人参四逆颗粒对心力衰竭犬的保护作用

2017-11-07吴易航刘新宇王秋静吕文伟

中国老年学杂志 2017年20期

关键词：人参细胞因子颗粒

吴岩吴易航刘新宇邸琳刘洁王秋静刘芬吕文伟

(吉林省中医药科学院，吉林长春 130021)

1 华中科技大学同济医学院 2 吉林大学

人参四逆颗粒对心力衰竭犬的保护作用

吴岩吴易航1刘新宇邸琳刘洁2王秋静2刘芬2吕文伟2

(吉林省中医药科学院，吉林长春 130021)

目的观察人参四逆颗粒对比格犬心力衰竭的保护作用。方法普通级比格犬36只，麻醉开胸术后给予3%戊巴比妥钠溶液制备心力衰竭模型；十二指肠给予人参四逆颗粒，观察心脏重量指数，采血进行相关酶检测及各脏器病理学变化。结果人参四逆颗粒对心力衰竭犬可明显改善心脏重量指数，减低血管紧张素(Ang)-Ⅱ、脑钠素、心钠素、肿瘤坏死因子(TNF)-α、去甲肾上腺素、内皮素、白细胞介素1含量，可明显改善各脏器的病理学损伤。结论人参四逆颗粒能改善心力衰竭犬心脏重量指数，减轻神经内分泌细胞因子的损害，对犬心力衰竭有保护作用。

人参四逆颗粒；心力衰竭；血流动力学；细胞因子

人参四逆汤由红参、附子、干姜、甘草组成，又称“回阳饮”是中医回阳救逆的代表方剂，《伤寒论》等中医典籍皆有收藏。我们前期通过对人参四逆汤进行提取分离，配合相关药理实验结果〔1〕，确定了有效成分组成，研制成人参四逆颗粒，初步药效学试验证明人参四逆颗粒具有防治大鼠慢性心力衰竭作用。为进一步评价人参四逆颗粒的药理作用，为临床提供全面的药效学依据，本文探讨其对犬心力衰竭的保护作用。

1 材料与方法

1.1药品、试剂及仪器人参四逆颗粒由吉林省中医药科学院植化室制备，用蒸馏水配制成所需浓度；芪苈强心胶囊，批号：100701，用蒸馏水配制成0.32 g/kg，石家庄以岭药业有限公司生产;肝素钠，批号：110388上海惠世生化试剂有限公司生产；戊巴比妥钠，批号：080919北京化学试剂公司分装(德国进口)；犬肿瘤坏死因子(TNF)-α、心钠素(ANF)、血管紧张素(Ang)-Ⅱ、去甲肾上腺素(NE)、脑钠素(BNP)、内皮素(ET)-1、白细胞介素(IL)-1试剂盒为美国RD生物科学公司，上海源叶生物科技有限公司分装，产品批号均为20110802B。PowerLab 生物数据信号采集分析系统，澳大利亚ADInstruments国际科技有限公司；SC-3型电动呼吸机，由上海医疗设备厂生产；MFV-3200型电磁流量计，由日本光电公司生产；DNM-9602酶标分析仪，北京普朗新技术有限公司产品。 BT00-100M型微量恒流泵，保定兰格恒流泵有限公司生产。

1.2实验动物比格犬，普通级，体重8～12 kg，雌雄兼用，由福州振和实验动物技术开发有限公司提供，实验动物质量合格证号：0000972；许可证号：SCXK(闽)2007-0001。

1.3造模及给药方法 36只普通级比格犬，雌雄兼用，随机分为6组，每组6只，分别为对照组、模型组、芪苈强心胶囊组和人参四逆颗粒小、中、大剂量组。人参四逆颗粒按0.25、0.5、1 g/kg剂量，芪苈强心胶囊按0.32 g/kg剂量十二指肠给药，对照组和模型组予等体积生理盐水。按药理实验方法〔2，3〕操作，比格犬静脉注射30 mg/kg戊巴比妥钠溶液麻醉，背位固定在手术台，颈部正中部位切口，分离出气管插管后连接呼吸机；左侧颈静脉分离，连接微量恒流泵；右侧颈动脉分离，插管并连接压力换能器，测定动脉血压(BP)；再将比格犬右侧卧位固定，于第4肋间开胸，扩胸后暴露心脏，做心包床，小心分离出心脏主动脉根部和冠状动脉左旋支，放置口径适宜的血流量计探头，调整角度使其与血管紧密贴和，测量心输出量(CO)和冠状动脉血流量(CBF)。右侧股动脉分离，插心室导管进入心室，连接压力换能器，记录左室内压(LVSP)；上腹部开口，于十二指肠内留置导管备给药用；犬四肢连接心电电极，记录Ⅱ导联心电图。

1.4检测方法手术结束后观察记录各项指标，大约30 min，血流动力学指标稳定后记录数值。左侧静脉以0.5 ml·min-1·kg-1恒速输入3%戊巴比妥钠溶液，观察dp/dtmax值，降低到30%为心力衰竭模型〔4，5〕成功，指标稳定15 min后，分别给药。取动脉血离心，分离血清，检测ANF、BNP、Ang-Ⅱ、TNF-α、IL-1、ET-1 、NE含量(酶联免疫法)；剪取心脏称重量，计算心脏重量指数(心脏湿重/犬当日体重)；剪取犬脏器(心、肝、脾、肺、肾)置12%甲醛溶液固定，做光镜组织病理学检查。

1.5统计学方法采用SPSS18.0软件进行t检验。

2 结果

2.1人参四逆颗粒对心脏重量指数的影响模型组心脏重量指数(0.007 5±0.000 6)与对照组比较无显著差异(0.007 1±0.000 7，P>0.05)；小、中、大剂量人参四逆颗粒(0.006 9±0.000 6，0.008 1±0.000 6，0.007 3±0.000 6)和芪苈强心胶囊组(0.007 9±0.000 7)心脏重量指数与模型组比较无显著差异(P>0.05)。

2.2人参四逆颗粒对血清酶类的影响人参四逆颗粒各组均能减少Ang-Ⅱ、ANF、NE含量，与模型组比较中剂量组有明显差异(P<0.05,P<0.001)；人参四逆颗粒各组均能减少TNF-α、ET-1含量，大、中剂量组与模型组比较差异明显(P<0.05，P<0.01)；人参四逆颗粒各组均能减少动脉血中BNP含量，与模型组比较差异显著(P<0.01,P<0.001)；人参四逆颗粒各组均能减少动脉血中IL-1含量，与模型组比较中、小剂量组差异明显(P<0.05，P<0.001)。见表1。

2.3对脏器组织病理学影响模型组犬心脏表现为明显心室扩张，心肌细胞严重受累出现损伤表现。肺、肝、肾和脾瘀血，表现为部分肺泡腔内见水肿液和少量出血，大部分肺泡间隔增宽毛细血管明显扩张充血；大部分肝窦和肝小叶中央静脉扩张充血；肾间质血管轻度扩张充血，局部扩张充血明显加重；脾被膜大部分为平直状态。经人参四逆颗粒治疗后，各脏器瘀血明显减轻。心脏病理图片见图1。

表1 人参四逆颗粒对细胞血清酶类含量的影响

与模型组比较:1)P<0.05,2)P<0.01,3)P<0.001

图1 各组心脏病理图片(HE，×400)

3 讨论

心力衰竭是指由心脏结构或功能异常导致的心室收缩或舒张张力受损进而引起一系列的病理生理变化的临床综合征。在某种意义上慢性心力衰竭也是一种神经激素细胞因子网络失衡状态。心力衰竭时，交感神经系统和肾素血管紧张素系统被激活，儿茶酚胺、Ang-Ⅱ和醛固酮等神经激素和细胞因子释放增多，进而损伤心血管系统；同时心肌和血管自身也能合成和分泌一些神经激素及细胞因子，例如NE、Ang-Ⅱ、醛固酮、ET、生长因子和炎症细胞因子等，影响心肌和血管。这些有生物活性的神经激素的过度表达是造成心肌损伤、循环功能受损的原因之一〔6，7〕。目前西医治疗慢性心力衰竭的方法主要包括利尿剂、血管紧张素转化酶抑制剂、Ang-Ⅱ受体拮抗剂、β受体阻断剂和醛固酮受体拮抗剂等，新药的研究近年来进展不大〔8〕。而中医方面治疗对心力衰竭的辨证分型目前尚无统一的标准〔9〕。人参四逆汤是经典方剂，具有回阳固脱功效，在此基础上加减成方研究较多。人参四逆颗粒是由人参四逆汤提取分离精制而成，针对心力衰竭的临床表现，本实验证实其能减低神经内分泌细胞因子的损害，缓解心力衰竭的症状。这可能也是人参四逆颗粒治疗心力衰竭的机制之一〔10〕。

1徐雅娟，宋风瑞，赵洪峰，等.人参四逆汤抗休克作用的有效组分成分分析〔J〕.中草药，2002；33(5)：392-5.

2陈奇. 中药药理研究方法学〔M〕.北京：人民卫生出版社，1996：522-7.

3李仪奎.中药药理实验方法学〔M〕. 上海：上海科学技术出版社，1991：117-21.

4刘洁，孙文娟，吕文伟，等.人参皂苷Rg2与毒毛旋花子苷K的强心作用及毒性比较〔J〕. 中草药，2001；32(9)：809-11.

5李欣志，刘建勋，尚晓泓.参附强心胶囊对犬急性心力衰竭的保护作用〔J〕.中国实验方剂学杂志,2006；12(4)：29-31.

6吴易航，吴岩，刘新宇，等. 人参四逆颗粒对心力衰竭犬心脏血液流量的影响〔J〕.人参研究,2017；29(2)：11-3.

7胡大一，黄峻，马长生，等.心血管内科学高级教程〔M〕.北京：人民军医出版社，2009：165-6.

8郑刚. 新型心力衰竭治疗药物的研究进展〔J〕.世界临床药物，2016；37(9)：643-8.

9杜晓楠，宋晨薇，王晓峰. 中成药治疗心力衰竭的研究进展〔J〕.中成药，2017；39(4)：794-9.

10李显庆.苦参碱对慢性心力衰竭大鼠心功能和神经内分泌激素的影响〔J〕.现代中药研究与实践，2013；27(6)：40-3.

国家科技重大专项项目(2009ZX09103-447)

邸琳(1963-)，女，主任药师，硕士生导师，主要从事中药药理研究。