微滤膜分离技术在微生物计数检测中的应用效果

翁卫红

（简阳市疾病预防控制中心，四川 成都 641400）

微滤膜分离是指以静压差作为动力，通过微滤膜筛分作用对物质进行分离的过程[1]。采用微滤膜分离技术能够去除气相或液相物质中的胶体、细菌及固体，从而可实现对混合物的净化[2]。近年来，随着微滤膜制造技术的不断发展，微滤膜分离技术在微生物计数检测中得到了广泛的应用。为了进一步分析微滤膜分离技术在微生物计数检测中的应用效果，笔者对简阳市疾病预防控制中心接收的114份阳性微生物待检样本进行了以下研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料

从2016年4月至2017年6月期间简阳市疾病预防控制中心接收的微生物待检样本中随机选取114份阳性微生物待检样本作为研究对象。待检项目主要包括：1）需对样本中细菌的总数进行计数。2）需对66份样本中的霉菌及酵母菌进行计数。3）需对104份样本中的大肠杆菌进行计数。将这些样本平均分为观察组和对照组。两组样本的一般资料相比，P＞0.05，具有可比性。

1.2 方法

采用微滤膜分离技术对观察组样本进行微生物计数检测。检测方法是：1）采用微滤膜过滤衬垫培养法对样本中的细菌进行培养。以微滤膜作为载体，使用显微镜放大计数系统对样本中细菌的总数进行计数。2）截留并预浓缩样本中的霉菌和酵母菌，然后使用选择性培养基对样本中的霉菌和酵母菌进行培养和计数。3）使用微滤膜对样本进行过滤，然后对样本中的大肠杆菌进行快速培养（培养的时间为7 h）和计数。采用平板培养技术对对照组样本进行微生物计数检测。检测方法是：将样本加入到琼脂培养基中。在37℃的恒温条件下，对样本进行为期1～2天的培养，然后在显微镜下对样本中的霉菌、酵母菌、大肠杆菌及细菌的总数进行计数。

1.3 观察指标

比较对两组样本进行微生物计数检测的敏感度、检出率、得出检测报告的时间及检测过程中样本污染的发生率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0统计软件对本研究所得数据进行分析处理。计量资料用（x±s）表示，采用t检验，计数资料用%表示，采用χ²检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对两组样本进行微生物计数检测敏感度的对比

对观察组样本进行微生物计数检测的敏感度为98.37%，对对照组样本进行微生物计数检测的敏感度为85.93%。对观察组样本进行微生物计数检测的敏感度高于对对照组样本进行微生物计数检测的敏感度，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

2.2 对两组样本进行微生物计数检测检出率的对比

对观察组样本进行微生物计数检测的检出率为98.25%，对对照组样本进行微生物计数检测的检出率为87.72%。对观察组样本进行微生物计数检测的检出率高于对对照组样本进行微生物计数检测的检出率，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

2.3 对两组样本进行微生物计数检测得出检测报告时间的对比

对观察组样本进行微生物计数检测得出检测报告的时间平均为（5.07±1.13）h，对对照组样本进行微生物计数检测得出检测报告的时间平均为（31.74±5.38）h。对观察组样本进行微生物计数检测得出检测报告的时间短于对对照组样本进行微生物计数检测得出检测报告的时间，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

2.4 对两组样本进行微生物计数检测过程中样本污染发生率的对比

对观察组样本进行微生物计数检测的过程中样本污染的发生率为0.00%，对对照组样本进行微生物计数检测的过程中样本污染的发生率为7.02%。对观察组样本进行微生物计数检测的过程中样本污染的发生率低于对对照组样本进行微生物计数检测的过程中样本污染的发生率，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 对两组样本进行微生物计数检测结果的对比

3 讨论

微滤膜是一种薄厚均匀（厚度为90～150 µm）的多孔薄膜。该薄膜可过滤物质粒径的范围为0.025～10 µm[3-4]。在使用其对物质进行分离的过程中，应保持0.1～0.2 MPa的静压差[5-7]。近年来，随着微滤膜制造技术的不断发展，微滤膜分离技术在微生物计数检测中得到了广泛的应用。相关的研究结果显示，采用微滤膜过滤技术检测细菌菌落具有操作简单、准确率高等优点。本研究的结果显示，对观察组样本进行微生物计数检测的敏感度和检出率均高于对对照组样本进行微生物计数检测的敏感度和检出率。对观察组样本进行微生物计数检测得出检测报告的时间短于对对照组样本进行微生物计数检测得出检测报告的时间。对观察组样本进行微生物计数检测的过程中样本污染的发生率低于对对照组样本进行微生物计数检测的过程中样本污染的发生率。

综上所述，微滤膜分离技术在微生物计数检测中的应用效果显著。此法值得在临床上推广应用。

参考文献

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[2] 高欣玉,纵瑞强,王平,等.xDLVO理论解析微滤膜海藻酸钠污染中pH值影响机制[J].中国环境科学,2014(4):958-965.

[3] 李伟,刘玉灿,段晋明,等.微滤膜吸附效应对液相色谱-三重四极杆质谱直接进样检测水样中农药残留的影响[J].分析化学,2015(11):1761-1765.

[4] 杨小敏.凹土微滤膜在纤维素酶发酵液澄清中的应用研究[D].银川市:宁夏大学,2016.

[5] 喻林萍,刘新利,张惠斌,等.金属及金属合金微滤膜的研究进展[J].粉末冶金材料科学与工程,2015,20(5):670-674.

[6] 詹巍.基于原子层沉积微滤膜表面光催化改性及膜污染特性研究[D].哈尔滨市:哈尔滨工业大学,2016.

[7] 赵应许,纵瑞强,高欣玉,等.XDLVO理论解析不同离子条件下海藻酸钠微滤膜污染[J].环境科学,2014,35(4):1343-1350.