三种感染标志物诊断儿童脓毒症细菌感染的价值

莫庆仪，周涛，黄晓雯，梁桂明，马力忠，卢象对

(南方医科大学附属中山博爱医院儿科1、检验科2，广东中山528403)

三种感染标志物诊断儿童脓毒症细菌感染的价值

莫庆仪1，周涛1，黄晓雯1，梁桂明1，马力忠1，卢象对2

(南方医科大学附属中山博爱医院儿科1、检验科2，广东中山528403)

目的探讨C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)及中性粒细胞CD64对儿童脓毒症细菌感染的诊断价值。方法选取我院2015年6月至2016年12月间收治的脓毒症细菌感染患者45例为观察组，同时间段健康儿童45例为对照组。检测并比较观察组患者治疗前后CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平的差异，并与对照组受检者进行比较，观察其诊断效力。结果治疗前，观察组患者和对照组的CRP[(21.4±6.5)mg/L vs(6.6±2.3)mg/L]、PCT [(11.9±3.6)µg/L vs(0.5±0.2)µg/L]及中性粒细胞CD64[(66.7±18.4)MFI vs(24.5±6.2)MFI]水平比较，观察组均明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；观察组患者治疗前后的CRP[(13.6±4.2)mg/L vs(21.4±6.5)mg/L]、PCT [(4.8±1.7)µg/L vs(11.9±3.6)µg/L]及中性粒细胞CD64[(39.8±15.6)MFI vs(66.7±18.4)MFI]水平比较，治疗后均明显低于治疗前，差异均有统计学意义(P＜0.05)，但仍均明显高于对照组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)；三种感染标志物联合应用明显提高了诊断效力，其诊断敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度分别达95.6%、97.8%、97.7%、95.7及96.7%。结论脓毒症细菌感染患者均存在CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平升高，三者联合应用可以明显提高诊断效力。

脓毒症；细菌；C反应蛋白；降钙素原；中性粒细胞CD64

儿童脓毒症细菌感染起病急骤、进展迅速，若得不到及时诊治，可能导致脓毒症休克、多器官功能衰竭，患者死亡率极高。研究显示，儿童脓毒症细菌感染的死亡率高达23.3%～47.4%[1]。脓毒症的早期诊断难度较大，主要依靠患者临床表现、血常规检查、细菌相关检查等，但其均缺乏特异性[2]。C-反应蛋白(CRP)及降钙素原(procalcitonin，PCT)是细菌性感染敏感指标，对评价感染病变存在、严重程度方面具有一定的价值[3]。中性粒细胞CD64可以识别IgGFc片段受体，能够更敏感的反应炎性反应、免疫反应的存在[4]。本研究旨在通过对照研究，探讨CRP、PCT及中性粒细胞CD64对儿童脓毒症细菌感染的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取我院2015年6月至2016年12月期间收治的脓毒症细菌感染患者45例为观察组，其中男性26例，女性19例；年龄3～13岁，平均(8.5± 1.2)岁；病程1～7 d，平均(4.1±1.1)d。纳入标准：①符合脓毒症诊断标准[5]：体温＞38.3℃或≤36℃，心率≥90次/min或高于同龄正常值2个标准差以上，严重水肿，血糖＞7.7 mmol/L；白细胞计数＞12×109/L或＜4×109/L，CPR及PCT高于正常值2个标准差以上；血氧降低＜90/60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)；尿量＜0.5 mL/kg·h达2 h以上；乳酸＞1 mmol/L。②年龄＜14岁；③初次就诊；④临床、实验室检查及影像学检查资料完整；⑤符合知情同意原则。排除标准：①恶性肿瘤；②先天畸形；③自身免疫系统疾患及结缔组织病；④严重创伤及应激状态；⑤2周内手术史者；⑥严重心肝肾功能不全；⑦排除死亡及其他各种原因不能配合研究者。选择同时间段健康儿童45例为对照组，其中男性25例，女性20例；年龄3～14岁，平均(8.2±1.5)岁。两组受检者在性别、年龄方面比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治疗方法入院后观察组患者进行血培养，根据药敏实验给予抗感染治疗，其他治疗包括补液治疗、维持酸碱、电解质平衡治疗等对症支持治疗。

1.3 观察指标检测并观察脓毒症患者治疗前后、对照组CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平的差异。计算和比较CRP、PCT及中性粒细胞CD64对儿童脓毒症细菌感染的诊断效力。

1.4 检测方法分别于治疗前、治疗后2周抽取观察组患者清晨空腹静脉血5 mL，检测CPR、PCT及中性粒细胞CD64。并取对照组受检者清晨空腹静脉血检测CPR、PCT及中性粒细胞CD64为对照。血液标本经抗凝、离心(美国BECKMAN A1330011型离心机，3 000 r/min离心10 min)处理后冷藏(-20℃环境)备检。检查设备选择美国Becton-Dickinson公司生产的流式细胞分析仪，CRP检测采用免疫比浊法，PCT检测采用免疫荧光双抗体夹心法，中性粒细胞CD64检测采用流式细胞术。试剂盒均由深圳国赛生物技术有限公司提供。以CRP≥8.0 mg/L、PCT≥0.5 ug/L、中性粒细胞CD64≥35 MFI为阳性。

1.5 统计学方法应用SPSS18.0统计软件包进行数据分析，正态分布的各统计指标均以均数±标准差()表示，组间数值比较采用t检验，相关性分析采用Spearman相关性分析，均以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 观察组患者治疗前后CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平与对照组比较治疗前，观察组患者的CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平均明显高于对照组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。治疗后，观察组患者CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平均明显低于治疗前，差异具有统计学意义(P＜0.05)，但仍均明显高于对照组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 观察组患者治疗前后CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平与对照组比较()

表1 观察组患者治疗前后CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平与对照组比较()

注：与对照组比较，at=8.765、9.857、10.654、3.482、4.812、5.235，P＜0.05；与观察组治疗前比较，bt=5.436、7.637、8.564，P＜0.05。

组别观察组例数45时间治疗前治疗后对照组45 CRP(mg/L) 21.4±6.5a13.6±4.2ab6.6±2.3 PCT(mg/L) 11.9±3.6a4.8±1.7ab0.5±0.2中性粒细胞CD64(MFI) 66.7±18.4a39.8±15.6ab24.5±6.2

2.2 CRP、PCT及中性粒细胞CD64诊断脓毒症细菌感染的效力三种感染标志物中，CRP对脓毒症细菌感染患者诊断效力最低，中性粒细胞CD64最高。三种联合应用明显提高了诊断效力，其诊断敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度分别达95.6%、97.8%、97.7%、95.7及96.7%。

表2 CRP、PCT及中性粒细胞CD64诊断脓毒症细菌感染的效力

3 讨论

若细菌感染得不到有效的控制，感染扩散及反复的刺激会导致全身性恶性炎症性反应性疾病，称为脓毒症。脓毒症患者体内多个器官存在感染，细菌随着血液循环播散，导致机体免疫系统激活、炎性因子大量释放，患者病情变化复杂，死亡率高[6]。及时和准确的诊断是采取合理治疗方案的基础，以往脓毒症的诊断依靠临床症状体征，体温、实验室培养及白细胞计数等常规检查指标，诊断效力有限，不能满足临床诊疗的需要。

CRP由肝脏合成和释放，在急性炎性反应及应激状态下合成明显增加，它属于一种急性相蛋白，反映机体非特异性免疫机制的功能，一般认为CRP水平高于100 mg/L代表存在严重的炎性病变[7]。PCT是一种糖蛋白，含116个氨基酸，是降钙素的前肽物质。正常人血清PCT含量极低，但在炎性反应及应激状态下，患者PCT水平会明显升高，这可能与甲状腺C细胞以外的其他细胞大量分泌有关。有研究显示，脓毒症细菌感染患者会抑制PCT分解成降钙素，导致血清内PCT积聚增多[8]。也有研究显示，在严重炎性反应的刺激下，脓毒症细菌感染患者肝脏、肾脏、肌肉中会产生和释放大量的PCT，且随着患者病情的加重，其血清PCT水平明显升高[9]。中性粒细胞CD64是免疫球蛋白超家族的一员，其分子量为72 kD，可以识别IgGFc片段受体。在脓毒症细菌感染患者，细菌直接刺激或者通过释放相关的炎性因子刺激中性粒细胞表达大量的CD64，在患者发病4～6 h，中性粒细胞CD64即可以明显升高[10]。

本研究中，观察组患者CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平均显著高于对照组，治疗后，观察组患者CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平均显著低于治疗前，但仍均显著高于对照组，说明脓毒症细菌感染患者体内CRP、PCT及中性粒细胞CD64水平存在显著的升高，三者可以用于脓毒症细菌感染患者的诊断。通过对三种诊断效力的分析，本研究显示，CRP对脓毒症细菌感染患者诊断效力最低，中性粒细胞CD64最高。三种感染标志物联合应用明显提高了诊断效力，其诊断敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度均达95%以上。提示中性粒细胞CD64检测对脓毒症细菌感染的诊断效力更高，且通过CRP、PCT及中性粒细胞CD64的联合检测，更有利于对脓毒症细菌感染进行准确的诊断。

综上所述，脓毒症细菌感染患者均存在CRP、PCT及中性粒细胞CD64，三者联合应用可以明显提高诊断效力。

[1]李远华,宋秀婵,戚应静,等.血浆N末端脑钠肽前体对严重脓毒症和脓毒症休克患者预后判断的价值[J].重庆医学,2013,42(33): 4012-4013.

[2]刘占国,蔡靓,龙国良.脓毒症患者血清白细胞介素-6的检测及意义[J].广东医学,2012,33(24):3762-3764.

[3]孙胜男,吕菁君,魏捷等.脓毒症患者降钙素原浓度与病原学感染证据之间的相关性研究[J].中华急诊医学杂志,2013,22(10): 1136-1141.

[4]阮莉莉,杜俊君.CD64指数在新生儿脓毒症早期诊断中的意义[J].上海交通大学学报:医学版,2014,34(10):1503-1505.

[5]李玖军,邹凝,潘佳丽.儿童脓毒症诊断标准及鉴别诊断[J].中国中西医结合儿科学,2015,7(4):289-292.

[6]李丽娟,林江涛,苏楠,等.PCT和CRP联合检测在革兰阴性杆菌血流感染脓毒症患者中的临床研究[J].中国急救医学,2013,33(7): 608-611.

[7]戢文利,周青山.脓毒症患者血浆PCT、NT-pro-BNP与cTnT水平检测的临床意义[J].中国感染控制杂志,2016,15(6):412-416.

[8]刘文娟,韩再萍,田先雨,等.血清PCT和IL-6水平在脓毒症患儿中的诊断价值[J].中国妇幼保健,2012,27(30):4728-4730.

[9]刘林华.血清PCT监测在脓毒血症患者病情监测和预后评估中的应用[J]．实用预防医学,2012,19(5):745-746.

[10]柳权,张立明,王润秀,等.中性粒细胞CD64与C反应蛋白对烧伤脓毒症的诊断价值[J].中国感染与化疗杂志,2014,14(2):89-93.

Value of three kinds of infection markers in the diagnosis of bacterial infection in children with sepsis.

MO Qingyi1, ZHOU Tao1,HUANG Xiao-wen1,LIANG Gui-ming1,MA Li-zhong1,LU Xiang-dui2.Department of Pediatrics1, Department of Clinical Laboratory2,BOAI Hospital of Zhongshan Affiliated to Southern Medical University,Zhongshan 528403,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of C-reactive protein(CRP),procalcitonin(PCT)and neutrophil CD64 in children with sepsis.MethodsA total of 45 children with bacterial infection,wo admitted to our hospital from June 2015 to December 2016,were selected as the research subjects.At the same time,45 healthy children were selected as the control group.The differences of CRP,PCT and neutrophil CD64 levels in the observation group before and after treatment,which also were detected and observed in the control group,and the diagnostic effectiveness were observed.ResultsBefore the treatment,the levels of CRP,PCT and neutrophil CD64 in the observation group were respectively(11.9±3.6)ug/L,(21.4±6.5)mg/L and(66.7±18.4)MFI,which were significantly higher than(6.6+ 2.3)mg/L,(0.5±0.2)ug/L,(24.5±6.2)MFI in the control group(P＜0.05).After the treatment,the levels of CRP,PCT and neutrophil CD64 in the observation group were(13.6±4.2)mg/L,(4.8±1.7)ug/L,(39.8±15.6)MFI,which were significantly lower than those before the treatment(P＜0.05),but they were all still significantly higher than those in the control group(P＜0.05).The combined use of three kinds of infection markers significantly improved the diagnostic efficacy, the diagnostic sensitivity,specificity,positive predictive value,negative predictive value and accuracy were 95.6%, 97.8%,97.7%,95.7 and 96.7%,respectively.ConclusionThe children with sepsis bacterial infection have elevated levels of CRP,PCT and neutrophil CD64 levels,and The combined use of three kinds of infection markers significantly improved the diagnostic effectiveness.

Sepsis;Bacteria;C reactive protein(CRP);Procalcitonin(PCT);Neutrophil CD64

R726

A

1003—6350（2017）16—2647—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.16.021

2017-03-08)

广东省中山市科技局2015年度科技计划项目(编号：2015SYF0104)

周涛。E-mail：taozhoul@163.com