类固醇生成因子1及细胞角蛋白8在垂体腺瘤中的表达及意义

吴会芳　王俊宽　常　佳　顾　斌　冯怡锟　杨婉菁　张　岩　胡桂明　陈　琛　任景丽

1)郑州大学第二附属医院病理科，河南 郑州 450014　2)郑州大学第一附属医院神经外科，河南 郑州 450052

垂体腺瘤是鞍区最常见的肿瘤[1-2]，因压迫视神经、激素分泌的增多或减少引起视野缺损或内分泌紊乱等多种症状[3]。部分肿瘤呈侵袭性生长，甚至出现远处转移(垂体癌)[4-6]。正常垂体中，类固醇生成因子1(steroidogenic factor-1，SF1)可以促进垂体促性腺激素细胞的分化，在垂体促性激素细胞胞核中高表达[7]。我们通过免疫组织化学方法，研究SF1和细胞角蛋白8(cytokeratin8，CK8)在垂体腺瘤中的表达，探讨其在垂体腺瘤分类及预后中的意义。

1　资料及方法

1.1病例收集2016—2017年在郑州大学第二附属医院神经外科接受手术治疗的垂体腺瘤49例，其中促性腺激素细胞腺瘤(图1)20例，非促性腺激素细胞腺瘤11例(生长激素细胞腺瘤3例，泌乳激素细胞腺瘤7例，促肾上腺皮质激素细胞腺瘤1例)，无激素分泌的腺瘤18例。男21例，女28例；中位年龄52岁。

1.2常规处理手术切除的组织标本，经10%福尔马林固定、石蜡包埋后切片，切片厚度3 μm。

1.3免疫组织化学染色单克隆鼠抗人抗体SF1(克隆号OT110E2，中衫金桥生物技术有限公司，即用型)。单克隆鼠抗人细胞角蛋白8(克隆号TS1，基因科技上海有限公司，1：200)。EnVision二步法染色，以缓冲液代替一抗作阴性对照。免疫组织化学结果判读标准[8]：将染色强度分为阴性(0)、低至中等(1)、强(2)；将阳性肿瘤细胞百分比计为0(0%)、0.1(1%～9%)、0.5(10%～49%)和1(50%或以上)。根据两者相乘的结果将染色进行半定量分析(histochemistry score，H-score)，分为阴性(0，图2～3)、低表达(0.1～0.5，图4～5)、高表达(1～3，图6～7)3组。正常垂体作阳性对照，肿瘤间质血管内皮细胞作内部阴性对照。SF1核着色[9]，CK8胞浆着色(弥漫、点状、核旁、环状等)[10]，低表达及高表达均为免疫染色阳性。

图1　促性腺激素细胞腺瘤(HE染色，×200倍) 图2　促性腺激素细胞腺瘤SF1阴性(免疫组织化学染色 EnVision二步法，×200倍)

图3　促性腺激素细胞腺瘤CK8阴性(免疫组织化学染色 EnVision二步法，×200倍) 图4　促性腺激素细胞腺瘤SF1低表达(免疫组织化学染色 EnVision二步法，×200倍)

图5　促性腺激素细胞腺瘤CK8低表达(免疫组织化学染色 EnVision二步法，×200倍) 图6　促性腺激素细胞腺瘤SF1高表达(免疫组织化学染色 EnVision二步法，×200倍)

1.4统计学方法采用SPSS 17.0 统计学软件进行分析，计数资料组间比较用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

SF1在促性腺激素细胞腺瘤中的阳性率(90%，18/20)明显高于其他类型垂体腺瘤(0)，差异有统计学意义(P<0.01)；SF1在FSH/LH高表达、低表达病例中，均以高表达为主(64%，7/11；67%，6/9)，差异无统计学意义(P>0.05)；49例垂体腺瘤中，6例出现SF1胞浆棕黄色颗粒状着色(3例生长激素细胞腺瘤，2例无激素分泌的腺瘤，1例促性腺激素细胞腺瘤)，见表1、图8；CK8在SF1阳性的垂体腺瘤中的高表达率(21%，5/24)明显低于SF1阴性的垂体腺瘤(92%，23/25)，差异有统计学意义(P<0.01)，见表2。

图7　促性腺激素细胞腺瘤CK8高表达(免疫组织化学染色 EnVision二步法，×200倍) 图8　生长激素细胞腺瘤SF1胞浆表达(免疫组织化学染色 EnVision二步法，×200倍)

项目n低表达高表达胞浆表达促性腺激素细胞腺瘤(FSH/LH高表达)112(18)7(64)1(9)促性腺激素细胞腺瘤(FSH/LH低表达)93(33)6(67)0非促性腺激素细胞腺瘤　PRL腺瘤7000　GH腺瘤3003(100)　ACTH腺瘤1000无激素分泌腺瘤1804(22)2(11)合计495176

表2　CK8在垂体腺瘤中的表达　[n(%)]

3　讨论

SF1是由NR5A1基因编码生成，其对性腺发育及类固醇的生成有重要的调节作用[11-12]，表达在垂体促性腺激素细胞、肾上腺皮质、性腺、脾脏、腹内侧下丘脑等部位[13-14]。2017版WHO内分泌肿瘤分类中，对激素(FSH、LH、α-SU、PRL、GH、TSH、ACTH)的免疫组化检测成为垂体腺瘤分类的基础，但FSH/LH的免疫组化经常出现局灶或弱表达[4]，使促性腺激素细胞腺瘤的病理诊断出现一定困难。

我们的研究显示，SF1的表达不受FSH/LH表达强弱，甚至不表达的影响，在促性腺激素细胞腺瘤中有极高的敏感性和特异性。有研究显示，无激素分泌的腺瘤占垂体腺瘤的25.6%[15]，将SF1用于分类后，可以将FSH、LH弱表达，甚至是不表达的无激素分泌腺瘤进一步分类，为垂体腺瘤的临床管理提供更确切的依据。

近年研究显示，CK8在不同的垂体腺瘤中有不同的表达模式[16-17]。本研究显示，CK8在大部分SF1阳性的腺瘤中为阴性或低表达，而在SF1阴性的腺瘤中为高表达，提示CK8阴性或低表达是促性腺激素细胞腺瘤的分子特征之一，可辅助用于垂体腺瘤的分类。

垂体腺瘤的分类、肿瘤细胞的增生活性与预后有一定的相关性[18-19]，但至今仍无可靠指标预测垂体腺瘤的生物学特性[20-21]，只能在垂体腺瘤出现转移后才能确诊为垂体癌[4，22-23]，延迟了患者的早期治疗。有研究显示，增加SF1剂量可以引起肾上腺皮质细胞增殖和肿瘤[24]，其表达与肾上腺皮质癌的预后呈负相关[8，25-26]。本研究发现，SF1的表达程度与FSH/LH的表达与否及表达程度无相关性。有研究显示，NR5A1基因突变可以导致SF1的表达部位由胞核转为胞浆[27]。本研究中出现6例胞浆着色，特别是3例生长激素细胞腺瘤，全部出现胞浆着色。总之，SF1和CK8的免疫组化检测对垂体促性腺激素细胞腺瘤有较高的诊断价值，而SF1与垂体腺瘤预后间的关系及SF1胞浆表达的意义有待进一步研究。

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