急性髓性白血病患儿血清中犬尿氨酸和miR-335表达及其临床意义

姜勇超 聂钰君

近年来急性髓性白血病的发病率呈上升趋势，且呈现年轻化趋势，严重危及患儿的健康[1]。因此，早期诊断并判断患者的预后以及进行早期干预对挽救该病患者的生命具有重要临床价值[2]。本研究应用酶联免疫吸附法(Elisa)技术检测犬尿氨酸和miR-335在急性髓性白血病患儿血清中的水平，旨在探讨犬尿氨酸和miR-335在急性髓性白血病患儿血清中的水平，并分析其临床意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选择2013年5月至2015年5月间我院收治的急性髓性白血病患儿共85例。初发26例中男性14例，女性12例；年龄6～14岁，平均(11.31±2.06)岁。缓解29例中男性18例，女性11例；年龄5～13岁，平均(10.97±2.23)岁。复发30例中男性16例，女性14例；年龄5～14岁，平均(11.09±2.62)岁。按FAB分型：M110例，M222例，M315例，M424例，M514例。同期纳入体检健康者30例为对照组，男性17例，女性13例；年龄7～14(11.22±2.70)岁。4组研究对象的性别、年龄等基本临床资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究获得我院医学伦理委员会批准。

1.2 诊断标准

急性髓性白血病及其初发、缓解、复发、分型参照《血液病诊断及疗效标准》[3]。

1.3 病例纳入和排除标准

纳入标准：①满足急性髓性白血病患儿；②年龄5～14岁；③所有患儿家属自愿接受加入本研究，且签署协议书。排除标准：①合并心、肺、肝、肾等脏器功能严重不全患儿；②伴有其他类型恶性肿瘤患儿；③依从性较差患儿；④早产儿。

1.4 方法

1.4.1 治疗方法 所有患儿在常规检查后予常规方案化疗，并且辅以输血和对症支持疗法，疗程中定期复查血常规、肝肾功能，在出院后行定期随诊。

1.4.2 检测指标 3组(初发、缓解、复发急性髓性白血病患儿)于入院时行抽取空腹静脉血约3 mL，对照组30例于晨起空腹抽取静脉血约3 mL，所有样本放于采血管中，室温1 000 r/min 离心后置于-70 ℃备测。应用酶联免疫吸附(Elisa)法检测4组血清中犬尿氨酸和miR-335水平。

1.4.3 分析指标 ①比较急性髓性白血病患儿和对照组血清中犬尿氨酸和miR-335水平。②比较初发、缓解、复发组患儿血清中犬尿氨酸和miR-335水平。③分析患儿血清中犬尿氨酸和miR-335水平与急性髓性白血病临床特征间的相关性。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 4组血清中犬尿氨酸和miR-335水平比较

与对照组比较，急性髓性白血病患儿血清犬尿氨酸和miR-335水平明显升高，比较有统计学差异(P<0.01)。急性髓性白血病初发和复发组患儿血清中犬尿氨酸和miR-335水平明显高于缓解组(P<0.01)。急性髓性白血病初发与复发组患儿间的血清中犬尿氨酸和miR-335水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 4组血清中犬尿氨酸和miR-335水平比较

2.2 血清犬尿氨酸和miR-335水平与宫颈癌临床因素间的临床意义

血清犬尿氨酸和miR-335水平与急性髓性白血病患儿的年龄、性别、骨髓中白血病细胞比例及FAB分型无明显相关性(P>0.05)，见表2。

3 讨论

急性髓性白血病是一种由造血干细胞或祖细胞突变所致造血系统的恶性肿瘤，以异常造血细胞的分化障碍、恶性增殖、凋亡受阻以及正常血细胞减少为病理特征[4]。急性髓性白血病的发生发展是一个多因素、多步骤的病理过程，目前已证实了大量的细胞遗传学、分子生物学相关指标，但临床资料显示该病仍易复发，与急性髓性白血病复发相关的因素尚有待进一步阐明[4]。监测骨髓、染色体、微小残留病灶对判断白血病预后、复发及治疗效果具有重要临床价值，但上述检测费用高、时间长。寻求其他便捷、廉价且患者依从性好的检测方法仍是当前临床面临的重要难题[5]。

犬尿氨酸是人体必需氨基酸色氨酸的代谢产物，具有多种特殊生理作用，人体生理机能与其代谢状态密切相关[6]。人体的色氨酸经吲哚胺2，3-双加氧酶分解，最终生成犬尿氨酸，在色氨酸耗竭的同时产生过多的犬尿氨酸，后者可诱导发生肿瘤免疫逃逸[7]。研究发现，吲哚胺2，3-双加氧酶在各种白血病的细胞中呈高表达，且活性高于正常水平，白血病化疗治疗可通过影响白血病患者血清中吲哚胺2，3-双加氧酶活性，进而影响犬尿氨酸代谢，与白血病的发病、疗效和复发密切相关[7]。国外研究发现[8]，急性髓性白血病患者体内的犬尿氨酸水平与其总体生存期密切相关。本组资料显示，与对照组比较，急性髓性白血病患儿血清犬尿氨酸水平明显升高。血清犬尿氨酸水平与急性髓性白血病患儿的年龄、性别、骨髓中白血病细胞比例及FAB分型无明显相关性。急性髓性白血病初发和复发组患儿血清中犬尿氨酸水平明显高于缓解组。急性髓性白血病初发和复发组患儿间的血清中犬尿氨酸水平比较，差异无统计学意义。提示了血清中犬尿氨酸水平与急性髓性白血病患儿的病情及预后有关。

表2 血清犬尿氨酸和miR-335水平与宫颈癌临床因素间的临床意义

miR-335位于人染色体7q32上，参与癌细胞的增殖、分化、凋亡、侵袭及转移[9]。microRNA作为一种小分子RNA，新近发现在转录后调控基因表达中发挥重要作用，与急性白血病的发生发展联系密切。PCR检测证实，急性髓性白血病患者血清中循环的miR-335含量较正常情况下明显升高，miR-335可能是急性髓性白血病患者临床的辅助诊断标志物之一[10]。国外研究表明，血清中miR-335含量可能与急性髓性白血病患者的病情发展及预后联系密切[11]。本组资料显示：与对照组比较，急性髓性白血病患儿血清中miR-335水平明显升高。血清中miR-335水平与急性髓性白血病患儿的年龄、性别、骨髓中白血病细胞比例及FAB分型无明显相关性。急性髓性白血病初发和复发组患儿血清中miR-335水平明显高于缓解组。急性髓性白血病初发和复发组患儿间的血清中miR-335水平比较，差异无统计学意义。提示了血清中miR-335水平与急性髓性白血病患儿的病情及预后有关。

综上所述，急性髓性白血病患儿血清中犬尿氨酸和miR-335水平明显升高，与该病的预后密切相关。

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