病毒血清学及DNA联合检测用于婴幼儿传染性单核细胞增多症的分析

徐勇军

传染性单核细胞增多症，即IM，因EB病毒感染引发的传染性疾病，以儿童为高发人群，临床表现复杂多变，以体温过高、咽峡炎、肝脾肿大、淋巴结增多等为典型临床表现，任意季节均可发病，而且多伴发脏器损伤，导致临床表现比较担忧，早期诊断难度较大，漏诊及误诊风险非常高，这就导致IIM病情进展迅速，若未能及时接受抗病毒等有效治疗，很容易发生死亡，重症IM患者死亡数量甚至高达九成[1-2]。本次研究选择2014年1月～2016年12月于本院接受治疗的单核细胞增多症患儿80例，均在清晨空腹状态下抽取静脉血样本，分别经ELISA法+EBV抗体，及PCR定量+外周核细胞EBV-DNA方案进行检测，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 本次研究选择2014年1月～2016年12月于本院接受治疗的单核细胞增多症患儿80例，男51例，女29例，年龄6个月～10岁，平均（5.10±1.46）岁。其中＜1岁19例，1岁组20例，2～3岁20例，≥4岁21例；春夏季发病39例，秋冬季发病41例。

纳入标准：①临床资料完整；②入院后完善相关检查，明确单核细胞增多症诊断；③能够耐受本次研究，中途未脱出；④所有患儿、家属、法定监护人或法定代理人均对本次研究内容知情，自愿参与，并同医院签订知情同意书。排除标准：①临床资料不完整，哭闹不止不肯配合，无法完成本次研究者；②肿瘤患者，心肝肾等重要脏器严重疾病，波及全身的重度感染；③凝血障碍、白血病等血液系统疾病；④其他不适合参加本次研究者。

1.2 方法 所有患儿均在清晨空腹状态下抽取静脉血样本，分别经ELISA法+EBV抗体，及PCR定量+外周核细胞EBVDNA方案进行检测，分析检测结果。其中检测抗体是指VCAIgM/G,EA-IgG以及EBNA-IgG；EB病毒检测仪器，并使用配套试剂，EB病毒DNA使用仪器是进口ABI7500，以及深圳达安基因的相应试剂；急性期是指患病21 d以内，恢复期是指患病后4～8周时间内，随访期是指超过24周时间均可。本次研究中设置阴性对照，同时将检测后低于10×103拷贝者设为检验结果阴性[3-4]。

1.3 统计学方法 采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析，计数资料以例数表示，采用χ2检验；计量资料采用“x±s”表示，采用t检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 检测所有患儿VCA-IgM结果 所有患儿均在体温升高21 d内开始检测，其中＜1岁组19例，1岁组20例，2～3岁组20例，≥4岁组21例，阳性率分别为31.58%、40.00%、60.00%、80.95%；表明随着年龄的不断升高，VCA-IgM阳性率随之不断上升；比较不同年龄段上下阳性率，统计学分析结果：①＜1岁VS≥1岁，阳性率比较（χ2=4.927 2，P=0.026 4）；②＜2岁VS≥2岁，阳性率比较（χ2=9.756 2，P=0.001 8）；③＜4岁VS≥4岁，阳性率比较（χ2=8.475 8，P=0.003 6）。≥8周，所有患儿复检VCA-IgM结果均为（-），见表1。

表1 所有患儿初次检测VCA-IgM/G（+）、EBV-DNA（+）结果[n（%）]Table 1 The results of VCA-IGM/G(+)and EBV-DNA(+)were first detected in allchildren[n(%)]

2.2 检测所有患儿EBV-DNA结果 ＜1岁小儿检验EBV抗体结果均为（-），均需二次检测，EBV-DNA载量（+）%为68.42%（13/19），病变早期测定VCA-IgM结果均为（-），见表2、表3。

表2 不同时间段内检测各年龄组患儿的EA-IgG（+），以及EBNA-IgG（+）结果Table 2 The EA-IgG(+)and EBNA-IGG(+)results forchildren with various age groups were tested fordifferenttime period

表3 检测急性期所有患儿VCA-IgM，以及EBV-DNA检测结果Table 3 Testresults of VCA-IGMand EBV-DNAin allchildren with acute phase

3 讨论

传染性单核细胞增多症，即IM，是指因EB病毒感染后发生的以体温升高，淋巴结/肝脾肿大，咽峡炎，多发性皮肤黏膜皮疹为主要临床表现的一种传染性疾病，多见于小儿，尤其是学龄前儿童，以唾液及输血作为主要感染途径[5-6]。EB感染人体后，多在口咽内繁殖，经不断裂解、侵袭邻近组织细胞等致使毒素被释放入血，引发病毒血症，感染淋巴细胞，沿淋巴系统在体内传播EBV，不断增加感染病灶，进而产生相应的临床症状。据文献报道，IM患者死亡率为1%～2%，但重症IM死亡率最高可超过90%，致死原因主要为呼吸系统神经麻痹导致呼吸衰竭后死亡，而脾破裂或心肌炎等原因导致IM患者死亡发生风险较低，严重威胁儿童健康。而IM好发于儿童提示IM患者年龄与发病率有一定的关联[7]。

IM初期多无典型症状，病情复杂多变，容易出现误诊，因此需尽早检测，明确诊断。而在EB病毒感染过程中，依次产生IgM/G抗原，而在急性期/恢复期的晚期，经检测可发现IgG抗核抗原生成，而且患儿终身均检测抗VCA-IgG（+），以及抗EBNV-IgG（+），这为临床确诊IM提供具有一定可靠性的依据。本次研究结果显示，单核细胞增多症急性期，＜1岁、≥4岁小儿VCA-IgM（+）率分别为31.58%（6/19）、80.95%（17/21）；＜1岁小儿检验EBV抗体结果均为（-），均需二次检测，EBV-DNA载量（+）%为68.42%；表明随着年龄的不断升高，VCA-IgM阳性率随之不断上升。但需要注意的是，在EBV携带者淋巴细胞中，EBV-DNA载量通常维持较低水平。据医学研究发现，检测CAEBV患者血液中的EBV-DNA载量，结果发现其载量多少，与患者病情实际情况、预后关系密切[8]。

总之，IM急性期，仅经由血清学检查完成IM的诊断无法令人满意，建议联合EBV-DNA检测，有助于提高IM患儿检出率，判断治疗效果及预后。

参考文献

[1] 杨辅直,李伟生,张倩,等.小儿EB病毒感染的临床治疗分析[J].中华医院感染学杂志,2016,26(24)：5707-5709.

[2] 吴丽云.小儿传染性单核细胞增多症临床特点研究[J].中国现代药物应用,2017,11(2)：43-45.

[3] 邓坤仪,彭建明,范汉恭,等.三种实验室检测方法在儿童传染性单核细胞增多症的诊断应用[J].分子诊断与治疗杂志,2016,8(1)：37-41,72.

[4] 陶佳,陈福雄,陈德辉,等.儿童EB病毒感染及传染性单核细胞增多症临床特点及实验室检查分析[J].中国实用儿科杂志,2013,28(3)：200-203.

[5] 郭娟娟.传染性单核细胞增多症患儿EB病毒载量与T细胞亚群的相关性分析[D].太原：山西医科大学,2012.

[6] 朱芹,郭平,黄雅娟,等.EB病毒血清学联合DNA定量检测在诊断婴儿传染性单核细胞增多症中的意义[J].中国现代医生,2014,52(11)：56-58.

[7] 胡小林,汪欣.小儿传染性单核细胞增多症50例临床分析[J].当代医学,2011,17(15)：101-102.

[8] 杨琴,周太光.311例儿童传染性单核细胞增多症临床分析[J].西南军医,2017,19(2)：119-121.