生理盐水与富浓缩血小板血浆两种毛囊培养液对自体毛发（囊）移植成活率的影响

朱启刚　王志明　李梁

[摘要]目的：利用单位毛囊提取术（FUE技术）提取毛囊，观察生理盐水与富浓缩血小板血浆（PRP）两种毛囊培养液对毛发移植术后毛囊成活率的影响。方法：40例患者均采用FUE技术，将影响毛囊成活率众多因素控制在同等条件下，将同一个患者头部分为左右A/B两个种植区域，采用即插即种技术，每个区域种植100毛囊单位。观察术后10个月A/B两个区域在不同毛囊培养液的培育下毛囊成活率。结果：A组术后10个月平均毛囊成活率83%，B组74%，差异具有统计学意义（P<0.001）。结论：通过利用FUE技术治疗脱发具有微创、恢复期短、无瘢痕、出血少等优点，当影响毛囊成活率的多种因素在可控范围内，利用PRP培养液的毛囊较生理盐水组成活率高，对于供区毛囊资源稀少的患者提高其毛囊成活率具有积极的临床意义。

[关键词]PRP；自体毛发移植术；毛裳单位；毛囊移植

[中图分类号]R758.71 [文献标志码]A [文章编号]1008-6455（2017）07-0013-03

“脱发”虽然不是重大顽疾，但可影响个人外貌形象，使之产生不自信的心理，影响其生活质量。脱发的原因是复杂多样的，除了具有遗传因素外，雄激素水平升高也是导致脱发重要原因之一。随着生活节奏的加快巨大的职场竞争压力及高度持续的精神紧张、上网、熬夜、染烫发及吸烟、酗酒、辛辣油腻等不良饮食习惯等都在损伤着头发的健康。近年来，我国已有1亿多脱发患者，发病呈逐年上升趋势，且逐渐出现“低龄化”，中青年成为脱发人群的主力军。毛发移植技术有很多种，如切取头皮条游离术（FUT）、自体毛发移植术（FUE）、无痕毛发移植术（SHT）等，因毛囊单位体积极其微小，在分离微小毛囊过程中普遍存在着极易损伤性的问题而影响毛囊成活率。目前，国内少有关于培养液对毛囊成活率影响的研究报道，本实验对40例脱发患者采用无痕毛发移植术，并将影响毛囊成活率的多种因素人为可控在一定范围内，探讨两种不同培养液对毛囊成活率的影响。

1资料和方法

1.1一般资料：收集本院门诊于2013年2月至2013年8月毛发移植患者40例，均为男性，年龄20～52岁，平均33.82岁，男性型脱发稳定期，Norwood分级Ⅲ～Ⅳ级，前額脱发面积约16cm×4cm～17cm×6cm；术前向全部受术者说明两种手术方式的特点、适应证、禁忌证及效果等，所有受术者均了解并愿意接受该手术方式。全部病例均为身体健康，头皮无感染，无心脑血管及肝肾、造血系统严重疾病，无精神神经科疾病，均签署手术知情同意书和临床研究知情同意书。

1.2方法

1.2.1术前设计：根据三庭五眼的比例和患者脸型来确定新发际线位置和外形，即：下颏正中鼻尖前发际线长度各占1/3比例。划定两个对称性的2.5cm²的脱发区域，将其分为A/B两个种植区，甲紫碘酊固定；其他区域按正常需种植范围画线，供区在优势供区画线。供区受区正面、左右45度、前额、头顶、后枕部均需清晰拍照。见图1。

1.2.2富浓缩血小板血浆制备：①抽取静脉血20ml注入含抗凝剂的试管，以600转离心10min，第一次离心分离出的血液成分分为3层；②吸取全部上清液及交界面下3mm的液体，并将其注入一个不含抗凝剂的试管中；③以200转再次离心10min，离心后试管中最下部为少量的剩余浓缩红细胞，最上部是乏血小板血浆（约占总体积80%），两层之间黄色血浆即为PRP，加入氯化钙0.2ml激活血小板。

1.2.3提取、制备毛囊：①患者取俯卧位常规消毒、铺巾，采用1%利多卡因40ml局部神经阻滞浸润及肿胀麻醉；②提取针芯内径0.8mm行分散、提取毛囊，拔出毛囊后置于（0℃～4℃）生理盐水中浸润低温保存；③单株毛囊在2倍的目视放大镜下分离，毛囊外鞘直径保留在0.3～0.6mm，每小时分离600株，毛囊离体时间控制在2h内；④将分离好的毛囊分别放入已标记A、B的2组毛囊培养皿中，将术前提取好的PRP用2ml注射器吸取后加氯化钙0.2ml均匀平铺推至于A组毛囊冰碗中浸润保存，剩余1ml待种植时皮下多点注射，B组毛囊培养皿中为生理盐水10ml。

1.2.4毛囊种植：毛囊于培养液中低温保存（0℃～4℃）保存1.5h，夹持力度恒定的条件下用镊子夹持毛囊]21/3处，用9号针头在术前设计好的A、B两组种植区域左右间隔交错各种植100单位。余下毛囊种植画线另外区域，用时1.5h。供区碘伏消毒外涂红霉素软膏敷料包扎固定，术毕。见图2。

1.3统计学分析：所有数据采用SPSS13.0软件进行统计分析，两组间比较采用独立样本t检验。P<0.01认为差异具有统计学意义。

2结果

40例患者术后第1天供区换药拆除纱布，术后7d清理局部血痂，术后1个月、3个月、6个月种植区毛发逐渐进入脱落期、休止期与生长期。在术后10个月用毛囊检测仪放大50倍观察、测量A/B两区毛发数量，大部分种植区域的毛发生长茂密，可以覆盖头皮，毛发生长方向与原有毛发方向一致；A组术后10个月平均毛囊成活率（生长期，每100株内）为82.52%，B组为73.8%，且差异具有统计学意义（P<0.001）。供区毛发总体数量分散减少，无明显瘢痕。见图3～4。

3讨论

生理盐水能够避免细胞破裂，它的渗透压和细胞外离子一样所以不会让细胞脱水或者过度吸水，故各种医疗操作中需要用液体的地方很多都用它，人体细胞生活中所处液体环境的浓度。

PRP与生理盐水不同机制：PRP含有多种生长因子：①转化生长因子B（TGF B）能促进成纤维细胞、前成骨细胞和血管内皮细胞的有丝分裂；②血小板衍生生长因子（PDGF）具有有丝分裂、促进血管生长、增减胶原蛋白合成、激活巨噬细胞及其它细胞因子的作用；③胰岛素样生长因子（IGF）促进细胞分化、增殖；④血管内皮细胞生长因子（VEGF）可刺激胶原蛋白及透明质酸的形成，有修复组织再生功能；⑤表皮细胞生长因子（EGF）是一只种强有效的促细胞分裂因子，它能刺激体内多种细胞的分裂和增殖，并促进ECM合成和沉积以及纤维组织的形成；⑥成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）可激发细胞活化，加速组织修复。endprint

毛囊发育可分为3个阶段。第一阶段：毛囊生长期初期，为活跃的生长阶段，毛囊细胞会主动繁殖和角化，非脱发的头皮上，大约90%的头发会处于这个阶段，约持续3年；第二阶段：毛发在生长中期，毛囊基底开始角化，形成棒状，将其自身和真皮乳头分开，然后向表面移动生长，最终仅靠结缔组织条和真皮乳头连接，该阶段持续约2～3周；第三阶段：毛囊生长终期，即“静止期”，毛囊基底的附着处变得更薄弱，直到毛发最终脱落，在此阶段，毛囊生长停止，这个阶段约持续3～4月，也叫休止期。一些自然的头发因手术的刺激而进入毛发生长中期，然后进入毛发生长终期，这被称为静止期脱发。此外，在非脱发头皮上，有大约10%的毛囊會处于毛发生长终期。当每天脱发的速度超过生长速度时，头发会变薄，最终形成脱发。

毛发移植方法多样，移植术后毛囊成活率需重点关注。影响毛囊成活因素众多，如毛囊供区选择，毛囊单位提取方法，毛囊单位在分离过程中受到切割、挤压、干燥，毛囊胚周围多余组织切除大小，存储条件，毛囊培植液，种植的方式，毛囊离体时间，室温，局麻药中肾上腺素浓度及受区血运情况（瘢痕）等都会影响毛囊的成活。可分为主观因素和客观因素分别阐述。

3.1主观因素：①毛囊优势供区的选择：通常在后发际边缘上6～8cm，耳后发际线上方4～5cm范围区域作为供区，此处毛囊无雄激素受体，可以不受雄性激素水平的影响，移植到受区不易脱落；②肿胀液中肾上腺素的浓度：在进行头皮肿胀麻醉时笔者常采用1%利多卡因20ml+生理盐水40ml+肾上腺素0.4ml的混合溶液，如果为了单纯的头皮止血加入过多的肾上腺素注射液收缩头皮血管，会导致其乳头缺血而脱发，头皮会变成白色，甚至坏死；③在毛囊单位的提取：单位毛囊提取过程中极易损伤毛囊，建议将供区毛干理短1～2mm有利于毛囊的提取；④毛囊的分离：一般毛囊在2倍的头戴式放大镜下分离，保留毛囊直径0.3～0.6mm，除必要分离单株外其他无需分离单株，一并去除皮下脂肪和表皮；⑤毛囊离体后的保存条件：术中将毛囊放在盛有生理盐水的培养皿中保湿，底部置于冰块保持低温环境（0℃～4℃），可以增强毛囊耐缺血缺氧的能力；⑥毛囊的离体时间：供区毛囊提取之后暂时中断毛囊的血液循环，处于“休克状态”，如果超过一定时间（约8h）部分毛囊会因为缺血导致坏死，表现为干瘪、变长、卷曲；⑦种植方式的选择：有多种毛发种植方法，如：宝石刀打孔法：损伤原有头皮处的毛囊、出血多、恢复时间相对长；种植笔种植法：种植笔有0.6mm、0.8mm、1.0mm眉毛内径的笔芯可供选择；即插即种法：利用7^#、9^#不同直径注射器针头在受区插入打孔种植。⑧种植密度的选择：在种植区每平方厘米超过30FU称为高密度毛发移植，每次种植超过3000FU即称为超大数量毛发移植，一次局部超大量种植可破坏皮下血管网使毛囊供血障碍影响毛囊成活；⑨术后护理：通常局部创口在24h后已收缩闭合，术后7d可进行清洗，但要注意方法，若清洗方法有误将导致毛囊脱落。术后2个月尽量少食辛辣、酒、海鲜、油腻等刺激性食物，避免发生过敏及毛囊炎等并发症。

3.2客观因素：①自身毛囊的质量：供区毛囊质量各有不同，粗壮的毛囊对各种损伤抗击力强，比如提取时损伤、分离时损伤、耐缺血时间、种植损伤等，粗壮毛囊的成活率较细软的毛囊成活率强；②季节因素：冬季寒冷，头皮血运较春夏时节差，毛发生长速度也较其他季节慢，可影响其成活效率；③患者自身的体质：身体虚弱以及伴有其他疾病者自体免疫功能差，毛囊的血运差、营养不足也不利于头发快速生长；④受区血运情况：受区是否瘢痕存在，瘢痕区域组织增生、血运差，毛囊成活率低；⑤毛发移植术后多处于毛囊生长终期，故移植后近期不会出现明显的增长，直至这一阶段结束。

4结论

在影响毛囊成活率的多种因素在一定人为可控范围内，A组术后10个月平均毛囊成活率（生长期，每100株内）较B组成活率高，差异具有统计学意义（P<0.001），说明富浓缩血小板通过血小板释放其颗粒内容物到周围环境中含有大量的生长因子可以提高毛囊的成活率，对于毛发稀疏、细软者提高其毛囊成活率具有较高的临床意义。endprint