纤维支气管镜刷检结合液基细胞学检查在肺癌诊断中的价值

熊丹 汪凤凤



·肿瘤诊治·

纤维支气管镜刷检结合液基细胞学检查在肺癌诊断中的价值

熊丹 汪凤凤

目的 探讨液基细胞学检查(liquid based cytology test,LCT)在肺癌支气管镜刷检检查中的应用价值。方法 分析我院353例肺癌患者，对比气管镜刷检传统涂片细胞学检查和刷检液基细胞学检查和组织学检查，进行分型归纳，计算敏感度和分型符合率。结果 液基细胞学诊断肺癌的敏感度为73.65%，传统涂片诊断肺癌的敏感度为60.34%,两者差异有统计学意义。纤支镜刷检液基细胞学诊断肺癌分型与组织学活检病理有较高的一致性。其中鳞癌68.82%,腺癌84.69%,小细胞癌70.75%,大细胞癌75%;均优于传统涂片。结论 将液基细胞学技术运用于纤维支气管镜刷检细胞学检查可以提高支气管刷检诊断肺癌的阳性率, 而且与肺癌组织学分型的符合率较高。

纤维支气管镜检查在肺癌的诊断中作用重大，大多数中央型肺癌在支气管镜下可发现，支气管镜检查阳性率高。部分周围型肺癌也可通过远端刷检取得病理。组织活检与刷检同步进行可提高阳性率[1]。纤维支气管镜刷检运用普遍，但传统制片技术诊断率不高，液基细胞学检查是采用液基薄层细胞检测系统检测并进行细胞学分类诊断，最早应用于宫颈癌细胞学检查, 并使宫颈病变的检出率有了显著提高,目前已替代了传统宫颈涂片[2]。常规涂片由于血液、粘液、炎症等因素影响,常使样本模糊,存在假阴性可能。液基细胞检查提高了细胞样本的检测质量，可以明显提高癌变细胞的检测率[3]。现将支气管镜刷检同时进行液基细胞学检查和传统涂片细胞学检查，并与组织病理学检查结果对照，进行比较，探讨该方法在肺癌诊断中的应用价值。

资料与方法

一、材料

选取2012年01月01日-2015年01月01日期间在靖江市人民医院就诊经组织病理学(气管镜活检或手术病理 )确诊肺癌的353例患者，行纤维支气管镜检查包括活检及刷检。其中男性216例，女性137例，年龄38岁-76岁。鳞癌186例，腺癌83例，小细胞癌6例，大细胞癌3例。

二、方法

通过纤维支气管镜刷检常规涂片2张, 将采样刷头插入装有保存液的瓶中,然后往保存液瓶中加入消化液, 充分摇匀、震荡,静置30分钟, 离心收集细胞, 由湖北孝感亚光膜式离心制片机制片, HE染色。将细胞学诊断分为阴性，阳性。阳性者对瘤细胞按如下作出分型:鳞癌, 腺癌,小细胞癌，大细胞癌。对分型不清的肿瘤细胞及难以判断瘤细胞来源的可通过免疫细胞化学方法鉴别诊断。所有液基涂片标本与传统涂片对比。

三、统计学方法

应用SPPS19.0软件，采用χ2检验，P<0.05 有统计学意义。

结 果

一、 各种癌细胞的细胞形态

①鳞癌细胞：多单个散在，大小形状不等，可呈圆形、多边形、梭形，特点是胞质一般呈嗜酸性，有的明显角化，核圆形或不规则形，染色质均匀分布，常深染如墨水状，核仁不明显。(见图1、2)。

图1 鳞癌 传统涂片，HE染色×400

②腺癌细胞：常聚集成实性团，或有一定排列的腺样结构，细胞大小规律，胞质丰富，多呈嗜碱性，有的可见粘液空泡，细胞核多呈圆形，位于细胞中央或偏一侧，可互相重叠，染色质较细，核仁较显著。(见图3、4)。

图2 鳞癌 液基细胞学制片 HE染色×400

图3 腺癌 传统涂片，HE染色×400

图4 腺癌 液基细胞学制片 HE染色×400

③小细胞癌细胞：多松散聚集成堆，细胞小，胞质稀少如裸核状，核深染，呈圆形或雀麦形，有的呈短梭形或带棱角。(见图5、6)。

④大细胞癌细胞：多聚集成堆，或松散排列，细胞较大，呈圆形或多角镶嵌状，核圆形，位于细胞中央，可见明显核仁，但无鳞癌及腺癌的任何特征。

二、353例组织病理学确诊的患者中刷检液基细胞学诊断为癌的260例, 传统涂片诊断为癌的213例。液基细胞学的敏感度为73.65%，传统涂片的敏感度为60.34%,液基细胞学与传统涂片的敏感度的差异有统计学意义(χ2=14.15，P<0.01)。(见表1)。

图5 小细胞癌 传统涂片HE染色×400

图6 小细胞癌液基细胞学制片 HE染色×400

总计阳性阴性敏感度χ2P液基制片3532609373.65%传统涂片35321314060.34%14.15<0.01

三、刷检液基细胞学与传统涂片对各型肺癌诊断一致性的比较。

与组织学比较，刷检液基细胞学诊断符合率为鳞癌68.82%,腺癌84.69%,小细胞癌70.75%,大细胞癌75%;传统涂片诊断符合率为鳞癌57.53%,腺癌62.24%，小细胞癌69.23%。刷检液基细胞学与组织学活检有较高的一致性。其中液基细胞学在腺癌分型诊断率最高，明显优于传统涂片(χ2=12.669，P<0.01)；液基细胞学在鳞癌分型诊断率与传统涂片对比有统计学意义(χ2=5.096，P=0.024)；液基细胞学在大细胞癌分型诊断率与传统涂片对比有统计学意义(χ2=4.8，P=0.028)；液基细胞学在小细胞癌分型诊断率与传统涂片对比无统计学意义(χ2=0.037，P=0.848)。(见表2)。

表2 液基细胞学与传统涂片对肺癌诊断分型一致性的比较

讨 论

液基细胞学技术简称LCT，是近年来应用于临床细胞病理学诊断的一项新技术，是一种将脱落细胞保存在液体中，并通过特殊设备将细胞均匀分散贴附在载玻片上制成涂片的技术。利用全自动设备将细胞涂成均匀的薄层标本，大大减少阻碍视线的血液、粘液和炎细胞的数量，从而制成细胞分散的薄层样本。在宫颈等妇科标本中广泛应用并取得了较好的效果。纤维支气管镜检查是临床上最常用的诊断肺癌的方法，刷检传统涂片法发现癌细胞的阳性率低，采用LCT 技术检查能最大限度的收集肿瘤细胞并保持细胞的完整性，同时将红细胞破坏、炎细胞及粘液溶解，提高了制片质量，使肿瘤细胞容易被发现，细胞图像清晰可见，核仁等细胞结构清晰易见，三维立体感突出[4-5]，从而肿瘤细胞检出阳性率提高，明显高于刷检普通涂片。液基细胞学与传统细胞学评价方法保持一致，并且保持了生物特性、细胞结构的一致性。总结来说，与传统涂片相比，LCT有以下优点：①细胞平铺均匀，细胞形态结构保存完好，三维立体突出，不容易变形，细胞量充足。②涂片质量高，涂片背景清晰厚薄均匀，红细胞大多破坏消失，黏液丝溶解，炎细胞减少，异常细胞易被发现。我们的结果显示其灵敏度高于传统方法，具有统计学意义。刷检液基细胞学诊断有一定比例的假阴性，这主要是因为气管镜下不能直视的远端肿瘤病灶只能采取盲刷，极有可能刷不到肿瘤细胞[1]。文献报道[6-7]刷检液基细胞学检查在对肺癌分型的诊断方面亦有优势，尤其是腺癌。与本组实验结论相同。其主要原因在于腺癌细胞在传统涂片中和因炎症等因素刺激增生的正常细胞, 以及肺内组织吞噬细胞等，很难鉴别，但在液基制片中由于三维立体感明显，可见腺管状、乳头状排列而易诊断。液基制片中细胞显示清晰，背景干净，对比性强，即使单个鳞癌细胞也易发现，并且易于分型[8]。

综述所述，纤维支气管镜刷检液基细胞学检查不仅提高了刷检的阳性率，而且分型诊断亦有较高的准确率，值得推广应用于肺癌的诊断。

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214500 江苏 靖江，靖江市人民医院呼吸科

2016-04-28]