乙型肝炎肝硬化患者血清血小板衍生生长因子和叶酸水平变化

姚小健，黄红霞，陈勇

肝硬化是我国成年人肝胆系统最常见的慢性病，可由多种病因引起，而我国肝硬化多继发于乙型肝炎病毒（HBV）感染[1]。肝细胞损伤导致肝纤维化，并最终引起肝硬化[2]。肝功能损伤可有多种表现，但肝细胞凋亡、细胞数量减少是其共同的病理学损伤过程，短时间大量肝细胞凋亡或坏死可引起肝功能衰竭，预后不良[3]。目前，多数学者认为积极监测乙型肝炎肝硬化患者肝功能损伤状况有利于早期评价患者病情并指导治疗。虽然肝穿刺是评判肝损伤最准确的检测方法，但其属于有创检查。乙型肝炎肝硬化患者病情需要连续监测，因此该方法在临床上的应用受限，而血清学检测简单、可重复、患者易接受，寻找有效的肝功能损伤血清学检测指标意义重大[4，5]。既往研究发现乙型肝炎肝硬化患者多有不同程度的血清血小板衍生生长因子（platelet derived growth factor，PDGF）和叶酸水平改变，并能提示病情的轻重[6，7]。本研究检测了不同肝功能分级的乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF水平，并分析了PDGF和叶酸水平与患者肝功能损伤的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2015年1月～2016年12月期间我院收治的110例肾功能正常的乙型肝炎肝硬化患者，男69例，女41例；年龄30～70岁，平均年龄（53.91±6.91）岁。乙型肝炎诊断参照《慢性乙型肝炎防治指南》[8]，肝硬化诊断参照《肝硬化中西医结合诊治方案》[9]。Child-Pugh A级36例，B级42例，C级32例。纳入标准：初治，肾功能指标正常。排除标准：合并其他肝炎病毒感染、有糖尿病、肿瘤、酗酒、有精神性疾病。本研究经我院医学伦理委员会批准。患者本人签署知情同意书。

1.2 临床检测 采用酶法检测血清肌酐（sCr，DiaSys Diagnostic Systems GmbH）；采用ELISA法检测血清PDGF水平（上海乔羽生物科技有限公司）；采用化学发光法检测血清叶酸水平（Siemens Medical Solutions Diagnostics）；采用速率法检测血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）和总胆红素（total bilirubin，TBIL）水平（北京麦瑞博生物科技有限公司）；采用放射免疫法检测血清Ⅲ型前胶原（type procollagen，PCⅢ）、Ⅳ型胶原（collagenⅣ，Ⅳ-C）、层粘连蛋白（laminin，LN）和透明质酸酶（hyaluronidase，HA）水平（北京乐博生物科技有限公司）；采用深圳市锦瑞生物科技有限公司生产的CA54血凝仪检测凝血酶原时间（prothrombin time，PT），根据PT计算国际标准化比值（international normalized ratio，INR）；采用溴甲酚绿比色法检测血清白蛋白（albumin，ALB，上海申索佑福医学诊断用品有限公司）。使用北京普天新桥技术有限公司生产的3502B多功能酶标仪和武汉天鹰医疗设备有限公司生产的SL200A全自动生化分析仪。

1.3 统计学方法 应用SPSS 22.0版统计学软件分析，计量资料以±s表示，采用t检验，采用Pearson分析法行相关性分析，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 乙型肝炎肝硬化患者肝功能指标变化情况 本组乙型肝炎肝硬化患者肝功能损伤情况见表1。

2.2 不同肝功能分级患者血清PDGF和叶酸水平比较 随着肝功能变差，患者血清PDGF水平逐渐上升，三组间差异有统计学意义（P＜0.05）；随肝功能变差，叶酸水平逐渐下降，三组间差异有统计学意义（P＜0.05，表2）。

表1 肝硬化患者血清肝功能指标（±s）变化

表1 肝硬化患者血清肝功能指标（±s）变化

与 A级组比，①P＜0.05；与 B级组比，②P＜0.05

?

表2 不同肝功能分级患者血清PDGF和叶酸水平（±s）比较

表2 不同肝功能分级患者血清PDGF和叶酸水平（±s）比较

与 A级比，①P＜0.05；与 B级比，②P＜0.05

?

2.3 不同肝功能分级患者血清肝纤维化指标的比较 随着肝功能分级变差，患者血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈现上升趋势，组间差异均有统计学意义（均P＜0.05，表3）。

2.4 肝硬化患者血清PDGF和叶酸水平与肝功能指标的相关性分析 乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF水平与ALT、TBIL水平和INR均呈正相关，与ALB呈负相关（均P＜0.05）；血清叶酸水平与ALT、TBIL水平和INR均呈负相关，与ALB呈正相关（均 P＜0.05，表4）。

2.5 肝硬化患者血清PDGF和叶酸水平与血清肝纤维化指标的相关性分析 乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF水平与PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈正相关（均P＜0.05），乙型肝炎肝硬化患者血清叶酸水平与PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈负相关（均P＜0.05，表5）

表3 不同肝功能分级患者血清肝纤维化指标（μg/L，±s）比较

表3 不同肝功能分级患者血清肝纤维化指标（μg/L，±s）比较

与 A级组比，①P＜0.05；与 B级组比，②P＜0.05

?

表4 肝硬化患者血清PDGF和叶酸水平与肝功能指标的相关性

表5 血清PDGF和叶酸水平与肝纤维化指标的相关性

3 讨论

目前，乙型肝炎肝硬化的具体发生机制尚未完全阐明，但随着研究的深入，多数认为肝功能损伤及肝纤维化是乙型肝炎肝硬化发生的必经之路[10]。乙型肝炎病毒感染并不会直接导致肝功能损伤，但在机体免疫功能的作用下，肝细胞可发生变性、凋亡、坏死，而肝细胞的凋亡坏死又会导致肝组织纤维增生，最终在修复过程中发生肝纤维化[11，12]。近年研究认为，PDGF在肝纤维化的发生发展中起重要作用。肝细胞未损伤时大部分PDGF存储于血小板中，此时血清PDGF水平较低，但当肝功能损伤时，包括肝星状细胞在内的多种细胞均可释放PDGF，从而导致血清PDGF水平发生改变[13，14]。动物实验显示PDGF刺激肝纤维组织增生的能力较强，其可通过刺激星形胶质细胞增殖及分泌胶原纤维，达到促进肝纤维化病情进展的作用。另有研究指出，PDGF还可通过抑制胶原蛋白酶活性抑制肝细胞间质降解[15]。肝纤维化的发生与PDGF的参与关系密切，而乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF的改变与肝细胞损伤有关。因此，血清PDGF水平变化可能提示乙型肝炎肝硬化患者肝功能损伤状况[16，17]。本研究结果显示，不同Child-Pugh分级的乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF水平不同，且随着Child-Pugh分级的变差，患者血清PDGF水平增加，此结果与张亮等[18]的研究结果一致，提示乙型肝炎肝硬化患者普遍存在肝损伤状况，且Child-Pugh分级差的患者可能肝功能损伤更严重。

血清叶酸水平与肝功能损伤的关系已有报道。叶酸是细胞合成必不可缺的物质，肝脏是叶酸代谢的重要器官[19]。既往研究认为肝细胞的大量损伤可显著影响叶酸代谢，而叶酸的合成需要肝细胞的参与。因此，普遍认为叶酸水平可反映肝功能状况[20]。血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA等指标均为提示乙型肝炎肝硬化患者肝纤维化程度的指标[21]。本研究结果显示，血清PDGF水平与PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈正相关，而叶酸水平与血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈负相关，且PDGF水平与LN水平具有显著相关性，提示血清PDGF水平和叶酸水平可提示乙型肝炎肝硬化患者病情。本研究对PDGF和叶酸水平与血清ALT、TBIL、ALB和INR等肝功能指标的相关性研究显示，血清PDGF水平与ALT、TBIL水平和INR均呈正相关，与血清ALB呈负相关，而叶酸水平与ALT、TBIL和INR水平均呈负相关，与ALB呈正相关，提示血清PDGF和叶酸水平均能提示乙型肝炎肝硬化患者的肝损伤程度。

综上所述，随着乙型肝炎肝硬化患者肝功能损伤程度的加重，患者血清PDGF水平随之上升，叶酸水平随之下降，血清PDGF水平和叶酸水平可作为判断乙型肝炎肝硬化患者肝功能损伤程度的指标，在临床乙型肝炎肝硬化患者的诊疗过程中起某种提示作用。

[1]吴钦梅，尤红.中国乙型病毒性肝炎肝硬化研究现状.中国病毒病杂志，2014，6（1）:7-10.

[2]Marcellin P，Gane E，Buti M，et al.Regression of cirrhosis during treatmentwith tenofovirdisoproxilfumarate forchronic hepatitis B:A 5-year open-labelfollow-up study.Lancet，2012，381（9865）:468-475.

[3]陈辉春，金凯.痰热清注射液联合注射用腺苷蛋氨酸治疗肝硬化合并肝功能损害临床观察.中国中医急症，2013，22（3）:458-459.

[4]Salkic NN，Jovanovic P，Hauser G，et al.FibroTest and fibrosure for significant liver fibrosis and cirrhosis in chronic hepatitis B:A Meta-analysis.Am J Gastroenterol，2014，109（6）:796-809.

[5]陈伟军.分析联合检测血清总胆汁酸与肝功能酶学指标在临床诊断肝脏疾病中的应用价值.中国实用医药，2014，17（13）:41-42.

[6]赖祥红.TGF-β1、PDGF与乙型肝炎肝硬化肝功能分级及中医证型的相关性研究. 江苏中医药，2012，44（4）:20-21.

[7]刘典勋，邹先雄，朱兴，等.断流术对乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF、CTGF 及肝纤四项的影响. 医学综述，2016，22（6）:1237-1239.

[8]中华医学会肝病学分会和感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）.实用肝脏病杂志，2011，14（2）：81-89.

[9]中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员会.肝硬化中西医结合诊治方案.现代消化及介入诊疗，2005，10（2）:119-121.

[10]左琳琳，周华娟，方红菊.恩替卡韦治疗46例失代偿期乙型肝炎肝硬化患者临床效果观察.实用肝脏病杂志，2016，19（2）:217-218.

[11]Zoutendijk R，Reijnders JG，Zoulim F，et al.Virological response to entecavir is associated with a better clinical outcome in chronic hepatitis B patients with cirrhosis.Gut，2013，62（5）:760-765.

[12]张永峰.恩替卡韦结合CIK疗法对乙型肝炎病毒感染相关性肝硬化的治疗效果研究. 中国处方药，2016，14（3）:37-38.

[13]王焕信，马金栋，刘国宁，等.血小板衍生生长因子BB和Ⅱ型树突状细胞亚群与乙型肝炎病毒复制及肝损伤的关系.中国民康医学，2011，23（1）:5-7.

[14]Tripodi A，Anstee QM，Sogaard KK，et al.Hypercoagulability in cirrhosis:causes and consequences.J Thromb Haemost，2011，9（9）:1713-1723.

[15]项荣，侯宝峰.柔肝灵颗粒对肝纤维化大鼠血清MMP-2及PDGF 影响的实验研究. 陕西中医，2013，34（1）:107-109.

[16]刘帅伟，丁向春，张栩，等.复方鳖甲软肝片联合核苷类药物对乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF和其它肝纤维化指标的影响及其相关研究. 宁夏医科大学学报，2012，34（7）:695-698.

[17]刘瑶，吴同玉，李东良，等.早期乙型肝炎肝硬化中医证素特征及其与血浆CTGF、PDGF的相关性研究.广州中医药大学学报，2015，5（1）:4-9.

[18]张亮.细胞因子与乙型肝炎肝硬化肝功能分级的相关性.实用临床医药杂志，2012，16（13）:98-100.

[19]焦晓磊，高英堂，景丽，等.血清同型半胱氨酸、叶酸、亚甲基四氢叶酸还原酶与HBV感染后疾病进展关系的研究.生物医学工程与临床，2013，10（6）:595-600.

[20]Elghonemy KS.Su1398 immune response to recombinant hepatitis B vaccine in adult patients with autoimmune hepatitis.Gastroenterology，2015，148（4）:S495-S498.

[21]Raj A，Holtmann G，Bhat P，et al.Hepatic fibrosis is associated with small intestinal permeability in chronic liver disease due to hepatitis C，hepatitis B and non-alcoholic fatty liver disease，in subjects without ascites.A prospective cohort study using non-invasive techniques.J Gastroenterol，2014，29（12）:200-201.