福州市女性人乳头瘤病毒检测结果分析

朱爱兰 江芳华 魏建威

福州市女性人乳头瘤病毒检测结果分析

朱爱兰 江芳华 魏建威

目的调查福州市女性宫颈感染人乳头瘤病毒（HPV）现状以及HPV亚型的分布情况。方法对2 784例就诊女性采用核酸分子快速导流杂交基因芯片的方法进行HPV及其亚型检测。结果2 784例女性中HPV阳性760例，感染率27．30%；排在前5位的HPV高危亚型依次是 HPV52（23．95%）、HPV16（15．13%）、HPV58（14．08%）、HPV53（11．71%）、HPV68（11．32%）。HPV 单一感染 558 例（73．42%），二重感染143例（18．82%），三重感染43例（5．66%），四重感染11例（1．45%），五重感染4例（0．53%）六重感染0例（0%），七重感染1例（0．13%）。结论本地区 HPV 感染以 HPV52、HPV16、HPV58亚型为主。HPV分型检测及流行病学调查对指导本地区女性健康检查、治疗有重要意义。

人乳头瘤病毒；基因芯片；HPV亚型

人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一类双链闭合环状无包膜的DNA病毒，能够特异感染人体的皮肤以及黏膜[1]。HPV易感部位是女性的宫颈。HPV分为高危型、低危型两大类。HPV高危型包括15种亚型 （HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68），低危型包括6种亚型（HPV6、11、42、43、44、CP8304）。有报道显示，患宫颈癌的概率在感染单一HPV亚型时增加19.9倍，而在感染多重HPV亚型时增加31.8倍[2]。HPV多重亚型感染是能够促进宫颈病变发展的一个重要原因。因此，HPV感染的分型检测能积极有效指导临床防治宫颈癌。本研究对我院检验科收集的2 784份宫颈细胞刷片标本进行了HPV的21种亚型检测，旨在通过了解福州市女性就诊人群HPV感染及亚型分布情况，对该市女性人群的宫颈癌防治具有重要指导意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象

收集2015年1月1日—2016年12年31日在我院妇科、产科门诊就诊的患者宫颈刷片标本2 784份，患者年龄21～70岁。所有患者均为初次进行HPV检测。

1.2 试剂与仪器

博日的LITTLE GENIUS的PCR扩增仪；凯普生物化学有限公司的分子杂交仪和HPV分型检测试剂盒。

1.3 实验方法

1.3.1 标本采集 标本采用专用的宫颈刷沿患者宫颈口内同一方向旋转3～5圈，将采集了标本的宫颈刷放入装有细胞保存液的保存管中，旋紧保存管的管盖，作好标记送实验室检测。

1.3.2 DNA分离提取 采用凯普基因组提取试剂盒进行HPV病毒DNA分离提取。

1.3.3 检测步骤 按照试剂盒说明书将提取好的HPV病毒DNA进行PCR扩增，然后导流杂交及结果判读。检测的21种基因型包括15种高危型（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68）和 6 种低危型（HPV6、11、42、43、44、CP8304）。

1.4 统计学处理

计算HPV不同基因型的感染率。通过SPSS 16.0软件，应用行×列表资料的χ2检验，P＜0.05认为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2 784例年龄分组的检测结果

实验将筛查女性分为5个年龄段分析，21～30岁、31～40岁、41～50岁、51～60岁、≥61岁。各年龄组HPV感染阳性率分别为37.47%，30.02%，29.64%，33.50%，41.18%。见表1。

通过SPSS 16.0软件，应用行×列表资料的χ2检验，对各年龄组的感染率进行比较，结果显示P＜0.05，认为各年龄组感染率差别具有统计学意义。

2.2 2 784例HPV基因分型的检测结果

2 784例标本中共筛查出HPV阳性标本760例，阳性率为27.30%。760例高危型中前五位的依次是HPV52（23.95%）、HPV16（15.13%）、HPV58（14.08%）、HPV53（11.71%）、HPV68（11.32%）。HPV基因型单一感染558例（73.42%），二重感染143例（18.82%），三重感染43例（5.66%），四重感染11例（1.45%），五重感染4例（0.53%）六重感染0例（0%），七重感染1例（0.13%），见表2～4。

3 讨论

宫颈癌是女性恶性肿瘤中发病率居第二位的恶性肿瘤，严重威胁着女性健康。而宫颈癌发生的重要原因是高危型HPV的持续感染，以及多重HPV感染[3]。有研究显示，在国内与宫颈癌的发病密切相关的HPV高危型是HPV16、HPV18、HPV45、HPV31、HPV33型，其中HPV16、HPV18两型最常见[4-5]。因此检测HPV的感染，及早发现HPV感染类型，并且进行有针对性的预防接种，能够在一定程度上减少宫颈癌的发生。

不同国家和地区，不同的检测方法以及不同受检人群HPV感染率及感染亚型分布均存在差异，因此HPV感染具有较强的地域性[6-7]。因此，对本地区女性进行HPV检测和筛查，从而了解本地区不同年龄阶段女性HPV感染的主要类型，并且有针对性的对本地区各年龄阶段女性HPV感染的主要基因型进行疫苗接种，可降低本地区成年女性宫颈癌的发病率。

表1 各年龄HPV检出数

表2 HPV高危型检出数

表3 HPV低危型检出数

表4 HPV感染检测结果

本研究结果显示，2 784例标本经HPV基因分型检测共筛查出HPV阳性760例，HPV感染率为27.30%，与文献报道的HPV人群感染率为20%～46%一致[8]。本研究共检测出21种HPV基因型。对各年龄组的感染率进行比较，结果P＜0.05，认为各年龄组感染率差别具有统计学意义。即认为HPV感染率在各年龄组之间有差异，21～30岁组为第一个感染高峰期，感染率为37.47%。这与番云华[8]报道的感染高峰在31～40岁年龄段不一致。21～30岁组为本研究第一个感染高峰期，原因一可能因为21～30岁组妇女为性活跃人群，导致感染率相对较高；原因二可能因为21～30岁组妇女个人卫生习惯缺乏及健康意识淡薄；原因三年纪越轻的女性，由于宫颈还不够成熟，更容易感染HPV；原因四可能与检测人群和地域有关。研究表明[9]，在30岁之前感染HPV，可能由于机体免疫力比较强，一般感染的HPV在短期内会自动消失，但是有再次感染的可能。61岁以上组为第二个感染高峰期，感染率为41.18%，原因一可能是此阶段妇女机体抵抗力下降，因此更容易感染HPV病毒；原因二是61岁以上组（老年人）很少来医院做常规体检，表1显示61岁以上组筛查HPV的人数仅51人，低于其他年龄组检查人数，来医院就诊时患者已经出现比较严重的临床症状，这也可能是其感染率高的一个原因。

本研究还显示，福州地区人群中感染最多的亚型依次是HPV52（23.95%）、HPV16（15.13%）、HPV58（14.08%）、HPV53（11.71%）、HPV68（11.32%）。在HPV阳性患者中，单一亚型感染者共558例，占阳性患者的73.42%（558/760），2种亚型混合感染者占18.82%（143/760），3种亚型感染者占5.66%（43/760），4种亚型感染者占1.45%（11/760），5种亚型感染者占0.53%（4/760），6种亚型感染者占0%（0/760），7种亚型感染者占0.13%（1/760）。本地区显示在感染HPV的女性中，HPV亚型的占前三位的是HPV52（23.95%）、HPV16（15.13%）、HPV58（14.08%）。因此对于本研究HPV亚型高检出率HPV52、HPV16、HPV58，应该注意及时的预防。

低危型HPV与尖锐湿疣等有关，一般不会诱发宫颈癌。HPV低危型检出率分别为：HPV6（4.74%）、11（3.55%）、42（0.92%）、43（0%）、44（1.71%）、CP8304（9.08%）。本研究低危型检出率较低。

随着HPV检查的普及，在本地区对成年女性开展大规模HPV病毒的21种分型检测的筛查，并且针对患者检出的HPV感染的主要类型进行疫苗接种，可减少本地区女性宫颈癌的患病率。同时大规模HPV病毒分型检测的筛查，对早期发现及防治宫颈癌具有重要指导价值。

[1] 李凌佳，张胜，顾华，等． HPV感染基因型分布的回顾性分析[J]．皮肤病与性病，2016，38（1）：5-8．

[2] 孙晔． 586例宫颈疾病患者HPV检测结果分析[J]． 国际检验医学杂志，2015，37（12）：1777-1779．

[3] 吴跃琼． HPV在妇女健康体检中的意义[J]． 中国社区医师，2016，32（5）：135，137．

[4] 王宏景，龙秀荣，耿建祥，等．宫颈癌瘤组织中HPV感染基因型分布的比较研究[J]．国际检验医学杂志，2014，36（5）：533-535．

[5] 殷艳，韦业平，黄燕，等． HPV分型检测在宫颈细胞学阴性妇女宫颈病变诊断中的临床意义[J]． 山西医科大学学报，2016，47（3）：281-284．

[6] Peng RR，Li HM，Chang H，et a1．Prevalence and genotype distribution of cervical human papillomavirus infection among female sex workers in Asia：a systematic literature review and metaanalysis[J]．Sex Health，2012，9（2）：113-119．

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[9] 张立娟，武佳蕾，孙树荣． 北京市北苑地区女性HPV感染现状及基因型分布研究[J]． 标记免疫分析与临床，2016，23（1）：15-18．

Results Analysis of Fuzhou Women Human Papilloma Virus Test

ZHU Ailan JIANG Fanghua WEI Jianwei Department Clinical Laboratory, The Second Affiliated Hospital of Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou Fujian 350001, China

ObjectiveTo investigate the current status of HPV and the distribution of HPV subtypes in women in fuzhou.Methods2 784 cases of clinic women adopt the method of nucleic acids rapid diversion hybrid gene chip detection of HPV and its subtype.ResultsIn 2 784 cases of women, there were 760 cases of HPV positive. infection rate was 27.30%;The top 5 ranking of HPV high-risk subtypes were: HPV52 (23.95%),HPV16 (15.13%), HPV58 (14.08%), HPV53 (11.71%), HPV68 (11.32%).Single HPV infection in 558 cases (73.42%), double infection in 143 cases(18.82%), triple infection in 43 cases (5.66%), four heavy infection in 11 cases (1.45%), and five heavy infection in 4 cases (0.53%), six infection in 0 cases (0%), infection of seven heavy infection, 1 case (0.13%).ConclusionThe region is mainly HPV52 and HPV16, HPV58 subtype infection. HPV typing and epidemiological investigation are helpful to guide women's health screening and treatment in this area.

human papilloma virus; gene chip; HPV subtypes

R181

A

1674-9316（2017）20-0002-04

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．20．002

福建省福州市福建中医药大学附属第二人民医院检验科，福建 福州 350001