肉苁蓉中活性物质体外抗氧化活性研究进展

张 青，夏美茹，孙志惠

（内蒙古河套学院农学系，内蒙古临河 015000）

肉苁蓉始载于《神农本草经》，享有“沙漠人参”之美誉，为列当科肉苁蓉属多年生草本植物，多寄生于藜科梭梭属植物的根部，主要分布于欧洲、亚洲温暖的干燥地区，我国的肉苁蓉主要分布于内蒙古（阿拉善盟、巴彦淖尔市）、新疆、甘肃等地。从20世纪80年代至今，国内外学者对肉苁蓉的化学成分及生物活性进行了深入研究并取得较大的成绩，已从中分离到苯苷类、环烯醚萜类及其苷类、木质素、黄酮类等活性成分，其具有益肾壮阳[1]、通便润肠[2]、保护肝脏[3]、免疫调节[4]、抗衰老[5]、抗肿瘤、提高学习记忆力[6]、抗骨质疏松[7]、促进创伤愈合、保护缺血心肌、改善微循环等作用。从肉苁蓉活性物质、体外抗氧化活性评价方法及抗氧剂的应用等方面介绍了近年来肉苁蓉活性物质的研究进展。

1 肉苁蓉抗氧化活性物质

1.1 苯乙醇苷类

苯乙醇苷化合物具有较强的生物活性和显著的药理活性特性[8]。从肉苁蓉中共分离鉴定出苯乙醇苷类61个[9]，包括肉苁蓉苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷、类叶升麻苷、异类叶升麻苷、红景天苷等。屠鹏飞等人[10]研究肉苁蓉成分，结果表明其主要的活性成分是苯乙醇总苷（主要指标性成分是松果菊苷和毛蕊花糖苷），苯乙醇总苷是肉苁蓉质量控制的主要检测指标。曾克武等人[11]利用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻断模型，考查肉苁蓉苯乙醇苷的脑保护作用，结果表明，从靶点源头上解释了肉苁蓉苯乙醇苷发挥抗痴呆、缓解疲劳、抗肿瘤、免疫调节等诸多作用的潜在药理机制。

1.2 环烯醚萜及其苷类

环烯醚萜类化合物具有多种生物活性[12]，从肉苁蓉中共分离鉴定出环烯醚萜及其苷类25个[9]。京尼平苷酸又称梔子苷酸，是一种环稀醚萜葡萄糖苷，具有消炎利胆等功效成分，因此在临床上用于降血压、止痛、镇静等。李莉等人[13]采用高效液相色谱法对肉苁蓉中京尼平苷酸的含量进行测定，结果表明在5.0～100.0 μg/mL 范围内线性关系良好 （R=0.999 9），平均回收率在95%～101%，RSD为0.55%～1.95%。

1.3 黄酮类

黄酮类化合物具有重要的生物活性，王慧[14]研究发现黄酮类化合物具有抗肿瘤、抗心血管疾病、抗氧化、抗衰老、抗菌、抗病毒、免疫调节等作用，徐常永等人[15]采用大孔吸附树脂对肉苁蓉总黄酮的吸附作用，通过吸附试验和正交试验得到肉苁蓉总黄酮分离纯化较佳的工艺条件，分离纯化前后总黄酮的质量分数由6.63%提高到72.35%。

1.4 其他

目前，国内外的专家和学者已从肉苁蓉中已分离并鉴定出100种以上化学成分和微量元素，除上述成分外，还有木脂素及其苷类、多糖、生物碱、烃类、氨基酸类、菇类、挥发性成分、无机微量元素等成分。

2 肉苁蓉活性物质体外抗氧化活性的评价方法

2.1 肉苁蓉活性物质对DPPH·清除率评价方法的研究

DPPH·（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）在517 nm处有最大吸收峰，是一种较为稳定的自由基，因其稳定性好、灵敏度高、设备要求不高而成为检测抗氧化能力首选。DPPH·的醇溶液呈深紫色，当自由基清除剂存在时，其吸收逐渐消失即颜色变浅，它的褪色程度与自由基清除剂接受的电子数成定量关系。DPPH·清除率最常用的检测方法是分光光度计法，还可用高效液相色谱、电子核磁共振、薄层层析等技术进行检测。肖星辉等人[16]采用乙醇-盐双水相萃取法对荒漠肉苁蓉总黄酮的体外抗氧化性进行研究。结果表明，荒漠肉苁蓉总黄酮对DPPH·具有有效的清除作用，其对DPPH·清除率最高可达91.8%，具有较好的抗氧化活性。王国卫等人[17]通过试验表明肉苁蓉多糖对DPPH·的清除能力与其浓度呈正相关,且清除能力大于抗坏血酸。

2.2 肉苁蓉活性物质对羟基自由基清除率评价方法的研究

羟基自由基（·OH） 在510 nm处有最大吸收峰，是氧化能力较强的自由基，可与体内的脂肪等有机物大分子发生连续反应，引起机体损伤。抗氧化剂用量与·OH清除能力成正比，一般以水杨酸作为捕捉剂。·OH清除率最常用的检测方法是紫外可见分光光度法，目前还可用荧光法、电子自旋共振法、化学发光法、高效液相色谱法等方法。肉苁蓉活性成分具有清除·OH的能力，肖星辉等人[16]研究荒漠肉苁蓉总黄酮对·OH的体外抗氧化性，结果表明，荒漠肉苁蓉总黄酮可以有效清除·OH，其对·OH清除率最高可达35.9%。宋阳[18]采用荧光法对肉苁蓉中黄酮类化合物抗氧化性进行测定，其对·OH清除率为91.5%，结果表明肉苁蓉中黄酮类化合物具有很强的抗氧化性。王国卫等人[17]通过试验表明肉苁蓉多糖对·OH有良好的清除作用，且随浓度增大而增大。

2.3 肉苁蓉活性物质对ABTS+·清除率评价方法的研究

ABTS[2,2′-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐]在414 nm或734 nm处有最大吸收峰，具有还原性，易被氧化成相对稳定的蓝绿色水溶性ABTS+·，ABTS+·与抗氧化剂反应后溶液褪色，褪色越强，吸光度越低。溶液退色程度与溶液的抗氧化能力成正比。黄靖等人[19]采用超声酶法对肉苁蓉多糖ABTS+·的清除能力的测定，通过试验表明在50～1 000 mg/L范围内，肉苁蓉多糖锌配合物对ABTS+·的清除能力高于肉苁蓉精制多糖；当质量浓度为1 000 mg/L时，肉苁蓉多糖锌配合物对ABTS+·清除率达到36.83%。

2.4 肉苁蓉活性物质其他体外抗氧化活性的研究方法

肉苁蓉活性成分除了以上体外抗氧化研究方法外，还常用到总还原力测定（铁氰化钾法）、氧自由基吸收量的测定、抗氧化当量的测定、超氧自由基（O-2·） 清除能力的试验等体外抗氧化研究方法。

3 结语

近年来，专家学者们对肉苁蓉抗氧化活性进行了大量的研究，结果表明肉苁蓉在体内外可清除各种自由基，提高机体内抗氧化酶的活性[20]，体外抗氧化活性是用以评价抗氧化剂抗氧化活性的一种快速、简便、灵敏可行的方法[21]。肉苁蓉作为一种传统中药材，多年来的试验研究表明，肉苁蓉有重要的药用价值和经济价值，根据肉苁蓉所具有的药理作用等已研制出肉苁蓉产品有苁蓉总苷胶囊、苁蓉四倍丸[22]、复方苁蓉益智胶囊[23]等用于临床应用。

据阿拉善盟科技技术局获悉，从2014年正式启动了荒漠肉苁蓉申报新食品原料项目工作；2018年1月，国家卫计委下发通知公开征求意见，将肉苁蓉（荒漠）、党参等9种物质增补一批既是食品又是中药的物质进入食药物质目录，阿拉善荒漠肉苁蓉被列入拟重点研究的物质名单要求荒漠肉苁蓉试生产2年。未来可以通过一定的加工技术、微生物技术等来实现肉苁蓉有效成分的工业化生产，满足实际需要，解决资源破坏和浪费问题。因此肉苁蓉可以借鉴之前药品的开发经验发展保健类食品，其开发方面具有着广阔的前景。