贵阳市三文鱼转基因成分检测调查

◎ 孙端方，左泽彦，田志强

（贵州省产品质量监督检验院，贵州　贵阳　550016）

当前转基因作物的研发和种植发展迅速，转基因作物产品的利弊之争也是全球热点，而转基因动物却通常只见于新闻媒体刊载的一些实验室先进成果报道、分子生物学科普文章等。在2015年，美国FDA批准AquaBounty Technologies公司的AquAdvantage转基因三文鱼上市；2017年，该公司完成了该三文鱼的首次规模销售，由此标志着转基因动物产品已开始进入市场；截至当前，市售转基因动物产品也仅此三文鱼一种。

本文完稿时，未见我国农业部批准该三文鱼进入国内市场。但目前跨国贸易蓬勃发展、进口商品可谓海量，也常有漏网之鱼悄然在市场销售。为确保消费者的知情权、了解相关产品情况、面向省内开展实践相关检测技术，对市售进口三文鱼食品进行转基因成分检测的抽样调研。

1　材料与方法

1.1　取样、制样

样品均为市场随机抽样，抽样范围为餐饮、散装、包装各10批次，分别编为1～10号样品。样品的取样和前处理按SN/T 1194-2014执行，进行双平行检测。

1.2　DNA提取

DNA提取试剂盒为TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0。样品DNA提取后，用Thermofisher NanoDrop One进行DNA纯度和浓度测定，若1.6＜OD260/280＜1.8则进行后续实验，否则重新进行DNA提取。浓度若低于20 ng/μL，则用Millipore Microcon DNA fast flow (PCR grade)浓缩DNA浓度至20 ng/μL以上，若高于50 ng/μL，用ddH2O稀释至50 ng/μL以下。

1.3　检测方法

荧光PCR所用引物和探针根据AquAdvantage公开序列进行设计，包括内源基因和外源基因各一对。荧光PCR试剂为TaKaRa Premix Ex Taq (Probe qPCR),ROX plus，荧光PCR体系配置及反应参数按上述试剂盒说明书，用荧光PCR仪ABI One step plus检测。

2　结果与分析

餐饮、散装、包装中1号样品的内源和外源基因的荧光信号如图1所示，内源基因20＜Ct值＜30，荧光信号有明显S型曲线；外源基因Ct值≥40，荧光信号无S型曲线；其余样品与上述示例情况相同。阳性对照、阴性对照、空白对照的检测结果均符合要求（图略）。由上可知，未检出含有转基因成分的样品批次。

图1　荧光PCR图谱图

3　讨论

3.1　检出率

本次实验未检出转基因三文鱼批次，表明当前转基因三文鱼及相关产品尚未流入贵阳市场。

3.2　检测方法

随着基因工程在食品研究中的深入运用，转基因食品的市场化将从微生物、植物领域拓展到动物方面。目前，主流PCR检测技术以基因序列为主要检测对象，能够满足未来转基因动物产品的基础定性检测需求，但目前仍有标准方法更新慢、深加工产品难检测等常见问题。