加速溶剂萃取-凝胶渗透色谱-气相色谱质谱测定茶叶中7种农药残留

来福

(1.北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心, 北京 100026;2.上海屹尧仪器科技发展有限公司，上海 201108)

加速溶剂萃取-凝胶渗透色谱-气相色谱质谱测定茶叶中7种农药残留

孔维恒1刘鑫1云环1高峰1刘来福1陈向斌2齐娜2金晓静2皮娜2

(1.北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心, 北京 100026;2.上海屹尧仪器科技发展有限公司，上海 201108)

建立加速溶剂萃取-凝胶渗透色谱-气相色谱质谱法测定茶叶中7种农药残留的分析方法。样品用乙腈-二氯甲烷(V/V，1/1)作为溶剂，利用加速溶剂提取仪提取，提取液经过凝胶渗透色谱除去大分子杂质后，供GC/MS分析。添加浓度为0.5 μg时，回收率为79.2%～100.8%，相对标准偏差为3.15%～13.34%，方法具有自动化程度高、萃取效率高、净化效果好、精密度好，分析快速等优点，适用于茶叶中农药残留的日常检测工作。

加速溶剂萃取 凝胶渗透色谱 GC/MS 农药 茶叶

1 概述

茶叶以其抗癌、抗氧化、消除人体自由基等独特的保健功效，深受世人喜爱，已成为仅次于碳酸饮料和饮用水的世界第三大饮料。另一方面，随着人民生活水平的目益提高，人们对茶叶中农药残留等质量安全问题给予了高度关注。

加速溶剂萃取(ASE)是近几年出现的新的萃取技术。具有溶剂用量少，萃取时间短，萃取效率高的突出优点，是美国EPA的标准方法之一。然而，由于茶叶含有大量的色素、生物碱及酚类化合物等脂溶性物质，它们会在分析中形成干扰，降低分析仪器的灵敏度和使用寿命，从而影响最终分析结果，因此，样品萃取后，必须进一步进行净化处理。

凝胶渗透色谱(GPC)是利用多孔的凝胶聚合物将化合物按分子空间结构差异(分子量大小)进行选择性分离，不能进入凝胶孔隙的分子会很快随流动相洗脱，而能够进入凝胶孔隙的分子，则需要更长时间的冲洗时间才能够流出固定相，从而实现对不同组分的分离。利用加速溶剂萃取提取茶叶样品，提取液经过凝胶渗透色谱净化，利用气相色谱-质谱(GC/MS)进行定性定量分析，建立了茶叶中7种农药残留的分析方法。

2 材料与方法

2.1 样品

实验用茶叶样品经粉碎机粉碎后，混匀，密封，常温下保存，备用。

2.2 仪器与试剂

仪器：上海屹尧仪器科技发展有限公司FLEXI 全自动凝胶渗透色谱仪(配有400mm×25mm(内经)，内装BIO-Beads S-X3填料的净化柱)，用于样品中大分子杂质的净化；气相色谱-质谱仪，配有电子轰击离子源(EI)；分析天平，感量为0.0001g；离心机，最大转速为10000 r/min。

试剂：水为GB/T 6682规定的一级水；环己烷：色谱纯；乙酸乙酯：色谱纯；乙腈：色谱纯；二氯甲烷：色谱纯；正己烷：色谱纯；乙酸乙酯+环己烷(1+1，体积比)；乙腈-二氯甲烷(1+1，v：v)；毒死蜱、杀螟硫磷、三氯杀螨醇、水胺硫磷、三唑磷、氯氰菊酯、溴氰菊酯单个标准储备液100 mg/L；微孔过滤膜(尼龙)。

2.3 方法建立

称取5 g磨碎均匀的茶叶样品，移入加速溶剂萃取的34 mL萃取池中，用乙腈-二氯甲烷作提取溶剂，在10.34 MPa压力、100℃条件下，加热5 min，静态萃取5 min，循环1次。然后用池体积60%的乙腈-二氯甲烷冲洗萃取池，氮气吹扫100 s。萃取完毕，将萃取液转移到100 mL梨形瓶，40℃水浴中减压浓缩至近干，然后用适量乙酸乙酯+环己烷(1+1)溶解残渣后转移至10 mL容量瓶，用乙酸乙酯+环己烷(1+1)定容至10 mL，溶液高速离心后过0.45 μm滤膜，待凝胶色谱净化。

凝胶渗透色谱净化条件，见表1、表2。

表1 全自动凝胶净化方法程序表(进样) 流速：5mL/min

表2 全自动凝胶净化方法程序表(收集)

收集液于40℃水浴旋转蒸发至约5mL，将浓缩液转移至15mL离心管中，氮吹浓缩至近干，加入1 mL的正己烷溶解残渣，混匀，供气相色谱-质谱测定。

气相色谱-质谱条件：色谱柱：DB-5MS 30m×0.25mm×0.25μm；柱温(程序升温)：70℃保持3分钟，15℃每分钟升到180℃，保持2min，10℃每分钟升到280℃，保持10min；进样口温度：250 ℃；进样口压力：77 kPa。流速：1.0 mL/min；分流比：不分流；进样量：1.0 μL。

2.4 线性关系

5 mg/L混合标准溶液配制：

分别从浓度为100 mg/L的毒死蜱、杀螟硫磷、三氯杀螨醇、水胺硫磷、三唑磷、氯氰菊酯、溴氰菊酯标准储备液中，各移取0.5 mL于10mL容量瓶中，正己烷定容至刻度，配制成浓度为5mg/L的10种农药混合标准溶液，避光，0～4℃保存。

基质混合标准工作溶液配制：

用空白样品基质溶液配制成浓度分别为0.03，0.05，0.1，0.2，0.3mg/L的混合标准工作溶液，用于标准工作曲线的绘制。具体结果见表3。

表3 7种农药线性方程

2.5 加标回收率

在茶叶样品中加入0.5 μg的混合标准溶液，重复进样7次，采用基质标准曲线定量，检测数据及RSD见表4。

表4 7种农药测定结果

续表4

3 结论

使用国产凝胶净化系统对茶叶中7中农药残留进行了提取，使用建立了使用凝胶色谱-气相色谱-质谱法检测茶叶中农药残留的方法。该方法具有自动化程度高，萃取效率高、净化效果好、精密度好，分析快速等优点，适用于茶叶中农药残留的日常检测工作。

[1] GPC-SPE净化/GC-MS测定茶叶中的有机磷残留；王耀(东莞市海洋与渔业环境监测站)

[2] GBT 23376-2009 茶叶中农药多残留测定 气相色谱/质谱法

DeterminationofsevenpesticideresiduesinteabyGC/MScombinedwithdomesticgelpermeationchromatographcleanup.

KongWeiheng1,LiuXin1,YunHuan1,GaoFeng1,LiuLaifu1ChenXiangbin2,QiNa2,JinXiaojing2,PiNa2

(1.BeijingEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Beijing100026,China; 2.PreeKemScientificInstrumentsCo.,Ltd.,Shanghai201108,China;)

Acetonitrile-DCM (V/V,1/1) was employed as the solvent in accelerated solvent extraction. The extraction was purified by gel permeation chromatography (GPC) to remove macromolecular impurities and then followed by GC/MS analysis. The results showed that the recoveries were within 79.2%-100.8% and the RSD results were in the range of 3.15%-13.34% based on 0.5 μg standard addition. The method is fast，accurate，highly automated and applicable in daily tea analysis.

accelerated solvent extraction; gel permeation chromatography, GC/MS; pesticide; tea

国产分析仪器验证与综合评价市场化推广研究与实践(Z161100003016006)

10.3969/j.issn.1001-232x.2017.05.032

2017-08-25

孔维恒，北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心。

刘来福，北京出入境检验检疫局科技处。