血涂片法复核在血小板计数减少的应用价值

杨良，杨斌

(铜仁市人民医院检验科，贵州 铜仁 554300)

血细胞分析仪计数血小板，是各实验室常用和必不可少的快速检测方法，作为血常规检查项目之一的血小板计数，其检查结果的准确性越来越受临床医生和患者关注。目前所有计数血小板的方法对于血小板减少的标本，都存在不少缺陷，影响因素也较多，其准确性都比较差，血细胞分析仪需虽可以用低值血小板计数模式计数，对低值血小板计数来说，这种计数模式计数的结果准确性是否可靠值得探讨[1]。特别对极低血小板来说，血涂片法其价值更大[2]，本文采用血涂片间接计数血小板的方法，探讨血涂片法计数血小板减少的复核作用[3]。

1 材料与方法

1材料

1.1 标本采集 收集2016年10月至2017年4月在本院住院及门诊病人标本，共147例，本次实验血小板低组（50～100）×109/L 组 60例；血小板较低组 （20～50）×109/L 52 例； 血小板极低组＜20×109/L 35例；以同期血液分析仪所作质控结果为标准，所有标本均为EDTA-K2抗凝静脉血。

1.2 仪器 Sysmex-XN1000血液分析仪、奥林巴斯显微镜、血细胞计数板。

1.3 试剂 Sysmex-XN1000血液分析仪及其配套试剂，瑞吉氏染液、10ɡ/L草酸铵稀释液。

2 方法

2.1 血液分析仪法 Sysmex XN1000全自动血液分析仪检测血小板，血液中的血细胞成分通过检测通道时产生脉冲信号，根据白细胞、红细胞和血小板的脉冲信号强弱归类收集，计数2～20fl的脉冲信号数值为血小板数值。每日进行高中低3个水平质控且在控。所有标本采集后于1h内完成检测。

2.2 手工法计数 显微镜手工血小板计数，利用草酸铵稀释液，按《全国临床检验操作规程》第4版操作。

2.3 血涂片法 取抗凝血10μl涂片，经瑞氏染色后计数血涂片中的血小板数。在油镜下选择血涂片上细胞分布均匀且细胞间无重叠的区域，在计数1000个红细胞的同时计数血小板数，求得血小板与红细胞比值，将此比值乘以同一份标本经血细胞分析仪测定所得的红细胞数，得到该血涂片法计数的血小板数。

2.4 统计 实验数据采用SPSS软件配对t检验比较及和P值判断。

2 结果

见表1。

表1 47例血小板计数减少3种计数方法的比较（x±s）

3 讨论

血细胞分析仪计数血小板，是各实验室常用和必不可少的快速检测方法，作为目前临床常用的自动化血液分析仪，其检测标本的数量及速度是手工法所无法比拟的[4]。虽然血细胞分析仪具有速度快和批量大的优点，但也有血涂片法不可替代的，尤其在近年来对血涂片的复核要求更为突出。国际血液学组织提出了显微镜复检的41条建议性标准，得到中国血液检验学界的密切关注，同时也是很多实验室作为血涂片复核的参考标准。

目前所有的血小板计数方法，都存在不少缺陷，尤其对低值血小板计数来说，体现得更为重要。血液分析仪对血小板计数减少，尤其是极低值血小板标本，不能很好地反映血小板的实际数量，此时往往需要依靠显微镜血涂片观察辅助诊断血小板减少症。文献报道血涂片法血小板计数与血细胞分析仪计数结果差别不大，国内也有相关文献报道[5]，认为仪器法对检测血小板低值标本的准确性较差，应以血小板手工计数法复检，以保证可靠性[6]。本次实验采用血涂片方法来计数血小板数量，经在显微镜下仔细辨认与识别血小板的形态与大小，从而进行间接计数。我们对147例血小板减少标本进行计数，血小板低组和较低组，血涂片法分别与血液分析仪法及手工法比较，P值均＞0.05。血小板极低组，血涂片法分别与血液分析仪法及手工法比较，P值＜0.01，差异有统计学意义，与文献报道基本吻合[7]；血涂片法计数血小板，不仅可以对血液分析仪计数进行复核，还可以观察血小板形态及大小，区别和判断所谓“非血小板颗粒”对计数的影响。血涂片镜检的另一优点是可直观地观察到巨大血小板、纤维蛋白丝、血小板假性聚集等，进而采取其它方法及时校正血小板计数，得到真实的血小板结果[8]。这些情况仅通过仪器重新复做血小板是无法解决的。此外，对血小板减低的标本进行血涂片血小板计数，可在一定程度减少标本的复做频率，降低检验成本，提高了准确率。

采用血涂片可以直观地间接计数血小板，对血液分析仪结果进行复核，这对血小板减少者来说尤为重要[9]。对于血小板减少症以及需要输注血小板的患者来说，输注血小板的疗效评价，主要是观察临床症状是否得到改善，输入的血小板进入患者循环血液后，血小板计数在短期内可能会升高明显，但可能很快游离到出血部位参与止血而被消耗，因此，计数输注血小板后的血小板数量有十分重要的临床意义。同时血涂片法还具有很好的保存性，当血小板数量正常，而形态不正常时，有利于辨认血小板形态，同时更加有助于临床疾病的诊断治疗。总之，血涂片计数血小板可以用于对血液分析仪的复核[10]，是值得推广应用、快速、简便之方法，具有较高的临床应用价值。

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[7]苏丽莎.血涂片在血细胞计数血小板异常结果中的作用[J].实用医技杂志，2015，1（22）：55-56.

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[10]黎红.血涂片法对血液分析仪的血小板计数复核作用[J].基层医学论坛，2011，35（3）：1145-1146.