液基细胞学与HPV分型联合检测对早期宫颈癌的筛查意义

赵 君 赵 媛

宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌，是危害女性健康的疾病，应当给予较高的重视。约90%的宫颈癌与高危型HPV感染有关，因此对已婚女性进行HPV检测，有助于降低高危型HPV感染妇女宫颈癌的发生风险，具有重要的意义[1]。本研究采用液基细胞学技术(TCT)联合HPV分型检测对已婚妇女进行宫颈病变筛查，旨在探讨TCT联合HPV分型检测对早期宫颈癌筛查的临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选择2014年1月至2016年5月我院妇科门诊诊治的慢性宫颈炎患者714例。入选患者均为已婚妇女，年龄20～65岁，平均(32.5±11.2)岁，无妊娠，无宫颈手术病史，无子宫切除，无其他妇科肿瘤，同意进行TCT及HPV检测。

1.2 样本采集

选择月经干净后3～7天，取材前48 h禁止性生活，前72 h禁止冲洗阴道及使用阴道药物。患者取膀胱截石位，使用阴道窥器暴露宫颈，将专用宫颈细胞采集刷伸入宫颈管内，顺时针旋转3～5圈取出，装入专用的细胞保存液收集管中，标记好患者详细信息。

1.3 TCT检测

采用湖北亚光技术有限公司的甩片机制片，苏木精-伊红(HE)染色后镜检，采用TBS报告系统报告，包括非典型鳞状上皮细胞(ASC)[无明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)和不除外高度病变的非典型鳞状上皮细胞(ASC-H)]、低度鳞状上皮内病变(LSIL)[宫颈轻度不典型增生(CIN-Ⅰ)]、高度鳞状上皮内病变(HSIL)[宫颈中度不典型增生(CIN-Ⅱ)和宫颈重度不典型增生(CIN-Ⅲ)]和鳞状细胞癌(SCC)。

1.4 HPV-DNA分型检测

将保存液中的标本离心，取沉淀物，采用PCR-反向点杂交法检测HPV-DNA，试剂盒来自深圳亚能生物公司，共检测23个HPV基因型，分别为高危型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82，低危型：HPV6、11、42、43、81、83。

1.5 病理学检查

将TCT和HPV-DNA任一检测阳性或二者均阳性者进行阴道镜取活检检查，病理组织结果分为正常或炎症、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌，其中CINⅠ相当于TCT诊断中的LSIL，CINⅡ和CINⅢ相当于TCT诊断中的HSIL[2]。

1.6 统计学方法

所得数据应用SPSS 22.0进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验。

2 结果

2.1 HPV感染在各年龄段分布

在HPV感染的各年龄组中，20～30岁组和51～60岁组的感染率较高，分别为36.7%和39.7%，各年龄组感染率差异有统计学意义(χ2=14.974，P=0.039)。见表1。

表1 HPV-DNA感染在各年龄段分布

2.2 两种检测方法阳性率比较

TCT检测阳性率为25.8%，HPV-DNA检测阳性率为29.7%，略高于TCT检测，但二者差异无统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两种检测方法检出情况比较/例

2.3 TCT检测异常结果与病理诊断结果对照

TCT检测异常与病理诊断结果对照显示：ASC-US中70.6%为慢性宫颈炎症，LSIL中54.2%为CINⅠ，HSIL中31.6%为CINⅡ，50.0%为CINⅢ，SCC中有1例病理诊断为CINⅢ，其余5例与病理诊断结果一致，见表3。

表3 TCT检测阳性结果与病理诊断结果对照(例，%)

2.4 HPV-DNA阳性与病理诊断结果对照(表4)

HPV-DNA高危型感染者中病理诊断为宫颈癌5例，占6.5%，高于HPV-DNA低危型感染者宫颈癌的发生率(0.7%)，差异有统计学意义(P<0.05)。

表4 HPV-DNA阳性与病理诊断结果对照(例，%)

2.5 TCT联合HPV-DNA分型检测诊断宫颈癌的价值

TCT联合HPV-DNA分型检测诊断宫颈癌的敏感度高于TCT和HPV-DNA单独检测，特异度高于HPV-DNA单独检测，假阳性率低于HPV-DNA单独检测，假阴性率低于TCT和HPV-DNA单独检测，差异有统计学意义(P<0.05)。见表5。

表5 TCT联合HPV-DNA分型检测诊断宫颈癌的价值/%

注：与TCT联合HPV-DNA检测比较，*为P<0.05。

3 讨论

宫颈癌是发病率仅次于乳腺癌的妇科恶性肿瘤，从宫颈癌前病变发展到宫颈癌至少需要10年时间，可见宫颈癌是可预防的疾病，而预防的关键是明确诱发宫颈癌的因素及做好癌前病变的筛查[3]。HPV的持续感染是宫颈癌发生的主要原因，尤其是高危型HPV的感染与宫颈癌的发生密切相关[4-5]，流行病学研究显示HPV的持续感染是宫颈癌发生的必要条件，换句话说，无HPV感染，就不可能发生宫颈癌[6]。在不同的年龄段，HPV感染的风险是不同的，本研究结果显示在20～30岁和51～60岁的感染率较高，出现两个感染的高峰。30岁以前的女性处于性活跃期，频繁的性生活增加了HPV的感染机会，此年龄段的HPV高感染率与性行为有关，且呈现出单一HPV类型感染的类型。50～60岁女性处于更年期，雌激素水平的下降，免疫功能的降低，致使自身清除HPV病毒的能力下降，此年龄段女性HPV感染类型中双重感染和多重感染的类型增多。

随着宫颈癌筛查在临床的广泛开展，宫颈癌的发病率及死亡率呈现下降的趋势。宫颈癌的癌前病变存在可逆转的特点[7-8]，及早诊断与恰当处理对预防宫颈癌至关重要，研究显示早期宫颈癌的治愈率几乎可以达到100%[9]。TCT检查是目前广泛应用与宫颈癌筛查的技术，能发现癌前病变，同时可以区分阴道病病原菌感染的类型，但是资料显示TCT检测对CINⅡ级以上的病变检测的敏感度不高[10]，易出现假阳性或假阴性的结果，给患者造成心理负担。本研究中TCT检测阳性的患者中，1例分型为SCC的患者经宫颈组织病理诊断结果显示为CINⅢ，而1例分型为HSIL的患者病理诊断结果显示未宫颈癌，提示TCT检测具有漏检及误检的可能，做为单一筛查宫颈癌的手段其准确性有待提高。HPV病毒感染的检测在一定程度上弥补TCT检测敏感性及特异性不高的不足[11]。HPV检测取材方便，用于TCT检测的标本同样可以用于HPV的检测，两种检测手段联合检测不仅可以明确已出现宫颈病变的妇女，同时可以预测可能患病的妇女，利于及早进行干预。本研究结果显示联合TCT和HPV-DNA分型检测提高了诊断宫颈癌的敏感度和特异度，同时降低了假阳性率和假阴性率。HPV不仅在不同年龄度妇女的感染率有差异，其感染的不同HPV类型对宫颈的病变宜有显著不同。大部分女性感染HPV是一过性的，只有少部分发展为持续性感染，且这部分感染的HPV类型以高危型HPV-DNA为主[12]。目前认定与宫颈癌宫颈上皮内瘤样病变有关的高危型HPV-DNA共有17个型，分别为HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82[13-15]。本研究选用的HPV-DNA检测试剂包括这17种高危类型，结果显示212例HPV-DNA阳性的标本中，高危型HPV-DNA感染77例，占36.3%。本组病例中，6例患者最终诊断为宫颈癌，其中高危型HPV-DNA感染5(6.5%)例，低危型HPV-DNA1(0.7%)例，提示高危型HPV-DNA感染的患者宫颈癌的发生率显著高于低危型HPV-DNA感染，可见对HPV分型检测可以评估感染患者的罹患宫颈癌的风险程度，达到对不同感染型别HPV患者区分治疗的目的。

综上所述，TCT联合HPV-DNA分型检测可以提高诊断宫颈癌的敏感性和特异性，对宫颈癌的早发现、早治疗有重要临床意义。

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