结肠癌患者术前血清中细胞因子的表达对预后的意义

刘 博 张 欣 翟 艳

结肠癌是一种高发性肿瘤，在西方国家中，结肠癌占所有癌症的10%以上[1]。在中国，结肠癌的发病率也显著增加。目前，判断结肠癌预后常用的方法就是监测淋巴结转移的情况[2]。然而，现在并没有预测远端转移和局部复发的可靠指标。一些常见的结肠癌预后因子主要是分子和生化标志物，但是高昂的检测成本限制了其在临床的广泛应用[3]。

细胞因子是一种由淋巴细胞分泌的具有免疫调节功能的激素，其中IL-6已被证实和多种肿瘤相关[4-7]。CRP也是一种常见细胞因子，在乳腺癌中可作为患者存活的独立预后因素[8]，但在结肠癌中，循环CRP水平和预后的关系尚无定论[9]。此外，结肠癌患者术前血清中EGF和肿瘤中EGFR水平之间的关系也很少有研究报道。在本研究中，我们通过回顾性分析Ⅲ期结肠癌患者术前血清中细胞因子(EGF、IL-6和 CRP)的水平，研究了其与患者预后的关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2013年9月至2016年9月于我院经结肠癌根治术的83例Ⅲ级结肠癌患者的临床资料，其中男性47例，女性36例；≥60岁患者61例，<60患者22例；根据TNM分期标准，Ⅲ期79例，Ⅳ期4例。N1患者73例，N2患者10例。淋巴血管侵犯患者13例。所有患者均接受标准辅助化疗83例。临床资料来源于患者术后复查，检查项目包括血清癌胚抗原(CEA)、胸部X线摄影、腹部计算机断层扫描(CT)、结肠镜检查、腹部超声检查、血常规、血清中肿瘤标志物检查。所有患者均接受了标准辅助化疗。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：患者年龄18～80岁；手术前未发现远端转移且术后病理检查确诊为结肠癌；术前无呼吸或循环系统重大疾病；无术前化疗史。排除标准：年龄<18岁或者>80岁的患者；手术中发现多发转移或肝转移，无法根治切除；其他脏器有重大疾病的患者；随访时间在3个月以下。

1.3 血清样本的处理

收集患者术前血液样本，在3 000 r/min条件下离心处理5 min。移除血清并将样品保存于-80 ℃条件下，以备生化分析。

1.4 细胞因子的检测

通过EGF和IL-6的免疫试剂盒(上海生工生物工程有限公司)检测EGF和IL-6的含量，依照试剂盒说明书进行操作。通过免疫比浊法测定血清中CRP的含量。

1.5 免疫组化测定EGFR的含量

通过检测细胞膜棕黄色沉淀判断EGFR的表达水平，其中，0分表示无着色、1+表示弱膜着色、2+表示中等程度膜着色、3+表示强的完全膜着色。

1.6 统计分析

研究的终点设定在根治切除后，且在肿瘤复发之前。无病生存期定义为从根治切除后直到肿瘤复发的时间。通过t检验对两样本平均值进行比较，使用方差分析进行多样本间比较。通过χ2检验或Fisher精确概率法进行样本间率的比较。通过Cox比例模型进行多变量分析。使用SPSS 13.0软件进行统计分析。

2 结果

2.1 术前血清中细胞因子的水平

EGF、IL-6和CRP水平的中位数分别为183.2(10～221)pg/mL、8.81(0.01～305)pg/mL和1.27(0.5～5.0)mg/dL。

2.2 术前血清中细胞因子水平与无病生存率的相关性分析

术前IL-6水平高于9 pg/mL与无病生存率显著相关(P<0.05)，CRP和EGF水平与无病生存率并无显著关系(P=0.227；P=0.304)。见表1。

表1 患者术前血清中细胞因子和无病生存之间的关系(例，%)

2.3 血清EGF水平与肿瘤组织EGFR以及血清IL-6水平的相关性分析

在83例患者中，EGFR阳性61例(73.5%)，阴性22例(26.5%)。肿瘤中EGFR的阳性与血清中EGF水平之间并无显著相关性(γ=0.234,P=0.479)。此外，EGF与IL-6之间也没有显著相关性(γ=0.211,P=0.297)。见表2。

表2 血清EGF水平与肿瘤组织EGFR阳性的相关性/例

3 讨论

近年来，结肠癌的外科手术技术和药物治疗得到了长足的进展，然而，患者的预后依然很不理想[9-10]。造成这种情况的原因之一就是预测预后的指标的缺乏。所以，发现并验证预后相关指标，对患者的总体生存和无病生存率进行预测是很有必要的。

研究已经证实，IL-6与很多种癌症的发生与发展都有紧密的联系，其在临床诊断中的作用也被越来越多地认识到[11]。在我们的研究中，IL-6在Ⅲ级结肠癌患者血清中是高表达的，这与前人的研究是一致的[12]。本研究旨在发现IL-6对结肠癌患者预后的意义，以及其与EGF、EGFR之间的关系。EGFR通路可诱导核因子kappaB的活性，促进验证因子的表达，包括IL-6和IL-8[13]。然而，在本研究中，患者术前血清中EGF的水平与血清IL-6的水平(P=0.297)与肿瘤组织EGFR的表达(P=0.479)并无显著的相关性。

肿瘤患者IL-6高表达的原因包括癌胚抗原介导的Kupffer细胞分泌IL-6，以及慢性应激导致的肿瘤相关巨噬细胞分泌IL-6。相应的，我们的研究发现，术前血清中高水平的IL-6与无病生存率有关(P=0.027)。这可能与IL-6通过自分泌的途径增加肿瘤细胞运动能力有关。另外，通过旁分泌途径，肿瘤细胞分泌的IL-6能够刺激间质细胞分泌肝细胞生长因子，而肝细胞生长因子与肿瘤细胞上的干细胞因子受体结合后，也会增加肿瘤细胞的运动能力。目前，国内关于Ⅲ级结肠癌患者术前血清中IL-6的水平与预后的关系的研究还很少有报道。我们的研究表明，IL-6有潜力作为预测低生存率的预后生物指标之一。对于CRP，虽然已有研究证明了其与结肠癌复发的关系[14]，但是在我们的研究中并未发现CRP与无病生存的关系。所以，今后的研究需要进一步增大样本量以验证本研究结果。

综上所述，术前血清中IL-6的水平对于Ⅲ级结肠癌患者预后的判断具有重要价值。IL-6有潜力作为判断不良预后的指标。而IL-6的水平与EGF的水平以及肿瘤组织中EGFR的阳性与否并没有显著相关性。所以，术前检测血清IL-6的水平有助于预后的预测。

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