尿液干化学法检测的影响因素及处理方法
2018-02-09阮小娥
阮小娥
尿检验是临床上最常用的重要检测项目之一,主要用于泌尿系统疾病诊断和治疗监测,也用于其他系统疾病诊断,这是因为任何系统疾病的病变影响血液成分时,均可引起尿成分的变化。尿干化学法具有操作方便,测定迅速等优点,但其实在整个检测过程中,其检测结果易受到诸多因素的影响。在日常工作中我们应该掌握这些影响因素及其解决的方法,以便发挥仪器应有的效能,达到测定结果准确。现就笔者二十多年的工作经验,结合本科使用的由北京华晟源科技有限公司生产的华晟H-II尿干化学分析仪来浅谈一下尿液干化学法检测的影响因素及处理方法。
1 干化学法测定pH值
根据酸碱指示剂法测得,因此标本必须新鲜。另外,大量实验验证得出室温20℃是最佳温度值,pH及其他项目结果也最接近靶值,因此在进行pH测定时,实验室温度最好保持在20℃上下[1]。
2 干化学法测定尿糖
尿糖检测的基本原理是基于葡萄糖氧化酶的酶促反应,如果尿液中存有比色素还原能力还要强的物质,很可能导致尿糖检测结果偏低,而出现所谓的“假阴性”。一般情况下,如果尿液中的L-多巴、水杨酸盐、氟化钠或者尿比密等含量过高,则将使尿糖呈现假阴性结果;而当尿液中的VitC浓度过大,超过500 mg/L时,会出现“假阴性”;如果尿液标本被过氧化物、强氧化性清洁剂、次氯酸盐等物质污染,则可能出现“假阳性”。
3 干化学法测定尿比重
不论检测尿液的哪一项指标,都要求尿液标本的新鲜,而且决不能含有强酸、碱物质。在使用干化学法测定尿液的尿比重时,如果pH值变化范围在6.2到7.0之间,那么这一酸碱度及其所引起来的尿液中蛋白质的变化,都会对尿比重测定结果产生直接影响,一般情况是蛋白质浓度增加相应尿比重的结果也会增加。
4 干化学法测定尿蛋白
尿液中的蛋白质含量会受到多种药物的影响;如:青霉素药物影响下可出现假阴性测定结果,奎宁、嘧啶等药物影响下,或者尿液中含有少量的聚乙烯、季铵盐成份时,导致尿液的pH>9.0而呈强碱性,可使测得结果出现假阳性。防腐剂、洗涤剂、杀虫剂的混入,亦可能出现假阳性测定结果。医学上使用的试带主要测定的是尿中的白蛋白,而对球蛋白的灵敏度较低,一般只有白蛋白总量或者说灵敏度的1%~2%;鉴于上述问题的存在,对于那些患有肾病或者需要经常进行蛋白测定的患者,就不能使用尿干化学法,而应该使用10%磺基水杨酸法或者加热乙酸法。
5 干化学法测定尿潜血
干化学法检测对于尿液中的血红蛋白有极强的敏感性[2]。试纸带法除与游离血红蛋白反应外,也与完整的红细胞反应,但在高蛋白、高比密尿液中,RBC不溶解,试纸带法灵敏度减低。在日常工作经常出现的干化学潜血+++,而同一患者的沉渣镜检红细胞400倍每视野只有2~4个,出现这种情况极有可能是尿液中含有肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂,或者标本被细菌感染而变成菌尿等而引起的假阳性[3];如果尿液标本中含大量Vit C,确切来说当浓度超过100 mg/L时,由于竞争性抑制反应的存在,则可能会出现假阴性[4]。
6 干化学法测定酮体
酮体主要含有四种成份,分别是乙酸、乙酰、丙酮和β-羟丁酸,干化学法对前三者有较强的敏感性,但是却不与β-羟丁酸作用。由于乙酸、乙酰很容易受到温度影响而受热分解,丙酮在细菌大量繁殖情况下则会消失,因此为保证检测结果的准确性,尿液标本必须要新鲜,否则很可能导致假阴性结果出现。
7 干化学法测定尿胆红素、尿胆原
干化学法检测尿液除了要求标本新鲜外,还不能受强光照射,而且检测必须在2小时内完成,主要目的是避免尿液中的胆红素变成胆绿素。如果尿液标本放置的时间太长,尿液中的尿胆原就会被氧化成尿胆素。此外,尿液中还含少量的源性物质,如吲哚、胆色素原和磺胺药等,它们很可能干扰尿液的颜色,而出现假阳性检测结果。
8 干化学法测定亚硝酸盐
亚硝酸盐测定通常用来诊断标本是否为菌尿,这也是保持尿液标本新鲜的原因所在,首先盛放尿液标本的容器必须干燥、清洁,而且采集好标本后要立刻送检,因为放置时间过长就无形中增大了被亚硝酸盐、偶氮剂等污染的可能性,而出现假阳性检测结果。如果患者使用了利尿剂,尿中的亚硝酸盐含量可能会降低而出现假阴性结果;如果患者使用了抗生素,尿液中的细菌会被抑制,这时就可能出现假阴性结果。
9 干化学法测定白细胞
由于试纸带只能与尿液中的粒细胞胞质内的酯酶发生作用,因此干化学法只能用来测定尿液中的粒细胞。对于肾移植患者,由于可能存在排异反应,尿液中的粒细胞较少而会出现阴性结果,这时需要结合尿沉渣镜检做出进一步诊断[5]。如果尿液中含有少量的Vit C、或者大剂量的先锋霉素IV、庆大霉素等药物,或者尿蛋白大于5 g/L时,也可以出现假阴性。
10 干化学法测定Vit C
Vit C会对尿液中的胆红素、血红蛋白、葡萄糖、亚硝酸盐等产生严重负干扰。另外,如果尿液中含有半胺氨酸、硫代硫酸钠等,Vit C的结果可能会偏高。另外,Vit C在碱性尿中是极不稳定的,应该及时进行测定[6]。
综上所述,在整个检测过程中,从标本的采集与处理到试纸带的使用到显微镜镜检的复检,要注意以下几点:(1)用洁净和干燥的容器收集新鲜尿液,在规定的时间内完成检测[7];(2)尿液检测前要混匀,不然白细胞放置过久会沉淀,就造成与镜检法不符;(3)试纸条浸入尿液时间要适中,过短反应不充分,过长会因为试剂过多扩散到尿液中而影响检测结果;(4)干化学法测定尿液的室温以20~25℃为最佳。
尿干化学分析仪具有操作方便、测定迅速等优点。但其检测结果易受主观因素的影响。在实践工作中我们应该综合考虑力争测定结果准确。此外,检验人员应了解尿干化学分析结果与显微镜镜检结果的相互关系,如出现化学分析结果与镜检结果不相符,如出现化学分析潜血阴性,而镜检见大量红细胞等,这些均应视其为可疑结果,应进一步查明原因[8]。另外,要注意Vit C的含量会对结果产生重要影响,应结合临床诊断等确定检测结果的符合性。
[1]丛玉隆.实用检验医学(上册)[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2013:8-11.
[2]陈晓云.干化学法与尿显微镜法检测尿中白细胞和红细胞的[J].现代诊断与治疗,2013,13(1):10.
[3]苏卉.尿液干化学法隐血反应与镜检法检测红细胞的结果比对[J].基层医学论坛,2015,18(2):37.
[4]和新茗.尿液干化学隐血检测结果与尿沉渣镜检红细胞结果之间的相关性[J].检验医学与临床,2013,10(3):31.
[5]罗金丽,郑香花.尿沉渣分析与尿干化学法联合检测的临床应用[J].中国医药指南,2013,8(4):40.
[6]詹群珊,江汉珍.离心法定量检测尿沉渣可靠性分析[J].重庆医学,2013,6(3):21.
[7]张倩春,李亚鹏.UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿中红细胞形态的临床意义[J].临床医学,2014,7(2):40.
[8]黄艳芳,陈燕.干化学分析仪与尿沉渣分析仪联用对尿RBC、WBC检测的意义[J].福建医药杂志,2013,4(1):11.