自体CIK联合rhIL-2对B细胞恶性淋巴瘤患者T 细胞亚群及β2 微球蛋白水平的影响

2017-11-07魏艳林张荣艳莫瑞滨纪德香

中国老年学杂志 2017年20期

关键词：自体淋巴瘤恶性

李蒲李菲魏艳林张荣艳莫瑞滨纪德香

(南昌大学第一附属医院血液科，江西南昌 330000)

自体CIK联合rhIL-2对B细胞恶性淋巴瘤患者T 细胞亚群及β2 微球蛋白水平的影响

李蒲李菲魏艳林张荣艳莫瑞滨纪德香

(南昌大学第一附属医院血液科，江西南昌 330000)

目的探讨自体细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)联合重组人白细胞介素(rhIL)-2对B细胞恶性淋巴瘤患者T 细胞亚群及β2 微球蛋白水平的影响。方法接受CIK联合rhIL-2治疗的46例B细胞恶性淋巴瘤患者为观察组，并选择同期未接受CIK联合IL-2治疗的46例B细胞恶性淋巴瘤患者为对照组。比较两组T细胞亚群、β2 微球蛋白、生活质量及临床疗效。结果治疗后，观察组CD3+、CD3+/CD8+、CD3+/CD56+水平均比同组治疗前及对照组高(P<0.05)；β2微球蛋白比同组治疗前及对照组低(P<0.05)；观察组临床疗效总缓解率高于对照组(P<0.05)；观察组躯体功能、角色功能、认知功能、情绪功能、社会功能得分均比同组治疗前及对照组高(P<0.05)。结论在B细胞恶性淋巴瘤患者中应用自体CIK联合rhIL-2方案效果显著，可有效改善T细胞亚群和β2微球蛋白水平，提高生活质量，且安全性高。

B细胞恶性淋巴瘤；细胞因子诱导杀伤细胞；白细胞介素-2；T细胞亚群；β2 微球蛋白

恶性淋巴瘤发病机制较为复杂，与病毒或细菌感染、免疫缺陷、遗传、环境等因素存在密切关系〔1〕。初诊淋巴瘤患者大约有50%以上在65岁以上，而由于淋巴瘤致死的患者65岁以上的大约占70%〔2〕。细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)是新类型免疫活性细胞，具有超强的增殖能力及细胞毒性，在抗肿瘤过继细胞免疫治疗中已得到广泛应用〔3〕。本研究拟分析自体CIK联合重组人对白细胞介素(rhIL)-2。

1 资料与方法

1.1一般资料选择2013年1月至2016年1月南昌大学第一附属医院接诊的接受CIK联合rhIL-2治疗的46例B细胞恶性淋巴瘤患者为观察组，并选择同期未接受CIK联合rhIL-2治疗的46例B细胞恶性淋巴瘤患者为对照组。纳入标准：①符合B细胞恶性淋巴瘤诊断标准〔4〕，并经手术及病理组织、常规免疫组化检查确诊；②观察组同意进行CIK细胞制备及相关治疗方案；③年龄60～90岁；④在纳入研究前已接受过多疗程其余方案治疗。排除标准：①伴有其余恶性肿瘤；②伴有神经系统、精神疾病；③伴有重要脏器功能、严重气质性疾病；④难以完成治疗。观察组男31例，女15例；年龄62～89〔平均(75.45±2.73)〕岁；弥漫性大B细胞淋巴瘤27例，黏膜相关淋巴组织淋巴瘤8例，淋巴浆细胞淋巴瘤6例，霍奇金淋巴瘤5例。对照组男29例，女17例；年龄61～88〔平均(75.53±2.71)〕岁；弥漫性大B细胞淋巴瘤25例，黏膜相关淋巴组织淋巴瘤10例，淋巴浆细胞淋巴瘤7例，霍奇金淋巴瘤4例。本研究已获得我院伦理委员会批准，两组性别、年龄、肿瘤类型无显著差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法自体CIK细胞制备方法：抽取患者54 ml清晨空腹静脉血，将样本中单个核细胞分离，放置无血清培养中，调整细胞浓度，加入2 000 U/ml的重组人干扰素(INF)-γ(规格：200万IU/瓶，厂家：上海凯茂生物医药有限公司，国药准字S20020040)，混匀后，放置透气性培养袋中，温度37℃，5%CO2。第2天，在培养液中加入rhIL-2(规格：100万IU/瓶，厂家：北京瑞得合通药业有限公司，国药准字S10980096)1 000 U/ml及抗人T细胞CD3单克隆抗体(anti-CD3McAb)(规格：复溶后每瓶1 ml包含5 mg单克隆抗体，厂家：武汉生物制品研究所有限责任公司，国药准字S19990012)50 ng/ml。

观察组在接受自体CIK联合rhIL-2治疗前1 w时，需先行胸腺五肽(规格：1 mg：1 ml，厂家：北京世桥制药有限公司，国药准字H20061223)的肌肉注射，20 mg/次，1次/d，连续1 w。之后调整为20 mg/次，3次/w；同时进行CIK细胞回输，2×109个/次，1次/w，rhIL-2皮下注射，100 mU/次，1次/d，连续10 d。2 w为1个疗程，中间间隔2 w后，再次制备CIK细胞，连续治疗8个疗程。

1.3观察指标 ①比较治疗前后T淋巴细胞亚群及β2微球蛋白的变化；②使用欧洲癌症研究与治疗协作组生存质量问卷-C30(EORTCQLQ-C30)〔5〕评分量表评价生活质量，总共30个条目，包括躯体、角色、认知、情感及社会5个邻域，得分越高，表示生活质量越好；③记录观察组治疗过程中毒副反应；

1.4疗效评定标准《实体瘤治疗疗效评定标准-RECIST》〔6〕，完全缓解：病灶完全消失，维持时间≥4 w；不确定完全缓解：不能确定属完全缓解还是部分缓解；部分缓解：肿瘤病灶得到30%以上的缩小，维持时间≥4 w；无变化：病灶缩小程度≤30%。

1.5统计学方法应用SPSS18.0软件进行t检验，χ2检验。

2 结果

2.1两组治疗前后T细胞亚群比较治疗前，两组CD3+、CD3+/CD8+、CD3+/CD56+水平无显著差异(P>0.05)；治疗后，观察组均比同组治疗前及对照组高(P<0.05)。见表1。

表1 两组治疗前后T细胞亚群比较

与治疗前比较:1)P<0.05；与对照组比较:2)P<0.05，同表3

2.2两组治疗前后β2微球蛋白比较治疗前，观察组和对照组β2微球蛋白〔(0.43±0.09)mg/dl、(0.45±0.08)mg/dl〕无显著差异(P>0.05)；治疗后，观察组〔(0.23±0.05)mg/dl〕比同组治疗前及对照组〔(0.34±0.07)mg/dl〕低(P<0.05)。

2.3两组治疗后临床疗效比较治疗后，观察组总缓解率高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 两组治疗后临床疗效比较〔n(%)，n=46〕

与对照组比较：1)P<0.05

2.4两组治疗后生活质量比较治疗前，两组生活质量各指标无显著差异(P>0.05)；治疗后，观察组躯体功能、角色功能、认知功能、情感功能、社会功能得分均比同组治疗前及对照组高(P<0.05)。见表3。

表3 两组治疗后生活质量比较

2.5观察组毒副反应治疗初期，3例有轻微乏力、低热现象，经对症处理后得到缓解，患者生命体征、血常规、肝肾功能均未出现明显变化。

3 讨论

近年来，有研究尝试提高B细胞恶性淋巴细胞瘤患者对化疗的敏感性和肿瘤的控制效果，但在远期疗效上效果不尽人意，主要原因和老年患者对大剂量化疗药物、化疗产生的毒性耐受性较差有关，降低了肿瘤控制效果〔7〕。目前较多研究将B细胞恶性淋巴瘤的研究重心转向生物治疗、免疫治疗等特殊治疗方案〔8〕。

CIK细胞主要是由患者自体外周血单个核心细胞经过rhINF-γ、rhIL-2、anti-CD3McAb共同诱导而成的一群异质细胞，其主要的效应细胞可共同表达2种膜蛋白分子(CD3、CD56)，因此，在进行回输自体CIK细胞后，可同时产生自然杀伤(NK)细胞的强大非组织相容性复合体(MHC)限制性消灭肿瘤效果和T淋巴细胞的强效抗肿瘤效果，可准确定位到肿瘤细胞上并将其杀死，对于恶性肿瘤细胞化疗后残留细胞效果显著，可有效防止肿瘤细胞复发，提高机体免疫力〔9〕。周毅〔10〕在非小细胞肺癌患者中应用CIK联合rhIL-2可上调机体免疫力，使CIK细胞活性增加。王若天等〔11〕在直肠和结肠癌患者中应用该方式也显示出该方式和提高免疫功能，缓解化疗不良反应，提高治疗效果和生活质量。但目前在B细胞恶性淋巴瘤中应用CIK联合rhIL-2的报道仍较少。本研究结果提示，该方式在清除微小残留灶、提高疾病缓解率上具有明显优势，并且证实自体CIK细胞回输后，可增加T细胞亚群免疫活性细胞的比例，这也是CIK细胞所产生的抗肿瘤效应、提高机体免疫力的关键因素。

β2微球蛋白是种相对分子质量较小的蛋白质，是细胞膜上完整组织相容性抗原中的部分。在人体中，β2微球蛋白水平十分恒定，容易通过肾小球滤过膜，大多数是由近曲小管以胞饮形式摄取，在局部被代谢降解，成为氨基酸〔12〕。β2微球蛋白和肿瘤负荷之间存在密切关系，有研究指出，广泛病变的患者β2微球蛋白水平明显比局限性病变的患者高，在排除肝、肾、自身免疫性疾病后，β2微球蛋白水平的增加可能提示骨髓存在浸润情况〔13〕。有学者提出，β2微球蛋白水平的持续增加，提示病情恶化，而肿瘤患者治疗后β2微球蛋白水平下降的患者，病情多已稳定〔14〕。本研究结果提示，在B细胞恶性淋巴瘤患者中应用自体CIK联合rhIL-2方案效果显著，可有效改善T细胞亚群和β2微球蛋白水平，提高生活质量，且安全性高。

1中国临床肿瘤学会,中华医学会血液学分会,中国医师协会肿瘤医师考核委员会,等.淋巴瘤免疫化疗乙型肝炎病毒再激活预防和治疗中国专家共识〔J〕.中国实用内科杂志,2014;34(1):32-9.

2刘伟红,李琳洁,许能文,等.化疗辅助吡柔比星治疗老年恶性淋巴瘤患者50例病例分析〔J〕.中国生化药物杂志,2014;34(2):105-6.

3陈娟,卢光琇.CIK细胞的生物特性和应用研究新进展〔J〕.肿瘤药学,2014;4(3):166-71.

4克晓燕.淋巴瘤诊疗手册〔M〕.北京:人民卫生出版社,2010:198-9.

5王建平,陈仲庚,林文娟,等.中国癌症病人生活质量的测定——EORTC QLQ-C30在中国的试用〔J〕.心理学报,2000;32(4):438-42.

6杨学宁,吴一龙.实体瘤治疗疗效评价标准--RECIST〔J〕.循证医学,2004;4(2):85-90，111.

7方文娟,李红,许能文.综合性护理干预对恶性淋巴瘤患者化疗后负性心理及生活质量的影响〔J〕.中国现代医生,2015;53(32):149-52,156.

8霍娜，吴朝，李俊，等.丙型肝炎病毒感染的弥漫大B淋巴细胞淋巴瘤1例〔J〕.中华肝脏病杂志,2016;24(11):867-8.

9滕家俊,周严,刘显勋,等.肺癌患者淋巴结内培养CIK细胞的抑瘤实验和临床前期研究〔J〕.中国癌症杂志,2015;25(9):665-70.

10周毅.IL-2联合CIK用于一线治疗后非小细胞肺癌患者的临床研究〔J〕.辽宁医学杂志,2015;29(2):68-70.

11王若天,孟明耀,李鹏,等.IL-2和IL-15诱导的CIK细胞联合化疗治疗直肠和结肠癌的临床疗效〔J〕.昆明医科大学学报,2014;35(11):97-101.

12王丕明,冯潍,许振宗,等.血清癌胚抗原、β_2微球蛋白和唾液酸联合检测在恶性肿瘤诊断中的应用〔J〕.山东医药,2014;54(24):72-3.