FOXJ1及SATB-1在胃癌组织中的蛋白表达情况及其与肿瘤分期、转移的相关性

李延新 杜 雄

已有研究表明，FOX家族蛋白与核基质结合蛋白(SATB-1)参与到细胞凋亡，恶性肿瘤转化过程，因此本研究旨在探究FOXJ1及SATB-1在胃癌组织中的蛋白表达情况及其与肿瘤分化、转移、临床预后的相关性，以期为胃癌早期诊断提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源

收集我院2013年2月至2015年4月收治的180例经外科手术切除并经病理确诊的胃癌组织标本及相应的癌旁正常组织(镜下诊断无癌组织浸润)作为对照组，其中包含男性114例，女性66例，平均年龄(57.72±4.1)岁；所有手术标本在半小时内采集后立即储存中液氮。TNM分期参考美国癌症联合委员会(AJCC)分期标准。

1.2 纳入、排除标准

纳入标准：①所有病例在术前均未行放化疗；②病例资料完整，均与家属签署知情同意书。该研究获得我院伦理委员会批准；排除标准：①合并严重脏器功能不全；②合并其他恶性肿瘤。

1.3 方法

1.3.1 免疫组织化学 采用免疫组织化学(SP法)检测胃癌组织及癌旁正常组织中FOXJ1及SATB-1蛋白的表达情况，所有操作步骤严格按照试剂盒说明书(SP试剂盒购于武汉博士德生物有限公司)。操作步骤简述如下：常规切片后烤片、二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水、灭活内源性过氧化物酶，抗原修复、滴加已稀释好的一抗(兔抗人SATB1多克隆抗体、鼠抗人FOXJ1单克隆抗体均购于美国Abcam公司)、4 ℃孵育过夜、加二抗室温孵育，滴加辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素孵育、使用DAB显色(DAB显色试剂盒购于武汉博士德生物有限公司)，苏木精复染，脱水并封片。

1.3.2 结果判定 SATB-1是核转录因子，定位于细胞核，细胞核呈橘黄色为阳性表达。FOXJ1蛋白染色以细胞质出现淡黄色至棕黄色颗粒为阳性。参照Sinicrope[1]评分标准对蛋白进行半定量：根据阳性细胞染色强度及细胞阳性率综合评分，两者得分相乘，总分(0～3)分为阴性表达，总分(4～12)分为阳性表达。染色强度评分：未出现阳性染色计0分；弱染色1分；中等染色2分；强染色3分；细胞阳性率评分：随机选取5个视野，阳性细胞数≤5%计0分；6%～25%计1分；26%～50%计2分；51%～75%计3分；≥75%计4分。由两名病理科副主任医师独立阅片。

1.4 统计学分析

应用SPSS 17.0软件，计数资料用卡方检验对比分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 FOXJ1及SATB-1在胃癌组织及癌旁正常组织中表达量的差异

经免疫组织化学SP法检测发现FOXJ1蛋白在胃癌组织中阳性表达率为48.33%，显著低于其在正常组织中的阳性表达率(94.44%，P<0.01)；SATB-1蛋白在胃癌组织中阳性表达率为58.33%，显著高于其在正常组织中的阳性表达率(9.44%，P<0.01)，见表1。

2.2 FOXJ1及SATB-1蛋白表达与胃癌临床病理参数的相关性

统计学分析结果表明：不同性别、年龄及不同肿瘤位置患者的FOXJ1蛋白表达水平比较无统计学差异(P>0.05)，而与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移、远端转移、临床分期等显著相关。浸润深度大、分化程度低、已发生淋巴结转移或远端转移、临床分期为Ⅲ、Ⅳ期患者FOXJ1蛋白阳性表达率显著较低(P<0.05)。SATB-1蛋白表达水平与患者年龄、性别、肿瘤位置等无相关性(P>0.05)，而浸润深度深、已发生淋巴结转移或远端转移、临床分期为Ⅲ、Ⅳ期患者SATB-1蛋白阳性表达率显著较高(P<0.05)，见表2。

表1 FOXJ1及SATB-1在不同组织中表达水平的差异(例，%)

3 讨论

研究表明在恶性肿瘤的增殖、发展过程中常伴随着原癌基因与抑癌基因的调控紊乱，进而导致相应蛋白的异常表达[2]。研究肿瘤病理过程中蛋白质表达变化有助于发现肿瘤病变中关键的调控蛋白，通过定向调节该蛋白的表达水平，控制肿瘤病变，这也是肿瘤靶向治疗的基础。本文采用免疫组化的方法检测FOXJ1及SATB-1在胃癌组织中的蛋白表达情况及其与肿瘤分化、转移、临床预后的相关性，结果表明：FOXJ1蛋白在胃癌组织中阳性表达率显著低于其在正常组织中的阳性表达率，而SATB-1蛋白在胃癌组织中阳性表达率显著高于其在正常组织中的阳性表达率。进一步研究蛋白表达水平与临床病理的相关性发现：不同性别、年龄及肿瘤位置患者的FOXJ1、SATB-1蛋白表达水平比较无统计学差异。肿瘤浸润深度大、发生淋巴结，远端转移、临床分期为Ⅲ、Ⅳ期患者的FOXJ1蛋白阳性表达率显著较低，SATB-1蛋白阳性表达率显著较高。

FOXJ1蛋白是FOX蛋白家族中的一员，FOX家族在肿瘤的发生发展过程中起重要的调控作用。已有研究表明，FOXJ1可通过促进上皮间质转化及金属蛋白酶7的表达，进而促进肝癌转移；FOXQ1在多种肿瘤病变中扮演促癌基因角色，加快肿瘤恶化。与其他成员的作用不同，FOXJ1蛋白在不同的肿瘤类型及发展阶段呈现异质性表达，在肝癌患者组织中FOXJ1蛋白表达上调，然而在卵巢癌和子宫内膜癌中FOXJ1蛋白表达水平显著下调，且具有明显的浸润和促转移作用[3]。在胃癌组织中FOXJ1蛋白发挥抑癌基因作用，该研究结果与刘秀鹏[4]、袁春銮等[5]的报道一致。目前，关于FOXJ1蛋白的异质性表达还没有明确的机制解释，仍需进一步研究。核基质结合蛋白(SATB-1)是1种组织特异性表达的核基质结合蛋白，其广泛参与细胞分化、凋亡、肿瘤的发生过程，能够调控与肿瘤发生相关的上千余种基因的表达，被誉为“基因组织者”。研究显示SATB-1能够上调原癌基因表达的同时下调抑癌基因表达，在结肠癌、肝癌、前列腺癌等恶性肿瘤中呈现高表达，且与肿瘤侵袭、转移能力密切相关[6-7]，本研究中SATB-1在胃癌组织中呈现出相似的特性。

表2 FOXJ1、SATB-1蛋白表达与胃癌临床病理参数的相关性/例

综上所述，FOXJ1及SATB-1蛋白参与胃癌的发生发展过程中，且与肿瘤分化、转移等病理指标密切相关，可作为预测肿瘤恶性程度及转移倾向的临床指标。

[1] Sinicrope FA,Ruan SB,Cleary KR,et al.bcl-2 and p53 oncoprotein expression during colorectal tumorigenesis〔J〕.Cancer Res,1995,55(2):237-241.

[2] Phang CW,Karsani SA,Sethi G,et al.Flavokawain C inhibits cell cycle and promotes apoptosis,associated with endoplasmic reticulum stress and regulation of MAPKs and akt signaling pathways in HCT 116 human colon carcinoma cells〔J〕.Plos One,2016,11(2):e0148775.

[3] 王 静.FOXJ1在胃癌恶性生物学表型中的作用和机制〔D〕.第四军医大学,2014.

[4] 刘秀鹏,赵素芳,胡晶晶,等.FOXJ1在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的相关性〔J〕.海南医学,2016,27(2):192-194.

[5] 袁春銮,孙志超,张 磊,等.SATB1阳性患者胃癌临床病理特征分析及预后〔J〕.实用临床医药杂志,2016,20(3):52-55.

[6] 胥 颖,董丹丹,李 科,等.核基质结合区结合蛋白质1在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系〔J〕.实用医院临床杂志,2016,13(2):60-62.

[7] 刘淮东,高 超.SATB1、KISS1在胃腺癌组织芯片中的表达及其临床意义〔J〕.临床肿瘤学杂志,2016,21(1):52-56.