关于细菌培养法和PCR检测法在淋病奈瑟菌检测中的效果

陆 波

（辽宁省铁岭市中心医院检验科，辽宁 铁岭112000）

淋病是临床治疗中一种常见性传播疾病，淋病奈瑟菌（NG）也可称为淋球菌，其为淋病的一种病原体，可导致生殖道发生感染，引发淋菌性宫颈炎、淋菌性尿道炎等，逆行感染还可引发前列腺炎、膀胱炎等，可导致患者不孕不育[1]。目前，临床上应用于NG检测的方法表现出多样化，当各种方法应用效果存在差异性，探讨NG有效检测方式具有重要临床意义。本次研究主要对比分析PCR检测法、细菌培养法在NG检测中的应用效果，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：随机选取88例于2015年2月至2016年5月期间在我院接受诊治的疑似淋病患者作为对象。患者性别：男性为49例，女性为39例；年龄：最小为22岁，最大为60岁，平均（28.7±2.7）岁。

1.2 方法：①生殖道分泌物采集：患者为男性时，使用棉拭子放置于患者尿道1～3 cm位置，轻轻将棉拭子转几周，将生殖道分泌物或者前列腺液蘸取，然后取出棉拭子，放入无菌试管内，立即将试管送至检验科进行NG检测。患者为女性时，使用棉拭子收集患者宫颈黏液和阴道分泌物，将棉拭子放入无菌试管中后立即送至检验科进行NG检测。②NG检测：应用细菌培养法实施NG检测时，标本以及标准对照菌株接种至温度为37 ℃孵箱中的T-M培养基上实施菌株培养、培养时间为24～48 h，然后对细菌的生长情况进行观察。培养完成之后使用半自动细菌鉴定仪对标本菌株实施鉴定。鉴定方法及操作均严格按照说明进行，可疑的菌落需实施生化鉴定。应用PCR检测法实施NG检测时，所选用的实验试剂为潮州凯普生物化学有限公司提供的pcr+膜杂交法，相关操作均严格按照试剂说明书实施。利用聚合酶链反应对采集到的标本中的少量DNA片段实施扩增操作，完成扩增，得到获得较长DNA片段之后，应用凝胶电泳法实施检测，对色带的变化情况进行仔细观察，对检测所得结果进行判定。检测过程中，工作人员严格按照PCR检测法具体操作要求实施病菌检测。

1.3 观察内容及效果评价：计算患者NG的阳性检出率，并通过对比检出率对不同检测方式的应用效果进行评价。

1.4 统计学方法：研究数据的统计学分析均使用SPSS20.0统计软件包进行。计数资料以百分率表示，行χ2检验，计量资料以（±s）表示，行t检验。差异对比有统计学意义均以P＜0.05表示。

2 结 果

88例患者接受细菌培养法对淋病奈瑟菌进行检测后，有39例患者的检测结果表现为阳性。接受PCR检测法对淋病奈瑟菌进行检测后，共有67例检测结果呈阳性。在阳性检出率比较上，PCR检测法明显高于细菌培养法，差异对比存在显著性（P＜0.05），见表1。

表1 2种检测方法阳性检出情况

3 讨 论

淋病为一种常见性传播疾病，对患者身心健康均造成严重影响。淋病奈瑟菌为淋病的病原体。淋病奈瑟菌通常均是寄存在患者生殖及泌尿系统中[2]。在机体免疫力处于较差状态时，病菌便会直接侵入患者血流，在经过血液循环使得循环机体部位出现化脓性炎症。在全球范围内，淋病均为一种流行极为广泛的性病，表现出极强的传染性，其临床主要表现为发病急促。目前，在淋病的临床诊断过程中主要选用实验室检查方法进行诊断鉴别。诸多医疗机构在婚检、淋病初诊过程中均应用分泌物直接涂片方式进行诊断[3]。但是该种方法误诊、漏诊率较高，阳性检出率相对降低。因此，须加强对淋病奈瑟菌有效检测方法进行深入研究，为淋病早期诊断准确率的提高提供更多可靠参考依据。

细菌培养法为临床菌落检测过程中应用较为普遍的一种方法，其也是世界卫生组织推荐使用的检测淋病奈瑟菌的一种标准检测法。但是诸多应用结果均表明，该种方法在检测淋病奈瑟菌的实际应用过出中还存在一定局限性，应用细菌培养法实施检测时，检测结果极易受到多种因素影响，阳性检出率相对较低。影响检测结果的因素主要为菌株存活环境、检测者的操作技术、检测操作时间、所用试剂质量、患者在接受检测前使用过抗生素等。因此，细菌培养法应用于淋病奈瑟菌检测时，存在诸多限制。

PCR检测法又可称为聚合酶链反应检测法，其为通过体外酶合成特异性DNA片段的方式来实现对目的DNA片段进行检测的一种方法。诸多实际应用结果显示，在淋病奈瑟菌检测中应用PCR检测法具有针对性强、灵敏度高、特异性强、操作简单、检测快捷等特点[4]。该种检测方法与细菌培养法相互比较，其对检测采集过程、保存环境的要求相对较低，同时，在细菌已死亡的情况下也能够进行有效检测。此外，以为该种检测方法在实际应用过程中，其是在菌株基因级别上实施检测的，因此，其能够有效克服检测标本过少问题。在本次研究中，分别应用PCR检测法和细菌培养法对88份标本进行检测后，检测结果显示，PCR检测法的阳性检出率明显高于细菌培养法，差异对比存在显著性，有统计学意义。谢国勇[5]等研究结果显示，于其他检测方法比较，将PCR检测法应用于淋病奈瑟菌检测具有更强的特异性，灵敏度更高，可有效降低漏诊率，对临床诊断准确率的提高具有重要意义。有研究者认为，当淋病患者处于急性期时，其脓性的分泌物会明显增多，症状表现得更为明显。在这种情况下，应该先实施Gram染色，且在2 h之内将结果汇报给临床。若是能够找到NG，而且其数量较多时，应该同时实施细菌分离试验、药敏试验，在24 h内读取药敏结果，在使用系统实施细菌鉴定。通过这样的方式能够有效提高早期诊断准确率，使患者能够尽早接受针对性治疗，减少患者治疗费用，降低患者经济负担。综上所述，细菌培养法、PCR检测法均为检测的淋病奈瑟菌的有效方式，但PCR检测法的阳性检出率更高，特异性更强，应用效果更为显著。

[1] 赵灿.细菌培养法联合检测流行性脑膜炎奈瑟氏菌的临床研究[J].系统医学,2016,1(1):397-398.

[2] 马萍,聂庆东,殷敏.3种方法检测淋病奈瑟菌的比较分析及意义[J].中国医药科学,2012,2(9):508-509.

[3] 赵晓兰,冯琳.四种方法检测淋病奈瑟球菌的临床应用对比研究[J].中国性科学,2015,24(7):301-302.

[4] 邓鹏程,邝满元,王岐本,等.环介导等温扩增法与临床常规方法检测淋球菌效果比较[J].现代医药卫生,2015,30(7):375-376.

[5] 谢国勇,余进胜.淋病奈瑟氏菌3种检测方法的结果对照思路[J].当代医学,2014,20(17):114-115.