安徽省休宁县一起人感H7N9流感后家禽流行病调查及分析

（休宁县动物疫病预防与控制中心，安徽休宁 245400）

禽流感病毒属于正黏病毒科流感病毒属，是一种气球样有包膜的单股负链RNA病毒，可分为16个H亚型和9个N亚型，H7N9流感病毒感染家禽后，无明显临床症状，此次休宁县发生的人感H7N9流感病例，县畜牧兽医部门联合卫生计生部门开展了流行病学调查，经实验室诊断，随后采取扑杀措施，把出现第二例人感病例的风险降到最低。通过分析这起人感H7N9流感病例，对重大动物疫病防控，特别是H7N9流感防控具有意义。

1 流调及采样

2017年1月14日 晚20点，县卫计委通报，县人民医院有一名初步诊断为H7N9流感的患者，据患者反映近期有活禽接触史。15日上午6点，县动物疫病预防与控制中心分4组赴养殖户及活禽批发市场开展流行病学调查和采样。

1.1 流调

1.1.1 基本情况

患者所在村民组共47户，148人，存栏散养家禽1018羽。患者于2016年12月28日和2017年1月4日，分两次从外村鸡贩子处，购买10只黄羽肉鸡，本村民组还有其他3户村民同批购买了17只黄羽肉鸡。截至调查时，除患者家中死亡2只肉鸡外，其他户也死亡2只肉鸡。鸡贩子所贩卖的黄羽肉鸡来自本市一活禽批发市场。

1.1.2 临床症状

未见鸡冠出血或发绀、头部和面部水肿、脚鳞出血等高致病性禽流感临床症状，也未见呼吸急促、咳嗽、喘气、精神沉郁等症状，仅出现黄绿色粪便。据养殖户反映死亡的鸡也没有出现脚鳞出血和鸡冠出血症状。

1.2 样品采集

参考《高致病性禽流感防治技术规范》，分4组采集样品，一组赴外购黄羽肉鸡养殖户家中，共采集23份全血和双腔拭子；二组赴村内其他散养户家中，重点采集患者及同批外购黄羽肉鸡周边的散养户，共采集32份全血和双腔拭子；三组赴村外养鸡大户家中，采集44份全血和双腔拭子；四组赴城区活禽交易市场，采集20份环境样，54份全血和双腔拭子。双腔拭子采集后，放入密闭的塑料袋内（一个采样点的样品，放一个塑料袋），于保温箱中加冰、密封，送市动物疫病预防与控制中心实验室检测。全血经离心后，放入离心管中，编号，冷藏，县动物疫病预防与控制中心检测。

2 实验室检测

2.1 检测试剂

禽流感病毒 H5（Re-6 株）亚型血凝抑制试验抗原（哈尔滨维科生物技术开发公司出品，批号 2015033）；H7亚型血凝抑制试验抗原（哈尔滨维科生物技术开发公司出品，批号2015031）；禽流感病毒H7亚型RT-PCR检测试剂盒（北京世纪元亨动物防疫技术有限公司产品，批号AIVH7 20161216P）。

2.2 检测方法

2.2.1 禽流感病原学检测

按禽流感病毒RT-PCR检测方法（NY/T 772-2013）。从样品中提取病毒 RNA 后，在反转录酶的作用下，以RNA为模板，以引物为起点合成与RNA模板互补的cDNA链，在TaqDNA聚合酶的作用下，经过高温变性、低温退火、中文延伸的循环，使特异DNA片段的拷贝数放大一倍。经过35次循环，最终使扩增DNA片段放大数百万倍。将扩增DNA片段进行电泳，经染色后在紫外灯照射下，可见到DNA片段的扩增带，实现检测AIV-H7亚型核酸的目的。

2.2.2 禽流感抗体检测

按高致病性禽流感诊断技术（GB/T 18936—2003）进行血凝和血凝抑制试验。

2.3 检测结果

2.3.1 血清学检测结果

共检测153份家禽血清，H5抗体合格率96.73%，H7抗体阳性率为16.99%。其中4户外购黄羽肉鸡户所采样品H7抗体阳性率为95.65%；周边散养户所采样品H7抗体阳性率为0%；养殖大户所采样品H7抗体阳性率为4.55%；城区活禽交易市场所采样品H7抗体阳性率为3.7%；外购黄羽肉鸡户所采样品中，H7抗体效价达到9孔以上占34.78%，8孔占17.39%，7孔占17.39%，6孔占13.04%，5孔占8.7%，4孔占4.35%，3孔占4.35%。

2.3.2 病原学检测结果

根据市动物疫病预防与控制中心实验室检测结果显示，共检测32份病原学样品，6份阳性，阳性率为18.75%，外购黄羽肉鸡户所检测样品的阳性率为38.46%，周边散养户及规模养殖户所检样品阳性率为0%。

3 处置

3.1 家禽处置

为防止阳性带毒家禽将H7N9流感病毒传染到本村其他散养家禽或野鸟，参照《高致病性禽流感防治技术规范》，对村内所有家禽进行扑杀，将家禽及其垫料一并深埋无害化处理。

3.2 活禽交易市场处置

城区内两个活禽交易市场休市，清洗活禽交易摊点的禽笼、宰杀设施，指导交易市场管理方对交易摊点每日早晚各用漂白粉消毒一次。

4 讨论

4.1 患者H7N9流感病毒传染源

此H7N9流感患者为一名58岁的男性，发病前16d和9d，妻子分两次外购了10只黄羽肉鸡，存在家禽暴露史，发病前一天还从事未充分发酵的鸡粪铺摊还田，患者自身体质较弱。从患者外购的黄羽肉鸡双腔拭子中检测出H7N9流感病毒，且血清学实验显示患者外购的黄羽肉鸡H7抗体效价全部为阳性（效价达到9孔的占50%）。提示该患者的传染源很有可能是外购黄羽肉鸡及其分泌排泄物。由于H7N9流感当前在我国养禽场的具体流行情况尚未明确[1]，所以黄羽肉鸡的H7N9流感病毒来源有可能来自本市这家农产品批发市场，可能来自鸡贩子贩卖途中经过区域，也有可能为当地野鸟。由于患者及其家属从未前往城区活禽交易市场，所以可以排除本地活禽交易市场暴露传染。

4.2 处置措施

为避免再次出现人感H7N9病例，根据市、县实验室检测结果，迅速采取扑杀无害化处理措施、消毒灭源措施和定期采样监测措施。在当地人民政府、畜牧兽医局工作人员和村级防疫员的共同努力下，完成H7N9人感流感应急处置工作。

4.3 活禽批发市场监管

此次被感染的活禽均来自活禽批发市场，批发市场销售的活禽来自外省，作为市场监管应在活禽进场前，快速检测该批次家禽是否携带H7N9流感病原。在农业部2017年4月出台2516号公告后，市场监管方应向活禽批发商贩索取活禽H7N9流感抗体检测报告。并严格执行“1110制度”。

4.4 实验室诊断重要性

此次人感H7N9流感病例出现后，市县兽医实验室迅速开展病原学和血清学检测，通过实验室诊断，为采取措施提供科学依据，充分体现出市县兽医实验室诊断的重要性。

4.5 强制免疫必要性

自2017年9月起，农业部要求在家禽中开展H5H7二价苗强制免疫，经过强制免疫后，我国人感H7N9流感病毒大幅下降，据统计2016年10月1日至2017年第15周全国共610人感染，2017年10月1日至2018年4月16日，全国只有4人感染。

[1]刘沛增，庄青叶.我国 9 省份 H7N9 亚型禽流感和传染性支气管炎病原流行病学调查[J].畜牧与兽医，2014，46（7）：101-105.