河南地区禽白血病病原学和血清学调查*
2018-04-16王华俊闫若潜赵雪丽班付国谢彩华马震原王淑娟
王华俊,闫若潜,赵雪丽,班付国,谢彩华,马震原,王淑娟
(河南省动物疫病预防控制中心 郑州 450008)
禽白血病(Avian Leucosis,AL)是由反转录病毒科甲型反转录病毒属禽反转录病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病。临床上多以禽器官组织出现良性和恶性肿瘤、免疫抑制、生长迟缓等为主要特征。根据不同划分标准将禽白血病病毒(ALV)分为A~J 共计10 个亚群,其中从鸡群中分离的有6 个亚群,分别是A、B、C、D、E、J 亚群,除E 亚群为内源性病毒外,其它亚型均为外源性病毒。核衣壳蛋白p27 是禽白血病病毒亚群所共同拥有的,且高度保守。禽白血病病毒(ALV)可引起不同的肿瘤性疾病,包括淋巴细胞性白血病、成髓细胞性白血病、成红细胞性白血病等。ALV 既能水平传播,也能垂直传播,不仅导致鸡群病死率上升、免疫抑制、生产性能降低,而且严重影响食品安全和对外贸易。该病在世界各国有不同程度流行,近年来,随着禽白血病在我国流行,该病已成为严重威胁国内养禽业的传染病之一。在我国动物防疫法的动物疫病分类中,将其列为二类动物疫病,也是《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020)》要求优先净化的疫病。
目前,国内外对该病尚无有效的防治措施,主要是通过淘汰阳性鸡的净化方法来控制该病的流行。监测是禽白血病净化的重要手段,及时淘汰阳性鸡,切断传染源。其中检测方法主要依靠禽白血病病毒J 亚型(ALV-J)、AB 亚群抗体(ALV-AB)ELISA 检测试剂盒和P27 抗原ELISA 检测试剂盒,因ELISA 检测试剂盒快速、敏感、特异性强的特点而得以在ALV 检测中被推广应用。本次调查检测从河南省不同鸡场、不同品种(系)的鸡群中采集不同代次的血清样品和蛋清样品,分析其ALV 感染J 亚型、AB 亚群不同阳性率,对河南省禽白血病感染进行初步调查,为河南省禽白血病的净化工作提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 样本的采集
2016 年6 月—2018 年2 月,从豫东、豫西、豫南、豫北和豫中地区的不同鸡场、不同品种(系)的产蛋鸡群中采集不同代次的血清样品360 份和蛋清样品300 份(其中2 个场无蛋清),蛋清样本来自采集血清样品同一栋鸡舍,被调查鸡群为125~355 日龄。
1.2 试验方法
本次调查将河南省划分为5 个区域:豫中、豫南、豫北、豫东和豫西。采用ELISA 法检测采集的360 份血清样品的禽白血病病毒J亚型、AB 亚群血清抗体和300 份蛋清中的P27 抗原。禽白血病病毒J 亚型、AB 亚群抗体检测试剂盒和P27 抗原检测试剂盒均购自北京爱德士(IDEXX)元亨生物科技有限公司,严格按照试剂盒说明书进行操作。
2 结果
2.1 不同地区不同鸡场ALV-J、ALV-AB抗体检测和P27抗原检测
ALV-J 和ALV-AB 血 清 抗 体的平均个体阳性率分别为14.72%(53/360)和7.22%(26/360),P27 抗原的平均个体阳性率为15.00%(45/300);在不同鸡场中,ALV-J、ALV-AB 血清抗体和P27 抗原的最高个体阳性率分别为33.33%、26.67% 和40%,最低的均为0。
不同区域的ALV-J、ALVAB 抗体阳性率和P27 抗原区域个体阳性率分别为10%~24.17%、3.33%~13.33%和0~24.17%,豫南地区ALV-J 抗体阳性率和P27抗原阳性率最高,均为24.17%,豫东地区ALV-AB 抗体阳性率最高,为13.33%,其中共感染的鸡场3 个,共感染场群阳性率为30%(3/10)(表1)。
2.2 不同品种鸡群ALV-J、ALVAB抗体水平和P27抗原水平
本次调查涉及6 个品种(系)、不同规模的鸡群,通过对不同品种鸡群血清中ALV-J、ALV-AB抗体检测和蛋清中P27 抗原检测发现,ALV-J 抗体个体阳性率为0~33.33%,固始三高1 号个体阳性率最高,为33.33%,三黄鸡次之,为30%;ALV-AB 抗体个体阳性率为0~13.33%,乌骨鸡个体阳性率最高,为13.33%,罗曼次之,为7.5%,三黄鸡和爱拔益加2 个品种(系)为0;P27 抗原个体阳性率为0~40%,固始三高1 号个体阳性率最高,为40%,乌骨鸡次之,为33.33%;6 个品种(系)中仅有爱拔益加ALV-J、ALV-AB 抗体检测和P27 抗原检测均为0(表2)。
2.3 祖代、父母代与商品代鸡群A LV-J、A LV-A B抗体检测和P27抗原检测结果比较
本次调查共抽检了12 个不同代次的鸡群,其中ALV-J、ALVAB 血清抗体和P27 抗原阳性鸡场数分别为9、7 和7 个,被调查场群阳性率分别为75%、58.33%和58.33%;通过对祖代、父母代与商品代鸡群的检测结果比较发现,商品代ALV-J 血清抗体场群阳性率最高,为80%(4/5),平均个体阳性率最低,为12.67%(19/150);祖代场ALV-AB血清抗体场群阳性率最低,为50%(2/4),父母代平均个体阳性率最低2.2%(2/90);祖代和父母代场P27 抗原场群阳性率均为50%(2/4,1/2),商品代为100%(4/4),商品代个体阳性率最低,为13.33%(16/120)(表3)。
3 讨论
通过对河南地区禽白血病初步调查,尤其侧重了对河南地区祖代禽场、父母代场以及地方优良品种(系)禽白血病感染调查,初步了解了河南省不同地区、代次和品种(系)禽白血病的感染情况,调查结果为河南省开展禽白血病净化制定实施方案提供一定的理论依据,推进了河南省禽白血病净化进程。目前,对祖代禽场禽白血病调查报道较少,调查结果也为科研工作提供参考。
本次调查采用禽白血病病毒J亚型、AB 亚群抗体检测试剂盒和P27 抗原检测试剂盒对河南省不同区域、品种和代次鸡场进行检测,结果显示ALV-J 和ALV-AB 抗体场群阳性率达75%和58.33%,平均个体阳性率为14.72% 和7.22%;P27 抗原场群阳性率达58.33%,平均个体阳性率达15%,在抽检的12 个场中,仅有1个场禽白血病感染为阴性,比崔治中等对我国禽白血病感染情况调查检出率还高,这表明河南省鸡场禽白血病感染有上升趋势。
通 过 对12 个 场ALV-J、ALV-AB 抗体和P27 抗原抽检,分析其共感染发现,三者没有线性关系,即ALV-J 抗体高,P27 抗原不一定高。由于P27 抗原检测蛋清、喉头/泄殖腔拭子不代表ALV-J 内源性感染,因此,本次调查采用3 种不同的试剂盒检测抗体和抗原,分析评估鸡群禽白血病共感染状况,同时淘汰阳性鸡,对该病净化有重要临床指导意义。
对不同品种(系)鸡群禽白血病感染情况进行对比分析,结果表明我国一些地方优良品种(系)在选育和养殖中感染禽白血病,且个体阳性率较高,这不仅影响我国地方品种的鸡群免疫力和生产性能,造成鸡群发病率、病死率升高,而且严重影响食品安全、对外贸易和公共卫生安全,为发挥我国地方优良品种优势,有必要开展禽白血病净化工作,同时加强选育抗禽白血病地方品种。
据报道,从同一个禽白血病感染群中不同器官分离毒株的ALV-J基因序列不完全相同,基因变异导致禽白血病防控难度大大增加,对河南省祖代禽场禽白血病调查结果表明,禽白血病感染较为普遍,且地方优良品种(系)感染率较高,这与病毒基因变异和祖代鸡群的感染息息相关。该病主要传播方式是垂直传播,因此对禽白血病的防控必须从源头控制,相关政府部门积极引导祖代鸡场开展净化,加强对外引种管理,才能有效防控禽白血病的发生和流行。
4 结论
本次调查采用商品化ELISA 试剂盒对河南省不同地区、品种(系)和代次的祖代禽场、父母代场、商品代场的血清和蛋清样品进行了ALV-J、ALV-AB 血清抗体和P27抗原的个体阳性率、场群阳性率及共感染数据分析,结果表明不同区域鸡群ALV 感染普遍存在,各个品种(系)感染的亚群及其阳性率各不相同,调查结果为河南省开展禽白血病防控、净化提供一定的理论依据,也为科研工作提供参考。■
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