取免疫亲和层析法，该方法特异性强、净化效果出色、操作简单[3]。称取5 g左右研磨均匀大米样品于50mL离心管中，加入10 mL（甲醇+水）（60+40）均质提取3 min。另取一干净50mL离心管，里面加入10 mL（甲醇+水）（60+40）冲洗刀头，均质3 min，将此均质液倒入初次均质的离心管内，合并均质液，玻璃纤维滤纸过滤。取10 mL滤液与20 mL纯水混合，备用。将50 mL注射器筒与免疫亲和柱顶部相连，将亲和柱放置于固相萃取装置上，移取15 mL上述滤液稀释液到注射器筒内，放空亲和柱柱内液体，调节下滴速度，使液体以1～2滴/秒速度过柱，待样液流完后，加入20 mL纯水，以稳定流速洗涤免疫亲和柱，待柱内液体被抽干后，在亲和柱下面放置10 mL刻度试管，然后用1.5 mL甲醇分三次洗脱黄曲霉毒素，将洗脱液全部收集于10 mL刻度试管中，整个洗脱时间不小于60 s。在50 ℃下氮吹吹至0.5 mL以下，用甲醇定容至0.5 mL，再用纯水定容至1 mL，漩涡30 s溶解残留物，0.22滤膜过滤后放高效液相色谱上待测。高效液相色谱法结合荧光检测器检测黄曲霉毒素是国际上比较流行的方法[4]。

1.3.2 标准曲线配制

以样品黄曲霉毒素含量为横坐标、峰面积为纵坐标，进行线性回归，标准曲线配制见表1。标准曲线std1点色谱图见图1。

表1 黄曲霉毒素标准曲线配制表（单位：ng/mL）

1.4 判断标准

食品中4种黄曲霉毒素的检出与判断标准按照GB 2761-2017《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》执行。本方法的方法检出限为：B1为0.4 ng/mL，B2为 0.2 ng/mL，G1为0.4 ng/mL，G2为0.2 ng/mL。

2 结果

2.1 黄曲霉毒素污染情况

图1 标准曲线std1点色谱图

在采集的488份样品中，调味酱这一大类污染最严重，调味酱中黄曲霉毒素总阳性率达54.5%，B1、B2、G1、G2阳性率分别为52.3%、17.0%、23.9%、14.8%。坚果及其籽类80份，总阳性率达46.2%，B1、B2、G1、G2阳性率分别为46.2%、16.2%、18.8%、16.2%。谷物及其制品80份，黄曲霉毒素总阳性率达10.8%，B1、B2、G1、G2阳性率分别为10.0%、5.8%、2.5%、2.5%。豆类及其制品、油脂及其制品这两大类样品均未检出黄曲霉毒素。四种黄曲霉毒素污染最严重的是AFB1，总阳性率高达21.2%，污染情况为B1＞G1＞B2＞G2。

2.2 黄曲霉毒素联合污染情况

监测发现，在花生酱、玉米粉、花生中存在黄曲霉毒素联合污染情况，所有样品黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2中有2种及以上联合污染率为65.8%，其中花生酱联合污染率为71.4%，玉米粉联合污染率为42.8%，花生联合污染率为63.0%。

3 讨论

黄曲霉毒素常由黄曲霉等霉菌在霉变的食品中产生，如粮食、豆类、坚果等，其中又以花生和玉米较易感染[5]。通过监测调查发现，在采集的448份样品中，调味酱这一大类黄曲霉毒素污染率最高，总阳性率达54.5%，有较大的潜在危害。通过查看采样记录发现，这主要是由调味酱中的花生酱污染率极高引起的。坚果及其籽类80份样品，总阳性率达46.2%，主要污染物为花生。谷物及其制品80份黄曲霉毒素总阳性率达10.8%，代表污染物为玉米粉。花生酱、花生、玉米粉又存在四种黄曲霉毒素的联合污染，四种黄曲霉毒素中污染最严重的是AFB1，AFB1是4种黄曲霉毒素中毒性和致癌性最强的一种，众多检测报告中均显示AFB1存在检出率高、含量超标现象[6-7]。因此，本次调查分析结果表明，龙湾区市售食品存在黄曲霉毒素污染隐患，相关部门要加强监控，以保证消费者的身体健康。黄曲霉毒素监测范围可以进一步缩小，可以把食品种类具体缩小到花生、花生酱、玉米粉等阳性率比较高的食品上，从而实现更有效、更有针对性监测及防控。

[1]黄湘东,龙朝阳,梁春穗,等.广东省市售大米、花生及其制品中黄曲霉毒素污染水平调查[J].华南预防医学,2007,33(3):62.

[2]王丹,马淑清.潍坊市售部分食品中黄曲霉毒素污染情况分析[J].中国城乡企业卫生,2015(2):71.

[3]李少晖,任丹丹,谢云峰,等.食品中黄曲霉毒素检测方法研究进展食品安全质量检测学报[J].2015,6(4):1108-1109.

[4]胡一晨,万丽,范成杰,等.免疫亲和柱净化HPLC柱后光化学衍生化法检测中药及染菌中药制剂中间体的黄曲霉毒素[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(10):117.

[5]王雯,李岗,魏云潇,等.我国食品中黄曲霉毒素污染现状的研究[J].安徽农业科学,2015,43(18):308.

[6]林晓华,丛黎达.广州市超级市场散装直接入口食品卫生状况调查分析[J].中国公共卫生管理,2003,19(2):163-165.

[7]吕 金 标,林 平.黄 岩 区1998～2005年食饮具监测结果分析[J].中国卫生监督,2006,13(3):201-204.