T.spotTB联合结核抗体检测在结核病诊断中的应用价值

张士才

[摘要] 目的 探讨T.spotTB联合结核抗体检测在结核病诊断中的应用价值。 方法 选择我院于2016年5月～2017年5月期间收治的结核病患者89例（结核组），非结核呼吸系统患者74例（非结核组）；另选择我院2016年5月～2017年5月期间健康体检者50例作为对照组。观察采用T.spotTB、结核抗体检测结核病的阳性率及联合检测灵敏度和特异度。 结果 T.spotTB检测结核组阳性率高于非结核组和对照组，非结核组阳性率高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；结核抗体检测结核组阳性率高于非结核组和对照组，非结核组阳性率高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；T.spotTB联合结核抗体检测结核组阳性率高于非结核组和对照组，非结核组阳性率高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；T.spotTB联合结核抗体检测灵敏度和特异度高于T.spotTB、结核抗体。 结论 T.spotTB联合结核抗体检测在结核病诊断中具有重要价值，诊断阳性率较高，且联合诊断灵敏度和特异度较高。

[关键词] T.spotTB；结核抗体；结核病；诊断价值

[中图分类号] R521 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2018）01-0127-03

The value of T.spotTB combined with tuberculosis antibody test in the diagnosis of tuberculosis

ZHANG Shicai

Department of Clinical Laboratory， Tai'an Tumour Prevention and Treatment Hospital in Shandong Province 271000， China

[Abstract] Objective To investigate the value of T.spotTB combined with tuberculosis antibody in the diagnosis of tuberculosis. Methods A total of 89 cases tuberculosis teated in our hospital from May 2017 to May 2016 were selected as tuberculosis group； A total of 74 cases non tuberculous respiratory system teated in our hospital from May 2016 to May 2017 were selected as non tuberculosis group； another 50 cases healthy persons in our hospital from May 2016 to May 2017 were selected as control group. The positive rate of tuberculosis and the sensitivity and specificity of combined detection were detected by T.spotTB and TB antibody. Results the positive rate of T.spotTB detection of tuberculosis group was higher than non tuberculosis group and control group， non tuberculosis group was higher than control group（P<0.05）； tuberculosis antibody positive rate of tuberculosis group was higher than non tuberculosis group and control group， non tuberculosis group was higher than control group（P<0.05）； the rate of T.spotTB combined with Mycobacterium tuberculosis antibody detection of tuberculosis group was higher than non tuberculosis group and control group， non tuberculosis group was higher than tcontrol group（P<0.05）； T.spotTB combined with Mycobacterium tuberculosis antibody detection sensitivity and specificity than T.spotTB and tuberculosis antibody. Conclusion T.spotTB combined with TB antibody detection is of great value in the diagnosis of tuberculosis， and the diagnostic rate is high， and the sensitivity and specificity of the combined diagnosis are higher.

[Keywords] T.spotTB； Tuberculosis antibody； Tuberculosis； Diagnostic value

結核病主要是由结核分枝杆菌感染，且是一种慢性传染病，近年来其发病率呈不断上升趋势，严重影响人们身心健康和生活质量[1-2]。结核病发生后对体内的许多器官产生不同程度的损害，使其生理功能受到严重影响[3]。目前，临床上采用细菌学诊断是结核病诊断的“金标准”，并且在早期以痰结核菌试验诊断结核病，不仅细菌培养耗时较长、阳性检出率低且操作复杂[4]。因此，临床上采取有效的检测方法尤为重要[5-6]。研究探讨T.spotTB联合结核抗体检测在结核病诊断中的应用价值，旨在为临床治疗结核病提供一定参考价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2016年5月～2017年5月期间收治的结核病患者89例（结核组），按照《临床诊疗指南结核病分册》[7]中相关诊断标准。89例患者中，男54例、女35例，年龄24～75岁、平均（54.28±4.62）岁。选择我院2016年5月～2017年5月间收治的非结核呼吸系统患者74例（非结核组），其中男45例、女29例，年龄24～75岁、平均（55.03±5.17）岁。另选择我院2016年5月～2017年5月期间健康体检者50例作为对照组，其中男32例、女18例，年龄24～75岁、平均（54.68±4.91）岁。三组性别和年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 纳入标准及排除标准

纳入标准：（1）经胸膜活检、痰菌实验及X线检查等证实为结核病患者；（2）经医院伦理委员会批准者；（3）签署知情同意书者。

排除标准：（1）结核病高风险感染者；（2）合并肺、肾、肝等功能严重异常者；（3）精神疾病者；（4）哺乳期或者妊娠期妇女。

1.3 主要仪器和试剂

主要仪器：BACTEC MGIT 960型快速培养仪（美国BD公司）。

主要试剂：结核分枝杆菌抗体诊断试剂盒（广州健仑生物科技有限公司）。

1.4 方法

1.4.1 细胞混合液标本采集及T.spotTB检测 所有研究对象均于入院后清晨空腹采集3 mL外周静脉血，于室温下加培养液混合均匀，分离，得到单个细胞层，加入细胞悬液10 μL和0.4%细胞稀释液40 μL，取细胞混合液，将其加入细胞计数板中，处理活细胞计数，且在培养板中加入50 μL抗原A、50 μL抗原B、50 μL AIM-V无血清培养液，置于5%CO2、37℃培养箱中培养孵育24 h，弃去旧培养液，加入50 μL新鲜酶标抗体溶液，置于4℃下培养60 min后，再加入底物溶液50 μL，反应8 min，洗涤，干燥处理，进行斑点计数。

1.4.2 血清标本采集及结核抗体检测 所有研究对象均于入院后清晨空腹采集3 mL外周静脉血，以离心半径15 cm，转速2500 r/min，离心，分离血清，置于-20℃下保存待测。检测血清38 kD-免疫球蛋白G（IgG）。血清中结核IgG能够被结核分枝杆菌抗原所捕获，且IgG抗体可与SPA胶体结合形成特异性红色斑点，若检测出现红色斑点则为阳性。

1.5 观察指标

（1）观察三组T.spotTB检测、结核抗体检测及T.spotTB联合结核抗体结核阳性率并比较；（2）观察T.spotTB和结核抗体联合检测灵敏度和特异度。灵敏度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%；特异度=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%。

1.6 统计学方法

采用SPSS22.0统计学软件对数据进行统计及处理，三组之间计数资料比较采用R×C卡方分割检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组T.spotTB检测、结核抗体检测及T.spotTB联合结核抗体检测结核阳性率比较

T.spotTB检测结核组阳性率高于非结核组和对照组（P<0.05），非结核组阳性率高于对照组（P<0.05）。见表1。结核抗体检测结核组阳性率高于非结核组和对照组，非结核组阳性率高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；T.spotTB联合结核抗体检测结核组阳性率高于非结核组和对照组，非结核组阳性率高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。

2.2 T.spotTB联合结核抗体检测灵敏度和特异度

T.spotTB联合结核抗体检测灵敏度和特异度高于T.spotTB、结核抗体。见表2。

3 讨论

结核病主要是由结核分枝桿菌感染所致的一种慢性传染性疾病。临床上诊断结核病并不容易，由于其多因素复杂化，如免疫抑制剂的使用增多、人口老龄化、糖尿病的流行及获得性免疫缺陷综合征的越发猖獗等，肺结核引发的症状通常缺乏特异性，并且体征对其诊断有所限制[8-9]。大部分肺结核的影像学表现与临床表现相比于传统的肺结核存在很大的出入。结核病的辅助检查中尤以痰培养作为结核病诊断的金标准，但其培养阳性率较低，并且对潜伏期结核实用性差，培养操作周期长、要求高，同时不能及时诊断肺结核，从而可能会延误结核的最佳治疗时机[10-12]。因此，临床上采用有效的诊断结核病的方法尤为重要。近年来研究报道显示，T.spotTB试验用于结核病诊断方面取得良好效果，且具有较高的灵敏度和特异度[13]。

T.spotTB是以酶联免疫斑点技术为基础而产生，主要是通过利用结核杆菌感染者外周血单核细胞中存在结核特异性T细胞，在受到结核杆菌特异抗原刺激后这些淋巴细胞分离干扰素-γ而设计的T细胞免疫斑点试验[14]。结核特异的混合抗原A和混合抗原B、PBMC，与对照试剂一起加入预先包被抗体的微孔培养板中培养[15]。当出现PBMC中存在特异性T细胞时，加入培养液中的结核杆菌特异混合抗原多肽A和B将刺激其分泌。本文研究结果表明，T.spotTB检测结核组阳性率高于非结核组和对照组，非结核组阳性率高于对照组，说明T.spotTB检测阳性率较高。血清结核抗体试验不受卡介苗接种影响，具有操作简单、重复性好，且不受人为因素影响。血清结核抗体敏感性不高，按照结核抗体来源种类不同，分为单克隆与多克隆抗体，其中单克隆抗体技术要求高，多克隆抗体制备方法简便，应用较多[16-19]。其中单克隆抗体设备繁琐，并且及时要求高；多克隆抗体制备方法简便，应用较多。但单克隆抗体特异性高于多克隆抗体，是一种诊断理想的抗体。本文研究结果表明，结核抗体检测结核组阳性率高于非结核组和对照组，非结核组阳性率高于对照组，说明结核抗体检测阳性率相对较低。但临床研究报道显示，血清结核抗体敏感度较低，而T.spotTB特异度较低[20]。本文研究表明，T.spotTB试验检测特异度仅为26.32%，结核抗体试验检测敏感度仅为45.76%，与上述研究报道基本一致。

综上所述，T.spotTB联合结核抗体检测在结核病诊断中具有重要价值，诊断阳性率较高，且联合诊断灵敏度和特异度较高。但本文研究还存在观察患者较少不足，故而还需在后续研究中增加观察患者进行深入研究，提供可靠的临床参考价值。

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（收稿日期：2017-09-19）