日粮添加发酵银杏叶对1～42 d黄羽肉仔鸡生长性能、血清生化指标和抗氧化性能的影响

朱永毅，李潇蒙，石 强

（1.贵州省黔南民族职业技术学院,贵州都匀 558000；2.贵州省长顺县农村工作局,贵州长顺 550700）

目前，肉鸡集约化生产面临各种疾病、感染、应激和管理压力的挑战，这些都是制约肉鸡产业发展的重要因素。随着中国畜牧业发展和饲料资源短缺，人们对食品安全的重视，国家法规对抗生素滥用的严格限制，急需寻求新的饲料资源或功能性食品添加剂。银杏叶富含黄酮、生物碱、多糖、氨基酸和维生素等物质，具有多种生物学功能，其在中国产量大，分布广，成本低廉，是作为畜禽饲料添加剂选材的很好原料（张莹，2009）。利用发酵法处理中草药是提高其利用价值的有效手段，中草药经微生物发酵处理后，不仅原始生物活性得到保留，同时其活性成分还得到提高（Lin和Chiang，2008）。然而关于发酵银杏叶对优质黄羽肉鸡的研究报道并不多，本试验以发酵银杏叶粉为材料，考察其对1～42 d黄羽肉仔鸡生长性能、血清生化指标及抗氧化性能的影响，为开发家禽新的饲料资源提供思路。

1　材料与方法

1.1试验材料 生物发酵银杏叶粉购自南京林通生物技术有限公司，该产品主要以银杏叶为基质，通过接种复合菌种（谷草芽孢杆菌、酵母菌和黑曲霉）发酵而成。银杏叶和发酵银杏叶粉主要营养指标见表1。

表1　银杏叶与发酵银杏叶主要营养水平 %

1.2试验日粮设计与分组 选取健康、体重一致（46.62±1.35）的1 d雌性岭南黄羽肉仔鸡960只，按单因素完全随机试验设计分为4个组，每组6个重复，每个重复40只。试验日粮参照NRC（1994）肉鸡饲养标准和《中国鸡饲养标准2004》配制，对照组饲喂以玉米-豆粕为主的基础日粮，处理1、处理2和处理3组饲喂在基础日粮中添加0.2%、0.4%和0.8%的发酵银杏叶粉，所加发酵银杏叶粉在日粮中所占比例在该日粮玉米添加量中等量扣除。基础日粮组成及营养水平见表2。

表2　基础日粮组成和营养水平（风干基础）

1.3饲养管理 肉鸡采用分层笼养，1～21 d和22～42 d两阶段饲喂的方法。试验全期鸡只自由采食、饮水，环境条件保持一致，鸡舍第一周温度控制在33～35 ℃，之后每周将温度降低2 ℃，直至温度控制在22 ℃。鸡只免疫按照商品肉鸡常规免疫程序进行。试验期42 d。

1.4测定指标与方法

1.4.1发酵前后银杏叶主要营养指标的测定

粗蛋白质含量的测定按照GB6433-86中的方法进行测定；类黄酮含量的测定参考Verzelloni等（2007）使用的氯化铝比色法；多糖的测定使用苯酚-硫酸法（Dubois，1956）；样品经过6 mol/L HCl 水解后，采用全自动氨基酸分析仪（日立，L-8500，日本）进行测定。

1.4.2生产性能指标 每日清晨观察鸡群的精神、采食、粪便状况和鸡只死淘数，每周按重复记录采食量，分别在22 d和43 d清晨对试验鸡只进行称重，计算1～21 d和22～42 d各重复鸡只末重、平均日采食量、平均日增重、料重比。

1.4.3血清生化指标的测定 试验鸡只在43 d清晨饲喂前（42 d晚供水禁食），各重复随机选取8只鸡，翅下静脉采血，3000 r/min离心15 min制备血清，分装于Eppendorf管，-80 ℃保存待测。血清尿酸（Uric Acid，UA）、总胆固醇（Total Cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）、白蛋白（Albumin，ALB）、总蛋白（Total Protein，TP）含 量、谷 草 转 氨 酶（Glutamic Oxaloacetic Transaminase，GOT）和谷丙转氨酶（Glutamic Pyruvic Transaminase，GPT）采用试剂盒法测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.4.4血清抗氧化指标的测定 血清总抗氧化能力（Total Anti-Oxidation Competence，T-AOC）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GSH-Px）活性及丙二醛（Malonaldehyde，MDA）含量均采用试剂盒法测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.5数据计算与统计分析 试验数据采用SPSS18.0单因子方差分析进行分析，各组均值采用Tukey氏多重比较进行差异显著性检验，以P＜0.05作为差异显著的标准，结果以“平均值±标准误”表示。

2　结果与分析

2.1发酵处理对银杏叶营养成分的影响 由表1可知，银杏叶发酵后类黄酮、多糖和粗蛋白质含量分别提高28.3%、52.5%和57.07%。通过发酵处理银杏叶后，几种必需氨基酸的含量也不同程度提高，其中蛋氨酸、苏氨酸、精氨酸含量较发酵前分别提高125%、15.3%和42.04%。

2.2发酵银杏叶对1～42 d黄羽肉仔鸡生产性能的影响 日粮添加发酵银杏叶对1～21 d平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著影响（P＞0.05）（表3）。与对照组相比，日粮添加0.2%、0.4%和0.8%发酵银杏叶对42 d黄羽肉仔鸡末重影响显著（P＜0.05）。由表3可知，日粮添加0.4%发酵银杏叶对22～42 d和1～42 d黄羽肉仔鸡平均日增重影响显著（P＜0.05），分别较对照组提高1.47%和1.58%。与其他各组相比，0.2%发酵银杏叶组黄羽肉仔鸡全期平均日采食量显著提高（P＜0.05）。日粮添加0.4%发酵银杏叶显著降低了22～42 d和1～42 d黄羽肉仔鸡料重比（P＜0.05）。与对照组相比，日粮添加发酵银杏叶显著降低了黄羽肉仔鸡全期死淘率（P＜ 0.05）。

表3　发酵银杏叶对黄羽肉鸡生长性能的影响

2.3 发酵银杏叶对1～42 d黄羽肉仔鸡血清生化指标的影响 由表4可知，随着日粮发酵银杏叶添加水平的升高，血清白蛋白含量呈现先升高后降低的趋势，其中0.4%发酵银杏叶组血清白蛋白含量较对照组和0.8%发酵银杏叶组分别提高了3.22%（P＜0.05）和2.23%（P＜0.05）。血清尿酸和甘油三酯含量随日粮发酵银杏叶添加水平升高而降低，其中0.4%发酵银杏叶组血清尿酸和甘油三酯含量较对照组分别降低了2.13%（P＜0.05）和3.56%（P＜0.05）。日粮添加发酵银杏叶对肉鸡血清GOT水平无显著影响（P＞0.05），但与对照组相比，0.2%和0.4%发酵银杏叶组显著降低了肉鸡血清GPT水平（P＜0.05）。

2.4发酵银杏叶对1～42 d黄羽肉仔鸡抗氧化性能的影响 由表5可知，血清SOD和GSH-Px的活力随日粮发酵银杏叶添加水平的升高而降低，其中0.4%发酵银杏叶组血清SOD和GSHPx活力较对照组和0.8%发酵银杏叶组分别提高3.48%（P＜0.05）、2.60%（P＜0.05）和0.48%（P＜0.05）、0.44%（P＜0.05）。日粮添加0.4%发酵银杏血清MDA含量显著降低（P＜0.05），其中较对照组降低7.91%（P＜0.05）。

表4　发酵银杏叶对黄羽肉鸡血清生化指标的影响

表5　发酵银杏叶对黄羽肉鸡抗氧化性能的影响

3　讨论

3.1发酵处理对银杏叶营养成分的影响 银杏叶是世界上较为普遍的植物，在中国具有一定的规模化。发酵处理是开发饲料资源的有效方法，中草药、树叶等通过微生物发酵可以提高维生素、酶、生长因子的含量（Ng等，2011）。本试验利用发酵处理的银杏叶饲喂1～42 d黄羽肉仔鸡，评估其作为家禽饲料资源的可行性。本试验发现，银杏叶经过发酵处理后，其类黄酮、多糖、粗蛋白质、蛋氨酸、苏氨酸和精氨酸含量均高于未发酵处理银杏叶，这与Hong等（2004）通过发酵处理豆粕的研究结果类似。

3.2发酵银杏叶对肉鸡生长性能的影响 本试验结果表明，日粮添加0.4%发酵银杏叶可以显著提高肉鸡生长后期及全期日增重，同时降低料重比和死淘率。陈强和梁军生（2012）研究表明，添加0.5%银杏叶提取物显著降低肉仔鸡料重比，这与银杏叶提取物中含多种活性成分可以促进肉仔鸡生长和蛋白质合成有关。银杏叶含有较多的类黄酮化合物（0.53%），本试验通过发酵处理银杏叶后，类黄酮含量提高28.3%。黄酮的作用机理主要是通过调控下丘脑-垂体-靶器官轴，促进机体生长激素的分泌，进而促进动物生长（赵茹茜等，2002）。Cao等（2012）利用黑曲霉发酵的银杏叶饲喂1～42 d黄羽肉仔鸡，结果发现日粮中添加0.35%和0.7%的发酵银杏叶可以显著降低22～42 d和1～42 d肉鸡的料重比，这与本试验日粮添加0.4%发酵银杏叶结果一致。有研究报道，日粮添加发酵银杏叶可以提高肉鸡肠道消化酶的含量，同时改善空肠绒毛高度和隐窝深度（Yu等，2015）。肠道黏膜及消化酶可以反映胃肠道的健康状态，应激导致肠道黏膜迅速变化，毒素更容易到达黏膜表面，使绒毛变短和隐窝变深，最终降低营养物质的吸收（Xu等，2002）。本试验添加发酵银杏叶能提高肉鸡的生长性能可能与银杏叶中的生物活性成分（类黄酮）能提高肠道消化酶水平及改善绒毛结构有关。但上述相关报道的适宜添加量与本试验存在一定差异，可能与银杏叶发酵方法、肉鸡品种等不同有关。

3.3发酵银杏叶对肉鸡血清生化指标的影响

机体蛋白质的周转由蛋白质合成与分解代谢共同决定，血清白蛋白和总蛋白含量是反映机体蛋白质合成能力的两个重要指标（Stanley等，2002）。本研究结果发现，日粮添加发酵银杏叶对1～42 d黄羽肉仔鸡血清总蛋白含量并无显著影响，但0.4%发酵银杏叶组可以显著提高血清白蛋白质水平和降低血清尿酸水平，这与陈强和梁军生（2012）研究结果相似。Zarrouki等（2010）研究表明，类黄酮能抑制机体脂肪沉积，然而多数关于类黄酮对脂肪代谢的报道主要集中在哺乳动物上。本试验利用发酵处理银杏叶饲喂肉鸡，发现血清甘油三酯水平显著降低，这与Jiang等（2007）利用发酵人参饲喂蛋鸡的结果一致。Cao等（2012）利用黑曲霉发酵银杏叶饲喂AA肉鸡，结果发现，添加发酵银杏叶可以显著降低肉鸡腹脂和血清甘油三酯的含量，这可能与发酵银杏叶中类黄酮上调肝脏脂肪酸β-氧化相关基因表达，同时下调脂肪酸合成相关基因表达有关（Aoki等，2007），本试验结果一定程度上可以为类黄酮在家禽脂肪代谢上的研究提供理论数据。谷草转氨酶和谷丙转氨酶是参与蛋白质和氨基酸代谢的两种重要转氨酶。本研究结果显示，发酵银杏叶对肉鸡血清谷草转氨酶水平无显著影响，但显著降低肉鸡血清谷丙转氨酶水平，这可能与银杏叶中生物活性物质类黄酮改善肝脏代谢功能有关，具体作用机制还有待进一步研究。

3.4发酵银杏叶对肉鸡抗氧化性能的影响

T-AOC是反映机体综合抗氧化能力的重要指标，SOD在平衡机体氧化和抗氧化能力上也具有重要作用（Lewis等，1995）。本试验结果显示，发酵银杏叶对血清T-AOC活力影响并不显著，但在日粮添加0.2%和0.4%发酵银杏叶可以显著提高1～42 d黄羽肉仔鸡血清SOD和GSH-Px的活力，这与王国庆等（2007）利用银杏叶提取物对兔抗氧化损伤作用的研究结果一致。机体不饱和脂肪酸被自由基攻击发生氧化作用形成的脂质过氧化物，是造成机体损伤的主要原因（Faustman和Cassens，1990）。本试验发现日粮中添加0.4%发酵银杏叶可显著降低1～42 d黄羽肉仔鸡血清MDA含量，这与Cao等（2012）、陈强和梁军生（2012）在肉鸡上的研究结果一致。本研究添加发酵银杏叶提高黄羽肉仔鸡血清SOD和GSH-Px的活力，同时降低血清MDA的含量，这可能与发酵后银杏叶多糖和类黄酮含量升高有关，因为多糖和类黄酮可以调控细胞自由基与抗氧化水平之间的平衡（Miyake等，2005）。

4　结论

日粮中添加发酵银杏叶可以提高1～42 d黄羽肉仔鸡的日增重和降低料重比，综合考虑肉鸡生产性能和抗氧化性能，玉米-豆粕型日粮中发酵银杏叶的适宜添加水平为0.4%。

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