中药挥发油混合物体外抑杀人体蠕形螨活性的研究

孙 艳 王海兰 史春丽 孙 艳* 刘继鑫

（齐齐哈尔医学院，内蒙古 齐齐哈尔 161006）

中药挥发油混合物体外抑杀人体蠕形螨活性的研究

孙 艳 王海兰 史春丽 孙 艳* 刘继鑫

（齐齐哈尔医学院，内蒙古 齐齐哈尔 161006）

目的观察中药挥发油混合物体外抑杀人体蠕形螨效果。方法采用挤压黏贴法获取人体蠕形螨，室温镜下观察中药挥发油混合物对两种人体蠕形螨的体外抑杀作用。结果中药挥发油混合物对两种人体蠕形螨均有较好的抑杀效果，尤其是皮质蠕形螨的抑杀效果更佳。结论 中药挥发油混合物具有良好的体外抑杀人体蠕形螨作用。

中药挥发油混合物；人体蠕形螨；抑杀

人体蠕形螨（human demodex）是一种条件致病螨。包括毛囊蠕形螨（D.f）和皮质蠕形螨（D.b）两种，可分布于全身各部位，但常见于皮脂腺分泌旺盛的颜面部，尤其是鼻尖、鼻翼、鼻唇沟处。绝大多数感染者不会出现明显的临床症状，偶尔感觉感染部位痒，感染严重者可引起皮肤暗淡无光，毛囊扩张、毛孔粗大等皮肤粗糙老化现象，少数人则会引起螨性的痤疮、睑缘炎、毛囊炎、酒渣鼻、外耳道瘙痒症等疾病。严重影响人的容颜，甚至身心健康。目前尚无理想的杀螨药物。本研究以单独一味挥发油杀螨研究基础上选用中药挥发油混合物对两种人体蠕形螨进行体外抑杀作用的实验研究，为进一步的开发高效的杀螨类药物提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 药品：花椒、枳壳、桂皮各50 g。

1.1.2 主要仪器与试剂：载玻片、PP-243超透文具胶带、粉碎机（6202）、蒸馏水提前装置、取螨器、挥发油提取装置、干燥剂等。

1.2 方 法

1.2.1 挥发油的提取：取花椒、枳壳、桂皮各50 g，粉碎后过2号筛，用蒸馏水浸泡10 h后，装入挥发油提取装置，提取挥发油，经无水硫酸钠干燥后搅拌混合后置棕色瓶内备用。

1.2.2 中药挥发油混合物体外抑杀人体蠕形螨的实验方法：采用挤压黏贴法获取受检者面部的蠕形螨，动作需轻柔，防止交叉感染，在室温下进行抑杀人体蠕形螨实验，具体操作为：用双手食指挤压感染者面部皮肤，将毛囊内皮脂腺挤出，然后用透明胶带黏贴，并倒黏贴（黏面向上）于载玻片上，放置于显微镜下，适应室温2 min后开始查找活螨，发现后调整视野，使活螨位于视野正中央，区分人体蠕形螨的种类并记录，实验对象的选择标准为，成熟螨种且活动度良好，活动度的判定一般以四对足和螯肢的活动频率≥15次/分视为良好。选定对象后在200倍光学显微镜下开始给药，然后迅速转至400倍光学显微镜下观察并记录螯肢与4对足的运动情况，连续观察2 min不动者初步判定死亡，用针刺激仍不动者可确认死亡，各选择15只活动度良好的两种人体蠕形螨为研究对象，设定生理盐水为空白对照组。

1.2.3 统计学方法：药物杀螨时间从开始给药到刺激后螨体不动为止，用“均数±标准差”表示，P＜0.05差异具有统计学意义。。

2 结 果

2.1 加入中药挥发油混合物前后两种人体蠕形螨活动度的变化比较：加药前，两种人体蠕形螨在室温下活动频率均一，未发生大幅度的运动，螯肢及4对足爪间歇性的进行运动，平均每只足爪和螯肢的运动频率在18次/分左右，且虫体未发生扭曲及翻转；加入中药挥发油混合物后，虫体受到挥发油的突然刺激，运动加剧，螯肢及4对足爪由间歇性运动变为持续不间断的运动，运动频率超过30次/分，身体开始大幅度扭曲，时而伸展，时而收缩，甚者不停翻转螨体，在经历了短暂的亢奋状态后，虫体运动形态逐渐恢复至给药前，然后逐渐减慢，停止，最后判定死亡（图1～4）。

图1 给药前

图2 给药后，虫体翻转

图3 给药后，虫体收缩

图4 给药后，虫体死亡

2.2 加入中药挥发油混合物后两种人体蠕形螨死亡时间比较：通过对中药挥发油混合物及生理盐水体外抑杀两种人体蠕形螨的实验观察发现：中药挥发油混合物对皮脂蠕形螨的体外抑杀时间为（8.94±0.43）min；对毛囊蠕形螨的体外抑杀时间为（17.12±0.14）min；对照组生理盐水对毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨抑杀时间均超过240 min以上。

3 讨 论

目前对体外抑杀人体蠕形螨的药物报道较多，皮肤科在治疗蠕形螨病时多采用西药，最常见是甲硝唑[1]；其次是扑灭司林[2]和依维菌素[3]等，但长时间应用西药治疗会引起不同程度的不良反应等缺点，如甲硝唑会引起恶心、呕吐等不良发应。而作为天然药物的中药具有绿色、安全、无污染、不良反应小的优点，对治疗人体蠕形螨病意义重大，国内部分专家学者进行了研究，近年来中药治疗蠕形螨病的报道主要有风精油[4]、薄荷油[5]、桂枝挥发油[6]、桉叶油[7]等，对抑杀人体蠕形螨具有一定的疗效。

花椒、桂皮和枳壳单味挥发油均有较好的体外抑杀人体蠕形螨疗效。对皮脂蠕形螨的体外抑杀时间分别为（6.89±0.56）min、（6.96±0.63）min、（10.72±0.83）min；对毛囊蠕形螨的体外抑杀时间分别为（12.98±0.58）min、（13.52±0.73）min、（21.72±0.84）min[8-10]；本实验将三种挥发油混合后进行抑杀人体蠕形螨活性研究，拟寻找挥发油复合物的杀螨效果，实验结果表明，三种中药挥发油对两种人体蠕形螨具有较强的抑杀作用，并且对皮脂蠕形螨的抑杀作用明显强于毛囊蠕形螨，而且与对照组相比优越性极为明显，但与单味挥发油的抑杀效果比较，没有优势，仅优于枳壳挥发油的杀螨效果，须进一步研究，找到最佳的组合方式。

[1] Junk AK,Lukacs A,Kampik A.Topical administration of metronidazole gel as an effective therapy alternative in chronic Demodex blepharitisa case report[J].Klin Monatsbl Augenheilkd.,1998,213(1):48-50.

[2] Kocak M,Yagli S,Vahapoglu G.Permethrin 5% cream versus metronidazole 0.75% gel for the treatment of papulopustular rosacea.A randomized double-blind placebo-controlled study[J].Dermatology,2002,205(3):265-270.

[3] Forstinger C,Kittler H,Binder M.Treatment of rosacea-like demodicidosis with oral ivermectin and topical permethrin cream[J].J Am Acad Dermatol,1999,41(5 Pt 1):775-777.

[4] 吴仪,刘蓬飞,杨玉荟,等.风油精对蠕形螨体外抑杀效果观察[J].医学动物防制,2015,31(2):129-131.

[5] 李航,韩文艳,玉波腊,等.薄荷油外用治疗人体蠕形螨的疗效研究[J].昆明医学院学报,2011,32(7):102-103.

[6] 尹晓燕.不同剂量桂枝挥发油对人体面部蠕形螨虫杀灭作用比较研究[J].辽宁中医药大学学报,2015,17(12):109-111.

[7] 赵亚娥,郭娜,李琛,等.桉叶油对两种蠕形螨的体外杀虫作用[J].中国媒介生物学及控制杂志,2006,17(6):461-464.

[8] 蒋丽艳,刘继鑫,张浩,等.花椒挥发油对两种人体蠕形螨的体外抑杀作用[J].医学研究杂志,2009,38(2):78-79.

[9] 孙艳宏,刘继鑫,张浩,等.桂皮挥发油对两种人体蠕形螨的体外抑杀作用[J].热带病与寄生虫学,2009, 7(1):12-19.

[10] 刘继鑫,王克霞,李朝品,等.枳壳油体外抑杀人体蠕形螨观察[J].中国人兽共患病学报,2008,24(4):485.

Anti-mite Activity on the Volatile Oil Mixture of Traditional Chinese Medicine for Demodex

SUN Yan, WANG Hai-lan, SHI Chun-li, SUN Yan*, LIU Ji-xin
(Qiqihar Medical University, Qiqihar 161006, China)

ObjectiveTo observe the effect of the volatile oil mixture of traditional Chinese Medicine in killing demodex in vitro. Method The mites were collected with adhesive cellophane tape technique. The killing effect on human demodex was investigated by microscope with the volatile oil mixture.Results The volatile oil mixture was highly powerful to kill D.f and D.b in vitro, and to the D.b the killing effect is better.ConclusionThe volatile oil mixture of traditional Chinese Medicine is an effective component in killing demodex in vitro.

The volatile oil mixture of traditional Chinese Medicine; Human demodex; Kill

R-33

B

1671-8194（2017）28-0029-02

黑龙江省大学生创新训练项目（201611230047）

*通讯作者:E-mail: 648841978@qq.com