内蒙古药品评价性抽验中肉苁蓉质量分析

张欣华 ，高 寒 ，王 嘉 ，袁新敏 ，王 栋 △

（1. 内蒙古自治区药品检验研究院·内蒙古自治区中蒙药标准研究重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010000；2. 上海医药集团青岛国风药业股份有限公司，山东 青岛 266510；3. 内蒙古自治区医疗器械检验检测研究院，内蒙古 呼和浩特 010020）

肉苁蓉是我国传统名贵补益类中药材，始载于《神农本草经》，列为上品，有“沙漠人参”之称［1］，多分布于内蒙古、新疆、甘肃、宁夏等荒漠地区［2-3］，味甘、咸，性温和，具有补肾阳、益精血、滋目清风、润肠通便功效，广泛用于治疗阳痿、不孕、腰膝酸软、筋骨无力、肠燥便秘等症［4-6］。其主要含有苯乙醇苷、木脂素、多糖、生物碱、挥发油等成分［7-13］，具有抗衰老、保肝、缓解疲劳、抗骨质疏松、润肠通便等多种生物活性［14］。2015 年版《中国药典（一部）》［15］收载的肉苁蓉为列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉Cistanche deserticolaY.C.Ma或管花肉苁蓉Cistanche tubulosa（Schenk）Wight 的干燥带鳞叶的肉质茎。为此，本研究中依据肉苁蓉项下规定，对内蒙古自治区内抽取的23 批肉苁蓉样品开展专项抽验工作，同时将采集及收集到的正品肉苁蓉药材与肉苁蓉含量测定结果合格的样品（简称检品）进行了特征图谱的对比分析，为全面评价肉苁蓉药材及饮片的质量提供了参考。现报道如下。

1 抽验情况

本次专项抽验中，收到内蒙古自治区9 个市（盟）、共23 批肉苁蓉，包括20 批饮片与3 批药材，涉及6 个省区市的22 家生产企业。其中，肉苁蓉12 批，管花肉苁蓉11 批。采集与收集15 批正品肉苁蓉和10 批正品管花肉苁蓉，经内蒙古自治区药品检验研究院王栋副主任中药师鉴定为正品。

2 方法与结果

2.1 法定标准检验

2.1.1 仪器与试药

仪器：ME5 型电子天平（德国赛多利斯公司，精度为百万分之一）；Mettler AE - 100 型电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司，精度为万分之一）；KQ-500DE 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，功率为500 W，频率为40 kHz）；20AT 型高效液相色谱仪（日本岛津公司）。

试药：松果菊苷对照品（批号为111670 - 201706，纯度为89.7%），毛蕊花糖苷对照品（批号为111530 -201713，纯度为92.5%），京尼平苷酸对照品（批号为111828 - 201604，纯度为97.4%），均购自中国食品药品检定研究院；肉苁蓉苷A 对照品（批号为MUST -18031504，纯度为95.84%），2′ - 乙酰毛蕊花糖苷对照品（批号为MUST-18031504，纯度为99.28%），异毛蕊花糖苷对照品（批号为MUST - 18083110，纯度为99.16%），均购自成都曼斯特生物科技有限公司；8-表马钱子酸对照品（上海钰博生物科技有限公司，批号为82509-41-9，纯度不低于98%）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为高纯水。

2.1.2 检查项目［15］及结果

性状：未发现不合格样品，但有2 批样品为肉苁蓉与管花肉苁蓉的混合品，其中大部分为管花肉苁蓉，掺有少许肉苁蓉。

薄层色谱鉴别：23 批肉苁蓉检验结果均符合规定，合格率为100%。供试品溶液薄层色谱图中，在与毛蕊花糖苷和松果菊苷对照品溶液色谱相应位置显相同颜色的荧光斑点。

水分：9 批管花肉苁蓉及2 批肉苁蓉与管花肉苁蓉混合品的结果均符合规定，12批肉苁蓉均不符合规定。

总灰分：23批肉苁蓉检验结果均符合规定。

浸出物：21 批肉苁蓉检验结果符合规定；其余2 批肉苁蓉为肉苁蓉与管花肉苁蓉的混合品，因《中国药典》中肉苁蓉及管花肉苁蓉浸出物限度分别为不得少于35.0%和25.0%，限度值不同，故无法判定2 批肉苁蓉混合品的结果。

含量测定：21批肉苁蓉检验结果符合规定；其余2批肉苁蓉为肉苁蓉与管花肉苁蓉的混合品。因《中国药典》中肉苁蓉及管花肉苁蓉含量测定限度分别为含松果菊苷（C35H46O20）和毛蕊花糖苷（C29H36O15）的总量不得少于0.30%和1.5%，限度值不同，故无法判定2批肉苁蓉混合品的结果。

检验结果：合格9 批，不合格12 批，2 批无法判定结果，不合格率为52.17%。不合格项目为检查项中的水分项，且不合格的均为肉苁蓉，管花肉苁蓉的水分项均合格。

2.2 肉苁蓉及管花肉苁蓉特征图谱研究

2.2.1 色谱条件

色谱柱：Alltima C18柱（250 mm × 4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）- 0.1%甲酸水溶液（B），梯度洗脱（0～22 min 时 5%A → 15%A，22～55 min 时 15%A →20%A，55～65 min时20%A → 15%A）；检测波长：237 nm；流速：1.0 mL/min；柱温35 ℃；进样量：10 μL。

2.2.2 溶液制备

取京尼平苷酸、8-表马钱子酸、松果菊苷、肉苁蓉苷A、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、2′-乙酰毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，稀释成质量浓度为0.2 mg/mL 的混合对照品溶液。取样品粉末（过4 号筛）1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，超声（功率为250 W，频率为40 kHz）提取30 min，放冷后用70%甲醇补足减失的质量，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.2.3 特征图谱建立

取2.1.2 项下含量测定结果合格的12 批肉苁蓉样品和9 批管花肉苁蓉检品粉末，按2.2.2 项下方法制备供试品溶液，按2.2.1 项下色谱条件分别进样测定，得各样品的高效液相色谱图，通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）软件进行分析，分别生成正品肉苁蓉及正品管花肉苁蓉的特征图谱。详见图1。

图1 高效液相色谱特征图谱A.Genuine Cistanche deserticola B.Genuine Cistanche tubulosaFig.1 HPLC characteristic chromatograms

2.2.4 特征峰标定

根据正品肉苁蓉及正品管花肉苁蓉特征图谱检测结果，分别各标定10 个共有峰。经过与对照品比对，可知2 号峰为京尼平苷酸，4 号峰为8-表马钱子酸，5 号峰为松果菊苷，6 号峰为肉苁蓉苷A，7 号峰为毛蕊花糖苷，8 号峰为异毛蕊花糖苷，10 号峰为2′-乙酰毛蕊花糖苷。

2.2.5 特征图谱分析结果

将12批检品肉苁蓉与正品肉苁蓉的特征图谱、9批检品管花肉苁蓉与正品管花肉苁蓉的特征图谱进行相似度计算，特征图谱匹配图见图2。各批检品管花肉苁蓉与正品管花肉苁蓉特征图谱的相似度为0.947～0.996，说明检品管花肉苁蓉与正品管花肉苁蓉相似度良好；各批检品肉苁蓉与正品肉苁蓉特征图谱的相似度为0.557～0.903，且大部分集中在0.555～0.667，说明检品肉苁蓉与正品肉苁蓉间存在一定差异。

图2 高效液相色谱叠加特征图谱A.12 batches of Cistanche deserticola samples tested and genuine Cistanche deserticola B.9 batches of Cistanche tubulosa samples tested and genuine Cistanche tubulosaFig.2 Superimposed HPLC characteristic chromatograms

为说明检品肉苁蓉与正品肉苁蓉有效成分含量的不同，分别计算各批检品肉苁蓉与正品肉苁蓉共有峰的总峰面积值（表1）。可知，15 批正品肉苁蓉共有峰总峰面积值的平均值（5 795 705）约为12 批检品肉苁蓉共有峰总峰面积值平均值（2 925 364）的1.98 倍，说明检品肉苁蓉中有效成分含量大量减少，品质变差。因正品肉苁蓉未经炮制，而检品肉苁蓉多为炮制品，故可能因炮制不当而造成肉苁蓉中有效成分的大量流失。

表1 12批检品肉苁蓉与15批正品肉苁蓉共有峰总峰面积Tab.1 Comparison of total peak area of common peaks between 12 batches of Cistanche deserticola samples tested and 15 batches of genuine Cistanche deserticola

3 讨论

通过本次专项抽验工作，发现存在同批肉苁蓉饮片中有肉苁蓉和管花肉苁蓉混合的现象，因药典中肉苁蓉及管花肉苁蓉浸出物及含量测定的限度不同，故无法判定这2项的结果。

检品肉苁蓉的含量测定项虽符合药典规定，但通过对检品肉苁蓉与收集的未经炮制的正品肉苁蓉特征图谱的比对发现，检品肉苁蓉的有效成分总量较收集的正品肉苁蓉的有效成分总量大量减少，可能由检品肉苁蓉的炮制不当所致。

综上所述，应建立药材专项抽样的长效机制；加强对肉苁蓉生产、加工、流通、使用多环节的监管，不断完善和修订标准方法；建立合理的机制，将评价抽验中发现的质量问题及时反馈给生产企业，保证肉苁蓉的质量，保障公众用药的安全性和有效性。