超高效液相色谱-串联质谱法检测市场中不同种类鸡胸肉中的青霉素及其代谢产物

□ 史玉琴 张家口市宣化区食品和市场监督管理局

市场上以肌肉博士、4度°、肌肉小王子、泰森鸡胸肉等鸡胸肉销量最为可观，宣传口号都是以高蛋白、低脂肪为主，真空包装，且有不同的口味供大众选择，可加热，也可直接食用。因此，采用超高效液相色谱-串连质谱法，检测出现在市场上不同种类的鸡胸肉中的青霉素及其代谢产物的成分。

1 研究背景

青霉素属于β-内酰胺类抗生素，被应用在人体和动物的呼吸道感染以及胃肠道的疾病治疗中，如果用药不规范容易导致药在动物组织中残留。在食品中残留的青霉素及其代谢产物容易对人体存在潜在的危害，也发生过相关的食用青霉素残留食品产生的食物中毒的相关报道。在欧盟的相关标准中规定，鸡胸肉中存在的青霉素残留含量控制在50 µg/kg，阿莫西林代谢产物也同样如此，不能超过规定的标准范围[1]。市场中出现的鸡胸肉种类繁多，基于此，对市场上不同种类的鸡胸肉中的青霉素及其代谢产物进行检测非常有必要。

2 研究方法

2.1 实验对象与实验仪器

针对市场中出现的肌肉博士、4度°、肌肉小王子、泰森鸡胸肉等进行青霉素及其代谢产物的检测。采用超高效液相色谱-串连质谱设备，相关的配置设备有电喷雾离子源、超声波清洗仪以及水相滤膜等，采用乙腈、阿莫西林、青霉素等，用50∶50的方法配制成1 000 mg/L的储备液，并将其保存在5 ℃的冰箱中。

2.2 超高效液相色谱-串连质谱的条件与参数

采 用 T3色 谱 柱（100 mm×2.1 mm），乙腈与0.15%的甲酸-5 mmol/L乙 酸 铵（pH=2.8），pH值为2.8。洗脱的程序：0～6 min在2%～70%， 流 速 为 0.25 mL/min，室内温度为20 ℃，色谱柱的温度为30 ℃，进样为 10 µL。用正离子进行扫描，毛细管与射频透镜的电压为3.5 kV和0.5 V，电喷雾离子源的温度与脱溶剂的温度分别为110 ℃和350℃，光电倍增器的电压为650 V，碰撞气压为0.27 Pa，其他参数见表1。

表1 质谱参数

2.3 不同种类的鸡胸肉样品处理

对肌肉博士、4度°、肌肉小王子、泰森鸡胸肉分别均匀取出5 g的鸡胸肉样品，对其进行检测，将5 g的鸡胸肉样品放在离心试管中，然后在试管中加入青霉素G，要达到50 µg/kg的标准；1 min之后再加入3 mL的水，反应3 min之后加入20 mL的乙腈，使用匀浆机进行反应，1 min后以5 000 r/min的离心10 min，时间完成后取出10 mL的上层清液放到瓶中，在40℃的温度中进行蒸干，然后加入2 mL的乙酸铵溶解残余物，加入5 mL的正己烷加工1 min，然后将其转导离心管中，以6 000 r/min的速度反应5 min，然后再使用正己烷进行去脂，最后以12 000 r/min反应10 min，等待检测。

3 实验结果

3.1 串连质谱优化

在离子化的模式下选择电离方式进行扫描，分析青霉素在离子源的电离扫描方式下能够获得丰厚的母离子，确定后母离子后使用子离子的方式进行二次质谱分析，对其进行优化，确定定量离子。通过优化毛细管电压、锥孔电压、碰撞能量等质谱参数能够分析出准分子离子的强度。

3.2 液相色谱优化

采用T3色谱柱作为实验，分析了甲醇、乙腈与水的分离效果，两者虽然对化合物的分离影响没有较大差别，但是乙腈与水的效果要明显优于甲醇与水的效果，因此采用乙腈与水作为本次实验的流动相。检测发现，四种鸡胸肉品牌中，都存在青霉素药物及其代谢物，在溶解后以离子的状态存在，为了增强青霉素在色谱柱上的峰值，会在流动相中加入酸性物质，提高流动相的灵敏度与分离效果。实验表明，甲酸浓度对流动相的灵敏度没有较大的影响，而乙腈对流动相的影响较大。

4 结语

采用超高效液相色谱-串连质谱的方法对市场中不同种类的鸡胸肉中的青霉素及其代谢产物进行检测，有较高的灵敏性，检测效果良好，重复性能较好，含量均低于限量标准，能够为生物组织样品中的青霉素类药物代谢研究提供更高的分析基础。