针刺背俞穴对CAG模型大鼠胃泌素、胃动素、表皮生长因子的影响*

左 甲，杨改琴，秦彩娟，毕宇峰

陕西省中医医院( 西安 710003)

针刺背俞穴对CAG模型大鼠胃泌素、胃动素、表皮生长因子的影响*

左 甲，杨改琴，秦彩娟，毕宇峰△

陕西省中医医院( 西安 710003)

目的：观察针刺背俞穴对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠胃泌素(GAS)、胃动素(MOT)及表皮生长因子(EGF)的影响。方法：将60只SD大鼠分为空白组、模型组、西药组、针刺组。空白组、模型组以生理盐水灌胃；西药组以西药灌胃；针刺组针刺背俞穴，检测GAS、MOT、EGF的含量。结果： 模型组GAS、EGF均低于空白组(P<0.05)，西药组、针刺组GAS、EGF均高于模型组(P<0.05)； 模型组MOT高于空白组(P<0.05)，西药组、针刺组MOT均低于模型组(P<0.05)。结论：针刺背俞穴可使CAG模型大鼠GAS、EGF含量增加，降低MOT含量，表明其可能是通过调节GAS、MOT、EGF的水平达到保护胃黏膜的目的。

胃作为人体的消化器官，也是内分泌器官，其分泌的胃肠激素在调节胃肠功能中，也起到重要作用[1]。而针刺背俞穴作为治疗慢性萎缩性胃炎(Chrounic atrophic gastritis，CAG)的一种中医特色疗法，该疗法是怎样影响胃肠激素分泌的同时，改善受损胃黏膜的血流供应，对受损的胃黏膜进行保护与修复，从而发挥其临床作用的呢？本课题组选用SD大鼠进行CAG模型建立，观察针刺背俞穴后，大鼠血清胃泌素(Gastrin，GAS)、胃动素(Motilin，MOT)及表皮生长因子(Epidermal growth Factor，EGF)的表达情况，探索其作用机制。

材料与方法

1 动物选择 SD大鼠：SPF级，12周龄，280±20g。

2 主要试剂 Rat GAS ELISA Kit、Rat MOT ELISA Kit、Rat EGF ELISA Kit(南京建成生物工程研究所)。克拉霉素(国药准字H2005149);甲硝唑(国药准字H42021947);奥美拉唑(国药准字H20064032)。

3 实验方法

3.1 实验动物分组:将60只SD大鼠分为空白组、模型组、西药组、针刺组。

3.2 CAG大鼠造模方法:以0.1%氨水、MNNG溶液(200 μg/ml)灌胃6周，再将50%酒精和0.5%氨水混合，与MNNG溶液(200 μg/ml)交替灌胃6周，造模完毕[2]。

3.3 干预方法:空白组：以生理盐水灌胃(2 ml/次)。模型组：造模后，以生理盐水灌胃(2 ml/次)。西药组：造模后，以奥美拉唑(0.44 mg/kg)、克拉霉素(6.92 mg/kg)、甲硝唑(7.6 mg/kg)灌胃。针刺组：造模后，采用实验大鼠固定器将实验动物进行常规固定，待实验动物呈安静状态时，于“脾俞”、“胃俞”、“肾俞”、“肝俞”、“膈俞”等穴[3]进行针刺，深度约5 mm，留针15 min。疗程：以上各组干预均为1次/d，共30次。

3.4 样本采集与指标检测:干预结束后，将实验动物用水合氯醛进行麻醉，然后对麻醉状态良好的实验动物进行心脏采血，将采集的血样进行常温放置15 min后，以3500转/min的转速进行离心，将分离完成的血清样本分别按照GAS、MOT、EGF等检测指标ELISA Kit的使用说明进行操作，完成检测指标测定。

4 统计学方法 使用SPSS 16.0统计学软件。其中，所有数据用均数±标准差表示，多组比较用单因素方差分析，组间比较用LSD法进行分析，以P<0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 大鼠血清GAS含量 见表1。由表1可知，模型组较空白组明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)。西药组、针刺背俞穴组均高于模型组，差异均有统计学意义(P<0.05)。

表1 大鼠血清GAS含量(pg/ml)

注：与空白组比较，★P<0.05；与模型组比较，☆P<0.05

2 大鼠血清MOT含量 见表2。由表2可知，模型组较空白组明显增高，有统计学意义(P<0.05)。西药组、针刺背俞穴组均低于模型组，均有统计学意义(P<0.05)。

表2 大鼠血清MOT含量 (pg/ml)

注：与空白组比较，★P<0.05；与模型组比较，☆P<0.05

3 大鼠血清EGF含量 见表3。由表3可知，模型组较空白组明显下降，有统计学意义(P<0.05)。西药组、针刺背俞穴组均高于模型组，均有统计学意义(P<0.05)。

表3 大鼠血清EGF含量(pg/ml)

注：与空白组比较，★P<0.05；与模型组比较，☆P<0.05

讨 论

目前，治疗慢性萎缩性胃炎的胃三联疗法有其局限性，体现为胃三联疗法中应用的抗生素，可能会对胃部产生不适，且易形成耐药性，使得根治失败。因此，寻求绿色有效并可靠的替代疗法，是现阶段共同努力的方向。

根据古代经典和现代报道可知，祖国医药和针灸疗法均能有效改善本病的症状。其中，针刺背俞穴疗法是我科名老中医付永民主任医师治疗慢性萎缩性胃炎的临床经验[4]。《素问·长刺节论》载：“迫藏刺背，背俞也”。指出背俞穴的所在，不仅是位于背部，还接近于内脏，对背俞穴进行针刺后，不仅能够直接的反应疾病的情况，还可以调整脏腑经气的盛衰，起到防治疾病的目的。

通过对背俞穴的解剖发现，背俞穴附近有相应节段的植物神经穿行，且其定位几乎重叠于或接近于脊旁节段神经节等组织。已有研究显示，对背俞穴进行针刺后，可以通过针刺的良性刺激，提高针刺背俞穴的相应脊髓节段控制区域的神经兴奋性。

研究表明，GAS、MOT是在调节胃肠功能的调节中，起着重要作用的胃肠激素[1]。GAS不仅能促使分泌胃酸和胃蛋白酶[5]，还可使胃黏膜进行再生，改善胃肠道蠕动机能，加速胃排空。而MOT作为胃窦和小肠上皮细胞分泌的一种肽类激素，其分泌周期具有波动的特性，其分泌周期的波动可以影响胃蛋白酶的分泌，从而调节胃黏膜蛋白质的合成，造成胃肠道功能紊乱，使得CAG伴发溃疡的可能性增大，且常规药物治疗，难以有效控制这一情况的发生[6]。

本研究结果显示，对CAG模型大鼠背俞穴进行针刺，不仅可以提高血清GAS含量，同时，还降低了血清MOT的水平。说明，对慢性萎缩性胃炎机体的背俞穴进行针刺，可以总体调节脾、胃、大肠等脏腑经气，改善实验动物的症状，并通过调节神经兴奋性影响胃肠激素的释放，以升高GAS、降低MOT的形式，改善胃窦黏膜的营养状态和血流供应情况，改善G细胞分泌功能，增加胃蛋白酶的合成，修复受损胃黏膜。同时，针刺通过调节GAS、MOT的分泌，改善胃肠道的蠕动功能，加速胃排空，缩短致炎因子在胃肠道内的滞留时间，减轻胃肠道负担。

此外，根据本研究结果可知，进行CAG模型建立后，大鼠的血清EGF的含量有所下降，说明大鼠胃黏膜在造模过程中受损。在前期的研究中，我们也证实了这一结果。而EGF不仅对受损的组织细胞有很强的刺激分裂作用，从而促使黏膜修复以及促进受损表皮进行再生，还有消炎镇痛的作用。秦蔚等人研究表明[7]，对CAG患者的足三里穴进行针刺治疗后，患者血清中的EGF含量随之发生变化，并呈时间-剂量效应，使受损表皮及胃黏膜达到修复与再生功能的目的[8-9]。本研究结果显示，经过针刺背俞穴及西药常规治疗后，CAG模型大鼠的血清EGF含量均较模型组有所升高，这与相关研究的结果基本一致。提示，对背俞穴进行针刺之后，可能是通过调节EGF的含量，抑制了胃酸的分泌的同时，改善了胃黏膜局部的血流供应，增加了胃黏膜黏液保护层的分泌，使得受损胃黏膜细胞修复与再生，最终达到保护胃黏膜的目的。

由此可知，针刺背俞穴调节脊髓相应节段控制区域的神经兴奋性的同时，影响胃肠激素GAS、MOT释放，来实现治疗目的。此外，针刺调节EGF的含量，也发挥了一定的作用。最终，从神经-体液层面，调节植物神经功能，改善胃黏膜供血，修复受损胃黏膜，促进胃肠蠕动等，以多途径的方式，达到保护胃黏膜，改善症状，取得临床疗效。

[1] 孟云霞，杨 华，余爱玲，等.胃泌素及T淋巴细胞在不同程度老年慢性萎缩性胃窦炎中的表达[J].包头医学院学报，2010，26(2)：46-47.

[2] 陈小野，邹世洁.大鼠CAG证病结合模型的造模方法和思路[J].实验动物科学与管理，2002，19(3)：35-36.

[3] 李忠仁.实验针灸学[M].北京：中国中医药出版社，2003，1：327-329.

[4] 刘 敏.付永民深刺背俞穴治疗慢性萎缩性胃炎的经验[J].陕西中医，2010，31(10)：1377-1378.

[5] 杨改琴，贾成文，左 甲，等.针刺背俞穴对CAG模型大鼠血清PGⅠ、PGⅡ的影响[J].中国中医基础医学杂志，2014，7(41)：962-963.

[6] Sakaguchi M，Takao M，Ohyama Y，etal.Comparison of PPIs and H2-receptor antagonists plus prokinetics for dysmotility-like dyspepsia[J].World J Gastroenterol，2012，18(13)：1517-1524.

[7] 秦 蔚，顾炳全.针刺慢性萎缩性胃炎患者足三里穴后血浆ET、NO、CGRP和EGF水平的检测[J].国际检验医学杂志，2015，17(26)：2512-2513.

[8] 李俊青，李 纯，刘 希，等.参七消痞颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠血清GH，EGF，GAS的影响[J].中国实验方剂学杂志，2013，12(51)：172-175.

[9] 苏凤哲，于文涛，杨牧祥，等.胃炎饮方对胃溃疡大鼠表皮生长因子和转化生长因子β1表达的影响[J].中医杂志，2015，5(20)：418-422.

*陕西省科技厅课题(2013JM4011、S2014SF3371、2014JQ2-8050、 2011K140502)

△通讯作者

胃炎, 萎缩性/针灸疗法 @背俞穴 胃泌素类 表皮生长因子 动物实验 大鼠

R737.3

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.11.059

(收稿：2017-06-02)