鸡蛋花水提液对小肠收缩活动的影响

杨文林+张航+陆秋娜+齐梁煜+黄月维+毛丽雪+黄彦峰

【摘要】目的探讨鸡蛋花水提液对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响。方法采用小肠平滑肌离体灌流实验方法，观察鸡蛋花水提液对正常、抑制剂（阿托品）诱导的离体小肠平滑肌收缩幅度和频率的影响。结果低、中、高三个剂量组的鸡蛋花水提液均对正常家兔离体十二指肠平滑肌收缩幅度和频率有明显的兴奋作用，低、中两个剂量均对正常家兔离体空肠收缩幅度和频率有明显的兴奋作用，低、中、高三个剂量均对正常家兔离体回肠收缩幅度和频率有明显的抑制作用；鸡蛋花水提液对阿托品诱导的舒张十二指肠、空肠平滑肌收缩幅度和频率各有不同程度的拮抗作用，同时能协同阿托品抑制回肠平滑肌收缩幅度和频率。结论鸡蛋花水提液能兴奋十二指肠、空肠平滑肌收缩幅度和频率，抑制回肠平滑肌收缩幅度和频率，其机制可能与M胆碱受体有关，此外，也可能与肾上腺素能α或β受体有关。

【关键词】鸡蛋花水提液；离体小肠平滑肌；阿托品

中图分类号：R285.5 文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2017.04.016

【Abstract】ObjectiveTo observe the effect of plumier rubra L water extract on isolated small intestinal contractive activity of domestic rabbit.MethodsAn experimental method of small intestinal smooth muscle in vitro perfusion was used to observe the effect of plumier rubra L water extract on contraction amplitude and frequency of isolated small intestinal smooth muscle induced by normal or inhibitor（atropine）.ResultsThe plumier rubra water L extract of low，medium and high dose group had obviously excitatory effect on contraction amplitude and frequency of isolated duodenum smooth muscle of normal domestic rabbit.And the low and high dose of plumier rubra water L extract had obviously excitatory effect on amplitude and frequency of isolated jejunal contraction of normal domestic rabbit.In addition，the low，medium and high dose group had an inhibiting effect on amplitude and frequency of isolated ileum contraction of normal domestic rabbit.Plumier rubra water L extract had varying degrees of antagonistic effect on amplitude and frequency of duodenal and jejunal smooth muscle contraction induced by atropine，meanwhile，it could cooperate with atropine to inhibit the amplitude and frequency of ileum smooth muscle contraction.ConclusionPlumier rubra water L extract can stimulate the amplitude and frequency of duodenum and jejunum smooth muscle contraction，inhibit the amplitude and frequency of ileum smooth muscle contraction，and its mechanism may be related to M cholinergic receptor.In addition，it may also be associated with adrenergic α or β receptors.

【Key words】plumier rubra L water extract；smooth muscles of isolated small intestine；atropine

鸡蛋花（Plumeria rubra L ）是夹竹桃科（Apocynaceae）鸡蛋花属小乔木，原产于热带美洲，现广泛栽种于全球热带地区，在我国则主产于广东、福建、广西、海南等地。鸡蛋花中含有多种化学成分，可分离出环烯醚萜类、三萜类、黄酮醇类、醇类、醛类、脂肪酸类等成分，且可制作凉茶用于治疗妇科疾病[1～2]，具有抑菌、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血脂等作用[3]，也有清热解毒和润肺止咳功能，临床上可用于湿热下痢、里急后重等症[1]。但鸡蛋花对离体小肠平滑肌收缩活动是否有影响未见报道，故本实验以家兔为研究对象，观察鸡蛋花水提液对正常、抑制剂（阿托品） 诱导的离体小肠平滑肌收缩活动的变化，旨在为临床应用鸡蛋花提供实验依据。

1材料与方法

1.1試剂鸡蛋花花瓣（广西贵港市绿之源种植发展有限公司中药饮片厂），硫酸阿托品注射液（河南弘制药股份有限公司，批号：1407252）。endprint

1.2动物家兔10只，体重2～3 kg，雌雄不限，由右江民族医学院实验动物中心提供。

1.3仪器BL-420F生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司），HW-400E恒温平滑肌槽（成都泰盟科技有限公司），JH-2型肌张力换能器（北京航天医学工程研究所，50 g）。

1.4实验步骤

1.4.1鸡蛋花水提液的制备称取干燥鸡蛋花花瓣400 g，加入10倍的蒸馏水（4000 ml）常温浸泡1 h，武火煮沸后文火煎煮1 h，过滤，滤渣再加入蒸馏水3200 ml，用武火煮沸后再文火煎煮1 h，过滤，将两次滤液经抽滤器抽滤，隔水蒸发浓缩，含生药为2 g/ml，冰箱冷藏，用时恢复常温。

1.4.2家兔离体小肠的制备家兔禁食24 h，自由饮水，实验前1 h进食，实验时用木棒钝击后枕处死，立即剖腹分离十二指肠、空肠、回肠，各段取20 cm肠段，将其剪成1～2 cm于室温台式液清除内容物，再将洗净后的肠段分别置于有台式液（参照实验生理科学的方法制备）[4]的培养皿中，通入空气。

1.4.3实验方法 取小肠分为十二指肠、空肠、回肠三部分，每部分小肠分低、中、高（终浓度分别为1.6×10-6 g/L；2.4×10-6 g/L；3.2×10-6 g/L）、阿托品、阿托品+中剂量鸡蛋花水提液5个组，每组分10段肠管。取一段肠管安放在38℃台氏液的HW-400E恒温平滑肌槽内，一端固定在玻璃通气钩上，另一端固定于张力换能器上与BL-420F生物机能实验系统相连。维持浴槽内台氏液温度至（38±0.5）℃，并持续均速通入空气（约每分钟 60个气泡），调节肠肌收缩的前负荷为2.0 g，平衡30 min，实验时，记录正常小肠平滑肌活动曲线，然后用微量移液器向平滑肌槽中加入各种药物，记录给药前后2 min肠管的运动波形，台式液冲洗2次，待稳定后加入受体阻断剂阿托品200 μL，观察及记录小肠平滑肌收缩曲线变化，待稳定后再加入中剂量鸡蛋花水提液，观察小肠收缩曲线。比较加入不同剂量鸡蛋花水提液前后小肠平滑肌收缩幅度及收缩频率的变化，观察鸡蛋花水提液对受体阻断剂阿托品诱导小肠平滑肌舒张作用的影响。

1.5统计学方法采用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组内干预前后比较采用配对t检验，组间比较采用两独立样本t检验，检验水准：α=0.05，双侧检验。

2结果

2.1不同剂量鸡蛋花水提液对离体小肠收缩活动的影响给药前后进行比较，低、中、高三个剂量组的十二指肠平滑肌收缩幅度增强（P<0.01）、频率增快（P<0.05），提示鸡蛋花水提液对十二指肠平滑肌收缩有兴奋作用；与给药前比较，低剂量鸡蛋花水提液均使空肠平滑肌收缩频率增快、幅度增大（P<0.01），中剂量鸡蛋花水提液均使空肠平滑肌收缩频率增快（P<0.01）、幅度增大（P<0.05），高剂量鸡蛋花水提液可使空肠平滑肌收缩幅度增大（P<0.01），但频率改变不显著（P>0.05），提示鸡蛋花水提液对空肠平滑肌收缩具有兴奋作用；与给药前比较，低、中剂量鸡蛋花水提液均使回肠平滑肌收缩频率减慢、幅度减小（P<0.05），高剂量鸡蛋花水提液均使回肠平滑肌收缩频率减慢（P<0.05）、幅度减小（P<0.01），提示鸡蛋花水提液对回肠平滑肌收缩具有抑制作用。见表1。

2.2鸡蛋花水提液对阿托品所致十二指肠平滑肌效应的影响与给药前比较，加入阿托品后十二指肠收缩频率减慢、幅度减小（P<0.01），与阿托品组比较，加入鸡蛋花水提液800 μL后十二指肠平滑肌收缩频率增快、幅度增大（P<0.01），提示鸡蛋花水提液可拮抗阿托品抑制十二指肠平滑肌收缩作用；与给药前比较，加入阿托品后空肠平滑肌收缩频率减慢、幅度减小（P<0.01），与阿托品组比较，加入鸡蛋花水提液800 μL后空肠平滑肌收缩频率增快、幅度增大（P<0.01），提示鸡蛋花水提液可拮抗阿托品抑制空肠平滑肌收缩作用；与给药前比较，加入阿托品后回肠平滑肌收缩频率减慢、幅度减小（P<0.01），与给阿托品组比较，加入鸡蛋花水提液800 μL后回肠平滑肌收缩频率减慢（P<0.01）、振幅减小（P<0.05），提示鸡蛋花水提液可协同阿托品抑制回肠平滑肌收缩作用。见表2。

3讨论

现已证明，胃肠运动的调节由交感神经、副交感神经系统，肠神经系统以及神经递质和胃肠激素等控制，在离体实验中小肠运动脱离神经支配，也不受机体内分泌激素的影响，鸡蛋花水提液对十二指、空肠平滑肌收缩幅度和频率有兴奋作用，使自发活动张力增加，振幅增大，频率加快；而对家兔离体回肠则呈抑制作用，使自发活动张力下降，振幅减小，频率减慢。提示鸡蛋花水提液对家兔离体小肠不同部位呈现不同的作用，可能与中草药成分有关，其机制有待于进一步研究。

胃肠道存在着多种受体，如胆碱能M受体、肾上腺素能α和β受体、组胺受体、胃泌素受体等[5]。实验结果表明，加入鸡蛋花水提液使离体十二指肠、空肠收缩幅度、频率增高，阿托品+鸡蛋花水提液组给药后离体十二指肠、空肠平滑肌的收缩幅度和频率高于单纯阿托品组，提示鸡蛋花水提液有促进十二指肠、空肠收缩作用及对阿托品有拮抗阿作用。阿托品为胆碱能M受体阻断剂，与M受体结合后占领位点，竞争性拮抗乙酰胆碱（Ach）的激动作用[6]。而Ach是平滑肌内兴奋传递的化学物质能，激动M胆碱受体使胞内第二信、三磷酸肌醇（IP3）和二酰基甘油（DG）浓度上升，进而引起Ca2+释放和底物蛋白磷酸化激发平滑肌产生收缩效应[7]。推测，一方面可能鸡蛋花水提液中含有乙酰胆碱受体激动剂成分，加入鸡蛋花水提液后，通过激动胆碱能M受体引起平滑肌细胞肌浆网内储存的Ca2+释放至胞质，使胞内Ca2+浓度达到一定水平时，触发促平滑肌收缩；另一方面可能是鸡蛋花水提液中含有某种成分，该成分可刺激副交感神经节后纤维释放乙酰胆碱，激活十二指肠、空肠平滑肌细胞M受体，促进胃肠运动，使平滑肌收缩幅度及频率增高并拮抗阿托品抑制平滑肌收缩。鸡蛋花水提液组给药后，回肠收缩幅度、频率降低，阿托品+鸡蛋花水提液组给药后回肠平滑肌收缩幅度、频率低于单纯阿托品组，提示鸡蛋花水提液可抑制回肠收缩作用及对阿托品有拮抗作用。交感神经节后纤维末梢释放去甲肾上腺素，然后进一步经苯乙胺-N-甲基转移酶的作用， 使去甲肾上腺素甲基化形成肾上腺素，作用于胃肠道平滑肌细胞膜上的肾上腺素能受体，使胃肠平滑肌张力降低[8]，推测是鸡蛋花水提液中某种成分激动回肠平滑肌上的肾上腺素能α或β受体，从而引起回肠平滑肌舒张以及协同阿托品抑制回肠收缩活动，具体的作用机制有待研究。

综上所述，鸡蛋花水提液能興奋十二指肠、空肠平滑肌收缩幅度和频率，抑制回肠平滑肌收缩幅度和频率，其机制除与M胆碱受体有关外，也可能与肾上腺素能α或β受体等有关。

参考文献

[1] 邓仙梅，刘敬，谢文琼，等.凉茶常用药材鸡蛋花的研究进展[J].时珍国医国药，2014，25（1）：198-200.

[2] 洪挺，余勃，陆豫，等.鸡蛋花中化学成分及生物活性研究进展[J].天然产物研究与开发，2011，23（3）：565-570，589.

[3] 高则睿，黄静，刘劲芸，等.鸡蛋花挥发性成分及药理作用研究进展[J].安徽农业科学，2012，40（19）：10067-10070.

[4] 陈世民，莫燕娜，赵善民，等.实验生理科学[M].2版.上海：上海科学技术出版社，2011：60.

[5] 陈君，郭建生，刘红艳，等.陈皮四大药用部位对豚鼠离体回肠的影响[J].中药药理与临床，2011，27（3）：79-81.

[6] 向德标，阳漾，刘小娟，等.地锦草醇提物对兔离体小肠平滑肌作用及机制研究[J].中国医院药学杂志，2015，35（15）：1371-1375.

[7] 张佳，邵正威，高雅，等.槲皮素对兔离体肠平滑肌的舒张作用及其机制[J].中国应用生理学杂志，2013，29（2）：162-165.

[8] 黄彦峰，何显教，晋玲，等.重楼水提液对小鼠胃肠运动功能的影响[J].医药导报，2014，33（4）：442-445.endprint