舟山海岛地区多重耐药鲍曼不动杆菌调查及替加环素对其药物敏感性研究

王辉　李略　李海峰

[摘要] 目的 分析舟山海島地区多重耐药鲍曼不动杆菌调查结果及替加环素对其药物敏感性的影响。 方法 收集我院2016年1月～2017年5月150例多耐药鲍曼不动杆菌感染患者的各类标本。采用调查表形式调查多重耐药鲍曼不动杆菌感染患者的临床情况，如年龄、性别、病种、基础疾病、病程、用药情况、抗菌药物使用频率、免疫状况、有无侵入性操作、药敏结果等，统计分析患者感染多重耐药鲍曼不动杆菌的危险因素、好发人群等。通过常规培养、分离筛选出多重耐药鲍曼不动杆菌菌株150例，予Kirby-Bauer纸片扩散法置入培养基（MH）中进行药敏试验。研究本地区多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素、头孢哌酮舒巴坦钠的耐药及抑菌率。采用空白组、替加环素组、舒普深组及替加环素+舒普深组对150例多重耐药鲍曼不动杆菌进行耐药及抑菌效果的观察及分析。 结果 通过分析发现，年龄大、合并多种疾病、恶性肿瘤、病程长、用药种类单一、抗菌药物使用时间长是患者感染多重耐药鲍曼不动杆菌的危险因素。替加环素组的耐药率和抑菌率为10.0%和90.0%、舒普深组的耐药率和抑菌率为20.0%和80.0%，替加环素+舒普深组的耐药率和抑菌率为4.6%和95.4%。 结论 替加环素对多重耐药鲍曼不动杆菌具有较高的敏感度，并且通过与舒普深的联合应用，能够减少其耐药性，从而有效治疗多重耐药鲍曼不动杆菌引起的疾病。

[关键词] 海岛地区；多重耐药鲍曼不动杆菌；替加环素；药物敏感性

[中图分类号] R446.5 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2017）23-0109-03

[Abstract] Objective To analyze the investigation results of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii in Zhoushan Island and the sensitivity of tigecycline to Acinetobacter baumannii. Methods Various types of specimens of 150 patients with multi-drug resistant Acinetobacter baumannii infection in our hospital from January 2016 to May 2017 were collected. The clinical status of patients with multiple drug-resistant Acinetobacter baumannii infection， such as age， sex， disease， underlying disease， course of disease， medication status， frequency of antimicrobial use， immune status， invasive operation， medication sensitive results was investigated by using the form of the questionnaire. The risk factors for multiple drug resistance of Acinetobacter baumannii infection in patients and good people were statistically analyzed.150 cases of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii strains were screened by conventional culture and isolated. And the drug susceptibility test was carried out by Kirby-Bauer paper diffusion placed into culture medium（MH）. The resistance and inhibitory rate of Acinetobacter baumannii to ticyclotaxel and cefoperazone sulbactam sodium in the region were studied. The antibiotic resistance and antibacterial effect of 150 cases of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii were observed and analyzed by blank group， tigecycline group， sulperazon group and tigecycline+sulperazon group. Results The analysis revealed that older age， combination with multiple diseases， cancer， longer duration， a single type of medication， long time of antibiotics use ere the risk factors for patients to be infected with multiple drug resistant Acinetobacter baumannii infection.The resistant rate and antimicrobial rate of the tigecycline group were 10.0% and 90.0%， respectively. The resistant rate and antibacterial rate of the sulperazon group were 20.0% and 80.0%， respectively. The resistant rate and antibacterial rate were 4.6% and 95.4% in the tigecycline+sulperazon group. Conclusion Tigecycline has a high sensitivity to multidrug-resistant Acinetobacter baumannii and its drug resistance can be reduced by co-administration with sulperazon， so as to effectively treat the diseases caused by multidrug-resistant Acinetobacter baumannii.

[Key words] Island region； Multiple drug-resistant Acinetobacter baumannii； Tigecycline； Drug sensitivity

随着临床抗菌药物以及免疫制剂的广泛应用，致病菌耐药成为一种普遍现象，给临床治疗带来了较大的问题[1]。鲍曼不动杆菌是一种常见的致病菌，且近些年来发现其耐药率不断提升，成为一种难治性细菌[2]。替加环素是一种新型广谱抗生素，对于耐药病菌有较好的应用效果。因此，文章主要针对舟山海岛地区多重耐药鲍曼不动杆菌调查结果及替加环素对其药物敏感性的影响展开分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料

收集我院2016年1月～2017年5月150例多耐药鲍曼不动杆菌感染患者的各类标本。入选标准：（1）在我院留取各类样本的患者；（2）入院住院时间超过48 h或在近30 d内有住院史的患者；（3）年龄30～90岁；（4）符合医院获得性肺炎诊断（依据中华医学会呼吸病学分会制定的HAP标准）[3]。排除标准：排除同一患者相同部位分离到的重复菌株[4]。

1.2 方法

1.2.1 分组方法 将分离得到的多耐药鲍曼不动杆菌菌株，扩增后分为空白组、替加环素组、舒普深组（头孢哌酮舒巴坦钠）及替加环素+舒普深组四组，空白组不添加任何药物，替加环素组单纯使用替加环素、舒普深组单纯使用头孢哌酮舒巴坦钠，替加环素+舒普深组联合应用替加环素和头孢哌酮舒巴坦钠，均在培养24 h后对其进行药敏检测。

1.2.2 药敏检测操作方法 无菌操作下采集、运送用于细菌培养的标本，实验室接收标本后依据《全国临床检验操作规程》的标准进行处理[5]。将分离后的标本常规接种于9 cm血平板中培养，24～48 h后观察是否有菌落生长。如发现菌落生长予进行分纯培养18～24 h，然后在分纯过夜新鲜培养的细菌平板上挑选4～5个形态相同的菌落，用3～5 mL无菌生理盐水中经比浊仪调整浓度至0.5麦氏单位（约1×108 CFU/mL）上细菌仪鉴定。经过18～24 h细菌仪检测后获得鲍曼不动杆菌，并将获得菌株再次进行分纯培养18～24 h（得到对数生长期）获得多重耐药鲍曼不动杆菌。然后挑选4～5个形态相同的菌落，用3～5 mL无菌生理盐水中经比浊仪调整浓度至0.5麦氏单位，用K-B纸片接种法置入药敏培养基（MH），并贴入药敏试片测试。

1.3 材料与设备

所需材料由郑州安图生物有限公司提供。使用设备：美国BD公司生产PHOENIX-100型全自动细菌鉴定和药敏测试仪。药敏培养基（MH）材料由法国梅里埃公司生产。药敏试片由英国Oxoid公司生产。

1.5 判断标准

参照美国FDA 制定的测量抑菌圈直径标准，经过18～24 h培养后用游标卡尺测量药物抑菌环的直径。

1.6统计学分析

采用SPSS16.0统计学软件进行统计学分析，计量资料用（x±s）表示，组间差异、组内差异比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 舟山地区多重耐药鲍曼不动杆菌调查分析

通过分析发现，年龄大、合并多种疾病、恶性肿瘤、病程长、用药种类单一、抗菌药物使用时间长是患者感染多重耐药鲍曼不动杆菌的危险因素，见表1、2。

2.2四组的耐药率和抑菌率比较

替加环素组的耐药率和抑菌率为10.0%和90.0%、舒普深组的耐药率和抑菌率为20.0%和80.0%，替加环素+舒普深组的耐药率和抑菌率为4.6%和95.4%，见表3。

3 讨论

鲍曼不动杆菌（Ab）为非发酵革兰阴性杆菌，广泛存在于自然界，为条件致病菌，是医院感染的重要病原菌，通过污染的环境、医疗器械以及带菌医护人员的手等环节在医院内传播及流行[6]。现阶段国内对多重鲍曼不动杆菌感染的危险因素调查研究成果较少，难以为临床预防鲍曼不动杆菌导致的院内感染提供科学依据[7]。本次研究经分析发现，年龄大、合并多种疾病、恶性肿瘤、病程长、用药种类单一、抗菌药物使用时间长是患者感染多重耐药鲍曼不动杆菌的危险因素，同时与老年患者的身体免疫机制和抵抗机制衰弱也有一定的相關性，加上在多种疾病的作用下，个体免疫功能异常，降低了抵抗致病菌入侵的能力[8，9]。

根据国内资料表明，Ab占临床分离的不动杆菌的70.0%以上，且对第3代和第4代头孢菌素的耐药率达63.0%～89.9%[10，11]。近年来多重耐药鲍曼不动杆菌感染在全球重症患者中日益普遍，且耐药率和病死率逐渐增高，已被冠名为“21世纪革兰阴性杆菌MRSA”[12，13]。全球细菌耐药监测数据库（SENTRY）的数据显示，不动杆菌位于HAP致病原的第5位，同时其对常用抗菌药物的耐药率也逐年增高[14]。美国2004～2005年76个医学中心的耐药监测显示，多重耐药鲍曼不动杆菌（MDRAB）占鲍曼不动杆菌临床分离株29.3%[15，16]。2012年中国 CHINET的监测资料显示，不动杆菌属（鲍曼不动杆菌占89.6%）对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为63.5%和68.2%，泛耐药株数量高达45.0%[17，18]。

本次研究中，替加环素组的耐药率和抑菌率为10.0%和90.0%、舒普深组的耐药率和抑菌率为20.0%和80.0%，替加环素+舒普深组的耐药率和抑菌率为4.6%和95.4%，这说明替加环素对多重耐药鲍曼不动杆菌具有较高的敏感度，并且通过与舒普深的联合应用，能够减少其耐药性发生，从而有效治疗多重耐药鲍曼不动杆菌引起的疾病。替加环素（tigecycline）为甘氨酰环素类抗菌药物的第一个品种，甘氨酰环素类为四环素类抗菌药物米诺环素的衍生物[19，20]。其两种主要耐药机制为外排泵和核糖体保护。对肠球菌、葡萄球菌、链球菌以及绝大部分革兰阴性杆菌都有较强的抗菌活性，由于其抗菌谱广、抗菌作用强，已经成为治疗多重耐药菌株的重要选择。

通过对多重耐药鲍曼不动杆菌的临床分布、易感因素、耐药特征及药敏情况等调查，了解替加环素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外敏感率，并与常规经典用药的耐药及微生物清除率对照，观察相关药物之间是否存在协同作用，为临床诊治提供参考。通过对多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性监测，及时准确地掌握本地区菌株耐药及敏感性，并为临床合理使用抗菌药物、防止滥用抗菌药物提供参考依据。通过对多重耐药鲍曼不动杆菌感染的危险因素分析，为早期经验性应用抗菌药物及预防院内感染提供科學依据。

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（收稿日期：2017-06-22）