儿童青紫型与非青紫型先天性心脏病胸腺病理及免疫功能的对比观察

郭晨　艾凌云　胡淑霞

[摘要]目的 探討儿童青紫型与非青紫型先天性心脏病患者的胸腺病理及免疫功能，为疾病诊治提供依据。方法 选取2016年5月～2017年3月我院收治的30例青紫型先心病患儿（A组）与40例非青紫型先心病患儿（B组）作为研究对象。比较两组患儿的CD3、CD4、CD8、CD19、NK细胞及杀伤T细胞水平，观察比较两组的手术切除胸腺常规病理组织形态变化。结果 B组患儿的淋巴细胞计数、CD3、CD4、CD8、CD19、NK细胞及杀伤T细胞计数均高于A组，差异有统计学意义（P<0.05）。两组1～2岁患儿的淋巴细胞计数、CD3、CD4、CD8、CD19、NK细胞及杀伤T细胞计数均低于同组0～1岁患儿，差异有统计学意义（P<0.05）。两组患儿病理检查可见胸腺结构存在，皮髓境界清楚，皮质淋巴细胞丰富，髓质胸腺小体结构存在，间质无著变，B组1～2岁患儿可见少量星空现象和胸腺轻度萎缩，A组0～1岁患儿可见星空现象和胸腺轻度萎缩，A组1～2岁患儿可见较多星空现象和胸腺明显萎缩。结论 青紫型先心病患儿较非青紫型先心病胸腺萎缩明显而免疫功能降低，且先心病患儿胸腺萎缩和免疫功能低下随年龄增长而加重。

[关键词]儿童；青紫型；非青紫型；先天性心脏病；胸腺病理；免疫功能；对比

[中图分类号] R725.4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）11（b）-0067-04

[Abstract]Objective To investigate the pathology and immune function of thymus in children with cyanotic and non-cyanotic congenital heart disease，and to provide basis for the diagnosis and treatment of disease.Methods 30 patients with cyanotic congenital heart disease （group A） and 40 patients with non-cyanotic congenital heart disease （group B） treated in our hospital from May 2016 to March 2017 were selected as subjects.The CD3，CD4，CD8，CD19，NK cells and cytotoxic T cells counts in two groups were detected and compared.The hist opathological changes of thymus in two groups were observed and compared.Results The CD3，CD4，CD8，CD19，NK cells and cytotoxic T cells counts in group B were higher than those of group A，and the differences were significant （P<0.05）.The CD3，CD4，CD8，CD19，NK cells and cytotoxic T cells counts in children aged 1-2 years in both groups were lower than those of 0-1 years old children in the two groups，and the differences were significant （P<0.05）.Pathological examination resaults showed that both of the two groups had thymus structure exists，clear edge state，rich cortical lymphocytes，medullary thymus body structure exists，and no interstitial change，besides group B aged 1-2 years old children had small number of stars and thymus mild atrophy，group A aged 0-1 years old children had stars phenomenon and thymus mild atrophy，and group A aged 1-2 years old children had much stars and thymus atrophy.Conclusion Thymic atrophy in children with cyanotic congenital heart disease are severe than that of the children with non-cyanotic congenital heart disease，and immune function in children with cyanotic congenital heart disease are lower than those of the children with non-cyanotic congenital heart disease.And the thymic atrophy and immune function lowering of children with congenital heart disease are aggravated with age.

[Key words]Children；cyanosis；Non-cyanotic；Congenital heart disease；Thymus pathology；Immune functionendprint

先天性心脏病为心脏大血管畸形引发的血流动力学异常等现象，可分为青紫型和非青紫型，常可导致酸碱失衡、营养不良、感染等并发症而严重影响患儿健康[1-3]。而胸腺是对各种应激反应的敏感器官和免疫器官，已有研究表明先天性心脏病患儿胸腺退化早，且其手术治疗需切除胸腺[4-6]。因此，先天性心脏病手术可能影响患儿免疫功能和健康状况，而对先天性心脏病患儿胸腺和免疫功能变化进行观察，可能有助于对其进行正确诊治。因此，本研究选取我院收治的30例青紫型先心病患儿与40例非青紫型先心病患儿作为研究对象，分析比较了青紫型和非青紫型先天性心脏病患儿的胸腺病理变化以及免疫功能变化，旨在为青紫型和非青紫型先天性心脏病的诊治提供依据，具体报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2016年5月～2017年3月我院收治的30例青紫型先心病患儿（A组）与40例非青紫型先心病患儿（B组）作为研究对象。纳入标准：A组均经心脏超声确诊为法洛四联症，病情稳定无急性缺氧，口唇明显发绀；B组经心脏超声确诊为房间隔缺损、室间隔缺损、二尖瓣狭窄、主动脉狭窄等，且无明显口唇发绀。排除标准：两组均排除合并其他复杂心脏急性、合并电解质紊乱、急性感染、肝肾功能异常、心衰等患儿。本研究经我院医学伦理委员会审核及同意，患者家属均知晓本研究情况并签署知情同意书。两组患儿的性别、年龄、出生体质量等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1），具有可比性。

1.2方法

1.2.1治疗方法 所有患儿均根据具体病情择期手术治疗，由相关手术经验>3年的医师进行手术操作，并积极对合并疾病进行治疗。

1.2.2检测方法 两组均在入选时取股静脉血3 ml，采用流式细胞仪检测指标。比较两组CD3、CD4、CD8、CD19、NK细胞及杀伤T细胞水平，分别向血液标本中加入相应细胞单克隆抗体（北京同立海源生物科技有限公司提供）和1.5 ml红细胞裂解液（北京索莱宝科技有限公司提供），在艾本德离心机4℃环境中以5000 r/min转速和3 cm半径离心5 min，加入1 ml磷酸盐缓冲液后上CytoNova 流式细胞仪（北京博奥晶典生物技术有限公司）进行检测，具体检测操作严格按照试剂盒和仪器说明书引导进行。对手术切除胸腺进行HE染色观察比较两组手术切除胸腺常规病理组织形态变化，将手术获得的胸腺组织常规制成石蜡切片，切片以二甲苯和松节油透明脱蜡10 min，100%乙醇溶液脱苯2次，2 min/次，其后以95%、90%、80%、70%梯度酒精水化各1 min，苏木精染色10 min，1%盐酸乙醇分化15 s，0.5%伊红液染色2 min，70%、80%、90%、95%梯度酒精脱水各1 min，99%乙醇溶液脱水2次，5 min/次，二甲苯透明2次，2 min/次，中性树胶封片后在光学显微镜下随机选取6个视野（200×）进行观察。

1.3观察指标

比较两组患儿的CD3、CD4、CD8、CD19、NK细胞及杀伤T细胞水平，并观察比较两组手术切除胸腺常规病理组织形态变化。

1.4统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料采用率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1两组患儿免疫功能指标的比较

B组患儿的淋巴细胞计数、CD3、CD4、CD8、CD19、NK细胞及杀伤T细胞计数均高于A组，差异有统计学意义（P<0.05）。两组1～2岁患儿的淋巴细胞计数、CD3、CD4、CD8、CD19、NK细胞及杀伤T细胞计数均低于同组0～1岁患儿，差异有统计学意义（P<0.05）（表2）。

2.2两组患儿病理检查结果的比较

两组患儿病理检查可见胸腺结构存在，皮髓境界清楚，皮质淋巴细胞丰富，髓质胸腺小体结构存在，间质无著变。A组0～1岁患儿可见星空现象和胸腺轻度萎缩（图1），1～2岁患儿可见较多星空现象和胸腺明显萎缩（图2）。B组0～1岁患儿胸腺结构正常（图3），1～2岁患儿可见少量星空现象和胸腺轻度萎缩（图4）。

3讨论

近年来随着检查技术的不断发展，各类先天性畸形疾病的诊出率不断增加。先天性心脏病是新生儿常见先天性心脏急性疾病，其临床发病率较高，可分为青紫型和非青紫型两种，其中青紫型先天性心脏病病情复杂危重，需尽早进行手术干预以改善病情和预后[7-10]。因此，对青紫型和肺青紫型先天性心脏病进行及时有效地诊断以及治疗十分重要，而其临床诊治常以临床病理和实验室检查为参考。临床先天性心脏病切除术常需对其胸腺组织进行切除，而胸腺组织为免疫器官，采取切除治疗可能对患儿免疫功能等造成影响[11-12]。且已有研究表明，先天性心脏病患儿可出现胸腺发育异常和早期退化[13-15]。因此，对先天性心脏病患儿进行胸腺组织以及免疫功能变化的观察，可能有助于了解其具体病情，指导临床治疗以期改善疗效和预后，然而目前此方向研究甚少，尚需进一步研究证实。

本研究对先天性心脏病患儿进行了胸腺病理检查和免疫功能指标的流式细胞术检测，并进行了青紫型和非青紫型先天性心脏病患儿之间上述指标的比较。本研究结果提示，青紫型和非青紫型先天性心脏病患儿的胸腺病理检查均可见胸腺结构存在，皮髓境界清楚，皮质淋巴细胞丰富，髓质胸腺小体结构存在以及间质无著变，且非青紫型0～1岁患儿胸腺结构无明显异常，非青紫型1～2岁患儿已可见少量星空现象和胸腺轻度萎缩，青紫型0～1岁患儿即可见星空现象和胸腺轻度萎缩，青紫型1～2岁患儿则可见较多星空现象和胸腺明显萎缩，先天性心脏病患儿胸腺萎缩低下随年龄增长而加重，且青紫型患兒胸腺萎缩状况更严重。相对于青紫型先天性心脏病患儿，青紫型先天性心脏病患儿的CD3、CD4、CD8、CD19、NK细胞及杀伤T细胞水平均降低，且两组1～2岁患儿的淋巴细胞计数、CD3、CD4、CD8、CD19、NK细胞及杀伤T细胞计数等均低于其0～1岁患儿，差异有统计学意义（P<0.05），先天性心脏病患儿免疫功能低下，随年龄增长而加重，且青紫型患儿免疫功能低下状况更严重。因此，临床应尽早对先天性心脏病患儿进行诊治，而新出生婴儿需密切关注其变化，出现可疑青紫型者及时进行实验室、超声等检查确诊并及时干预以期改善疗效和预后，而采取措施改善先天性心脏病患儿的免疫功能可能有助于其疗效以及预后的改善。endprint

综上所述，先心病患儿胸腺萎缩和免疫功能低下严重，随年龄增长而加重，且青紫型病情较非青紫型病情严重，需及时有效治疗。然而本研究样本量偏小，术后缺乏长期疗效和预后观察，青紫型和非青紫型先天性心脏病胸腺和免疫功能差异需进一步研究探讨证实。

[参考文献]

[1]Munoz-López M，Hoskote A，Chadwick MJ，et al.Hippocampal damage and memory impairment in congenital cyanotic heart disease[J].Hippocampus，2017，27（4）：417-424.

[2]姜静，卞勇，侯慧艳，等.先天性心脏病患儿术前脑组织氧合的观察[J].上海交通大学学报（医学版），2017，37（4）：506-509.

[3]林苇嘉，侯文进，吴伟东，等.术后强化式呼吸道护理在胸腔镜体外循环下先天性心臟病患者中的应用[J].广东医学，2015，36（21）：3415-3417.

[4]Sabzi F，Eizadi B，Javid N，et al.Congenital thymic cyst in the retro cava position：a case report[J].Iran Red Crescent Med J，2015，17（9）：e15984.

[5]吴翠玲.体内诱导iPS细胞向胸腺上皮细胞分化的研究[D].广州：南方医科大学，2016.

[6]刘尚国，李汉臣，赵宝生，等.胸腺部分切除对心脏手术患儿围手术期免疫功能的影响[J].郑州大学学报（医学版），2010，45（5）：833-835.

[7]Nair A，Rajesh GN，Sajeev CG.Functional tricuspid stenosis：a rare presentation of suspected rhabdomyoma as congenital cyanotic heart disease[J].Cardiol Young，2017，27（4）：808-811.

[8]李青，张冲，许铁，等.围术期肺部感染先天性心脏病小儿CD64的表达及临床意义[J].江苏医药，2017，43（1）：29-32.

[9]杨望，温恩懿，胡斌，等.婴幼儿先天性心脏病合并认知及运动功能障碍的临床研究[J].第三军医大学学报，2015， 37（2）：164-166.

[10]赵小洁，耿玉兰，陈正立，等.青紫型先心病患儿血清hs-CRP和BNP水平的临床分析[J].河北医药，2014，36（12）：1790-1792.

[11]余咏潮，徐志云，徐激斌，等.先天性心脏病合并肺动脉瓣感染性心内膜炎的外科治疗[J].中国胸心血管外科临床杂志，2013，20（1）：103-104.

[12]陈晓.部分胸腺切除对婴幼儿心脏直视手术恢复的影响[J].中国实用医刊，2011，39（19）：82-83.

[13]谢瑶，郭建群，华瑛，等.DiGeorge综合征继发自身免疫现象长期随诊1例及文献复习[J].北京大学学报（医学版），2016，48（6）：1086-1089.

[14]Kanakis MA，Danias PG，Chatzis AC.Thymic cyst popping up in a patient with congenital heart disease[J].World J Pediatr Congenit Heart Surg，2016，7（3）：372-374.

[15]白晓明.儿童胸腺体积与病因分析及XIAP分子诊断方法建立[D].重庆：重庆医科大学，2011.

（收稿日期：2017-08-30 本文编辑：孟庆卿）endprint